摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第1章 研究背景 | 第10-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-30页 |
2.1 材料 | 第14-16页 |
2.1.1 主要仪器 | 第14-15页 |
2.1.2 耗材与试剂 | 第15-16页 |
2.2 方法 | 第16-30页 |
2.2.1 实验试剂的配制 | 第16-17页 |
2.2.2 人源永生化肝细胞LO2细胞的复苏、传代、冻存、分化 | 第17-18页 |
2.2.3 原代小鼠肝细胞提取与培养 | 第18-19页 |
2.2.4 海马线粒体应激测试 | 第19-20页 |
2.2.5 肝组织与细胞的油红O染色 | 第20-21页 |
2.2.6 肝细胞甘油三酯和胆固醇提取检测 | 第21页 |
2.2.7 肝组织脂质抽提 | 第21页 |
2.2.8 免疫组化 | 第21-23页 |
2.2.8.1 免疫组化石蜡切片制作 | 第21-22页 |
2.2.8.2 免疫组化石蜡切片染色 | 第22-23页 |
2.2.9 SiRNA转染 | 第23-24页 |
2.2.10 慢病毒过表达NOD | 第24页 |
2.2.11 RNA提取 | 第24页 |
2.2.12 逆转录反应 | 第24-25页 |
2.2.13 实时定量PCR | 第25-26页 |
2.2.14 蛋白的核质分离 | 第26-27页 |
2.2.15 蛋白表达分析(WesternBlotting) | 第27-29页 |
2.2.16 统计学处理 | 第29-30页 |
第3章 结果 | 第30-53页 |
3.1 小鼠腹腔注射PGN可以引起胰岛素抵抗 | 第30-32页 |
3.2 PGN可以引起小鼠肝脏脂肪性变 | 第32-35页 |
3.3 PGN可诱导小鼠肠道拟杆菌比例下降而厚壁菌比例增多 | 第35-36页 |
3.4 PGN可以通过上调NFκB引起小鼠肝脏及脂肪组织炎症反应 | 第36-39页 |
3.5 PGN通过激活相应信号通路(AMPK/SREBP1,PPARγ/CD36)促进肝脏甘油三酯合成与肝脏脂肪酸摄取 | 第39-41页 |
3.6 高脂可以诱导小鼠肝脏TLR2表达升高 | 第41-42页 |
3.7 PGN可以直接诱导原代小鼠肝细胞及LO2细胞合成甘油三酯 | 第42-44页 |
3.8 PGN可以通过抑制脂质β氧化促进LO2细胞内脂质堆积 | 第44-45页 |
3.9 PGN直接通过激活相应信号通路(AMPK/SREBP1,PPARγ/CD36)促进原代肝细胞及LO2细胞甘油三酯合成与脂肪酸摄取 | 第45-48页 |
3.10 PGN可以激活原代小鼠肝细胞及LO2细胞NFκB炎症信号通路 | 第48-49页 |
3.11 PGN可以上调LO2细胞内TLR2,NOD1和NOD2mRNA水平 | 第49页 |
3.12 敲减TLR2不能改善PGN诱导的LO2细胞内甘油三酯堆积 | 第49-51页 |
3.13 过表达NOD2可以上调NFκB/PPARγ/CD36信号转导通路 | 第51-53页 |
第4章 讨论 | 第53-57页 |
第5章 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
附录 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |