中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第10-22页 |
1.1 猪细小病毒病及猪细小病毒 | 第10-12页 |
1.1.1 猪细小病毒病概述 | 第10页 |
1.1.2 猪细小病毒概述 | 第10-12页 |
1.2 PPV疫苗 | 第12-16页 |
1.2.1 传统疫苗 | 第12-14页 |
1.2.2 基因工程疫苗 | 第14-16页 |
1.3 疫苗佐剂 | 第16-20页 |
1.3.1 铝盐佐剂 | 第17页 |
1.3.2 弗氏佐剂 | 第17-18页 |
1.3.3 细胞因子 | 第18页 |
1.3.4 多糖佐剂 | 第18-20页 |
1.4 本试验研究的目的意义及主要内容 | 第20-22页 |
1.4.1 目的意义 | 第20页 |
1.4.2 主要内容 | 第20-22页 |
第2章 材料与方法 | 第22-38页 |
2.1 试验材料 | 第22-25页 |
2.1.1 细胞、病毒 | 第22页 |
2.1.2 疫苗 | 第22页 |
2.1.3 可降解生物材料 | 第22页 |
2.1.4 试验动物 | 第22页 |
2.1.5 主要生化与分子生物学试剂 | 第22-23页 |
2.1.6 主要仪器设备 | 第23-24页 |
2.1.7 常用溶液的配制 | 第24-25页 |
2.2 试验方法 | 第25-38页 |
2.2.1 猪细小病毒PPV-H株的增殖及灭活 | 第25-26页 |
2.2.2 猪细小病毒VP2蛋白制备 | 第26-28页 |
2.2.3 佐剂N-2-HACC的合成及理化特性分析 | 第28-29页 |
2.2.4 猪细小病毒N-2-HACC灭活疫苗的制备 | 第29页 |
2.2.5 猪细小病毒VP2蛋白N-2-HACC亚单位疫苗的制备 | 第29-30页 |
2.2.6 PPV-N-2-HACC及PPV/VP2-N-2-HACC疫苗成品检验 | 第30-31页 |
2.2.7 PPV-N-2-HACC及PPV/VP2-N-2-HACC生物安全性 | 第31页 |
2.2.8 疫苗贮藏稳定性 | 第31页 |
2.2.9 PPV-N-2-HACC及PPV/VP2-N-2-HACC免疫效果评价 | 第31-34页 |
2.2.10 荧光定量PCR方法的建立及病毒载量检测 | 第34-37页 |
2.2.11 统计学分析 | 第37-38页 |
第3章 结果与分析 | 第38-64页 |
3.1 猪细小病毒PPV-H株的增殖及灭活 | 第38-39页 |
3.1.1 PPV-H株的增殖 | 第38页 |
3.1.2血凝试验(HA)及TCID50 | 第38-39页 |
3.1.3 PPV-H株灭活及检验 | 第39页 |
3.2 猪细小病毒VP2蛋白制备 | 第39-40页 |
3.2.1 VP2蛋白的表达及Westernblot试验 | 第39页 |
3.2.2 血凝试验(HA) | 第39-40页 |
3.2.3 猪细小病毒VP2蛋白灭活及检验 | 第40页 |
3.3 N-2-HACC的合成及理化特性分析 | 第40-44页 |
3.3.1 N-2-HACC的合成 | 第40页 |
3.3.2 N-2-HACC细胞毒性 | 第40-41页 |
3.3.3 N-2-HACC一致性检测 | 第41-43页 |
3.3.4 N-2-HACC稳定性检测 | 第43-44页 |
3.3.5 N-2-HACC添加剂量的确定 | 第44页 |
3.4 PPV-N-2-HACC及PPV/VP2-N-2-HACC制备及检测 | 第44-46页 |
3.4.1 PPV-N-2-HACC及PPV/VP2-N-2-HACC的制备 | 第44-45页 |
3.4.2 PPV-N-2-HACC及PPV/VP2-N-2-HACC成品检验 | 第45页 |
3.4.3 PPV-N-2-HACC及PPV/VP2-N-2-HACC生物安全性 | 第45-46页 |
3.4.4 疫苗PPV-N-2-HACC及PPV/VP2-N-2-HACC贮藏稳定性 | 第46页 |
3.5 PPV-N-2-HACC及PPV/VP2-N-2-HACC免疫效果评价 | 第46-64页 |
3.5.1 免疫猪血清HI抗体检测 | 第46-47页 |
3.5.2 免疫猪血清PPV抗体转阳检测 | 第47-48页 |
3.5.3 免疫猪血清中细胞因子检测 | 第48-51页 |
3.5.4 CD4+、CD8+的检测 | 第51-53页 |
3.5.5 攻毒试验 | 第53-59页 |
3.5.6 实时荧光定量PCR方法建立及病毒载量检测 | 第59-64页 |
第4章 讨论 | 第64-68页 |
第5章 结论 | 第68-69页 |
第6章 本论文的主要创新点 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第81-82页 |
攻读硕士学位期间参与研究课题情况 | 第82-83页 |