摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 绪论 | 第14-26页 |
1 研究的目的和意义 | 第14-15页 |
2 石杉碱甲的分离检测方法及主体植物源的研究进展 | 第15-19页 |
·HupA的分离、检测方法学研究 | 第15页 |
·HupA的提取、分离研究 | 第15-16页 |
·HupA的检测方法研究 | 第16-19页 |
·紫外扫描法 | 第16-17页 |
·高效液相色谱法 | 第17-19页 |
3 HupA主体植物源的研究进展 | 第19-21页 |
·蛇足石杉的研究 | 第19-20页 |
·皱边石杉的研究 | 第20页 |
·其他石杉科植物的研究 | 第20-21页 |
·雷山石杉的研究 | 第20-21页 |
·东北石杉的研究 | 第21页 |
·小杉兰的研究 | 第21页 |
·马尾杉属植物的研究 | 第21页 |
4 HupA的微生物新来源 | 第21-22页 |
5 ISSR分子标记及其应用 | 第22-26页 |
·ISSR分子标记在遗传作图及基因定位上的应用 | 第23页 |
·ISSR分子标记用于构建动、植物基因组DNA指纹图谱 | 第23页 |
·ISSR分子标记用于分子辅助育种 | 第23-24页 |
·ISSR分子标记用于种质资源遗传多样分析 | 第24-26页 |
研究内容与技术路线 | 第26-28页 |
研究的主要内容 | 第26-27页 |
技术路线 | 第27-28页 |
第二章 皱边石杉内生真菌DNA提取有效方法的比较 | 第28-35页 |
1 材料与方法 | 第28-30页 |
·材料 | 第28页 |
·改良CTAB法提取菌丝体DNA | 第28-29页 |
·氯化苄法提取菌丝体DNA | 第29页 |
·RNase A的消化及DNA纯化 | 第29-30页 |
·DNA质量电泳检测分析 | 第30页 |
2 结果与分析 | 第30-33页 |
·改良CTAB法、氯化苄法对皱边石杉内生真菌DNA提取效果比较 | 第30-31页 |
·反复冻融对皱边石杉内生真菌DNA稳定性的影响 | 第31-32页 |
·皱边石杉内生真菌DNA提取后RNase A消化提纯比较 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33-35页 |
第三章 皱边石杉及其内生真菌ISSR分子标记体系的建立 | 第35-64页 |
1 材料与方法 | 第35-40页 |
·实验材料 | 第35-37页 |
·主要仪器与试剂 | 第37页 |
·主要仪器 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·方法 | 第37-40页 |
·引物筛选和最适退火温度的确定 | 第37-38页 |
·PCR反应体系的优化 | 第38-39页 |
·PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳检测 | 第39页 |
·数据分析 | 第39-40页 |
2 结果与分析 | 第40-60页 |
·ISSR引物筛选 | 第40-41页 |
·ISSR引物最适退火温度 | 第41-44页 |
·ISSR-PCR反应单因素优化结果 | 第44-46页 |
·最佳DNA模板浓度 | 第44页 |
·最佳Mg~(2+)浓度 | 第44-45页 |
·最佳Taq酶用量 | 第45页 |
·最佳dNTPs浓度 | 第45-46页 |
·ISSR-PCR正交试验优化结果及最优反应体系的建立 | 第46-47页 |
·皱边石杉内生真菌亲缘关系ISSR分析 | 第47-60页 |
·皱边石杉内生真菌ISSR-PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测分析 | 第47-52页 |
·皱边石杉内生真菌ISSR-PCR产物多态性聚类分析 | 第52-57页 |
·皱边石杉与其内生真菌ISSR-PCR产物的对比分析 | 第57-60页 |
3 讨论 | 第60-64页 |
·ISSR引物的筛选与退火温度的确定 | 第60-61页 |
·皱边石杉内生真菌ISSR-PCR反应体系各因素的优化选择 | 第61-62页 |
·ISSR分子标记技术在皱边石杉内生真菌亲缘关系分析中的优越性 | 第62页 |
·皱边石杉内生真菌与皱边石杉植物的关系 | 第62-64页 |
全文结论 | 第64-66页 |
研究展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
个人简介 | 第73-74页 |
附录 | 第74-85页 |