致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-10页 |
英文摘要 | 第10-15页 |
引言 | 第15-18页 |
实验仪器与材料 | 第18-20页 |
1、实验材料 | 第18页 |
2、主要试剂与仪器 | 第18-20页 |
实验方法 | 第20-24页 |
1、人脐静脉血管内皮细胞培养 | 第20页 |
2、缺糖缺氧诱导血管内皮细胞损伤时效实验 | 第20页 |
3、JC-1染色检测缺糖缺氧条件下线粒体膜电位 | 第20-21页 |
4、免疫细胞化学法检测氧化应激相关蛋白 | 第21页 |
5、流式细胞术定量检测测细胞线粒体膜电位变化和血管内皮细胞凋亡率 | 第21页 |
6、Western-blot检测氧化应激关联蛋白表达 | 第21-23页 |
7、透射电镜观察 | 第23页 |
8、基因芯片样本处理 | 第23页 |
9、数据统计 | 第23-24页 |
第一部分 血管内皮细胞缺糖缺氧模型建立及线粒体氧化应激信号通路参与内皮细胞凋亡机制研究 | 第24-32页 |
1 实验结果 | 第25-30页 |
·、缺糖缺氧处理不同时间后血管内皮细胞存活分数 | 第25页 |
·、缺糖缺氧处理不同时间后血管内皮细胞表型变化 | 第25-30页 |
·缺糖缺氧处理不同时间细胞形态学变化 | 第25-26页 |
·电镜观察缺糖缺氧条件下血管内皮细胞亚细胞结构变化 | 第26-27页 |
·缺糖缺氧处理不同时间线粒体膜电位变化情况 | 第27-29页 |
·Western blot检测缺糖缺氧条件下相关蛋白表达变化 | 第29-30页 |
·免疫细胞化学检测缺糖缺氧条件下Omi/HtrA2表达变化 | 第30页 |
2、实验小结 | 第30-32页 |
第二部分 血管内皮细胞损伤信号途径的内在关联性及药物调控 | 第32-38页 |
1、实验结果 | 第32-37页 |
·、细胞兰检测药物靶点调控对血管内皮细胞存活分数影响 | 第32-34页 |
·、Western blot法检测药物靶点调控对血管内皮细胞损伤信号途径关联蛋白表达变化 | 第34-36页 |
·、Annexin/PI检测药物靶点调控对血管内皮细胞凋亡 | 第36-37页 |
2、实验小结 | 第37-38页 |
第三部分 展望性研究:利用基因芯片技术高通量检测参与介导血管内皮细胞损伤的基因谱表达 | 第38-44页 |
1.实验结果 | 第38-43页 |
·、缺糖缺氧条件下相对于对照组上下调基因表达情况 | 第38-39页 |
·、缺氧低糖条件下基因表达变化从不同生物学特点进行功能分类 | 第39-41页 |
·、缺氧低糖条件下主要病理机制相关的Pathway | 第41-42页 |
·、缺氧低糖条件下主要病理机制相关Pathway中的候选靶点基因 | 第42-43页 |
2、实验小结 | 第43-44页 |
讨论 | 第44-47页 |
论文创新点 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
综述 | 第52-75页 |
作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第75页 |