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皱边石杉内生真菌ISSR分子标记研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
英文缩略表第13-14页
第一章 绪论第14-26页
 1 研究的目的和意义第14-15页
 2 石杉碱甲的分离检测方法及主体植物源的研究进展第15-19页
   ·HupA的分离、检测方法学研究第15页
   ·HupA的提取、分离研究第15-16页
   ·HupA的检测方法研究第16-19页
     ·紫外扫描法第16-17页
     ·高效液相色谱法第17-19页
 3 HupA主体植物源的研究进展第19-21页
   ·蛇足石杉的研究第19-20页
   ·皱边石杉的研究第20页
   ·其他石杉科植物的研究第20-21页
     ·雷山石杉的研究第20-21页
     ·东北石杉的研究第21页
     ·小杉兰的研究第21页
     ·马尾杉属植物的研究第21页
 4 HupA的微生物新来源第21-22页
 5 ISSR分子标记及其应用第22-26页
   ·ISSR分子标记在遗传作图及基因定位上的应用第23页
   ·ISSR分子标记用于构建动、植物基因组DNA指纹图谱第23页
   ·ISSR分子标记用于分子辅助育种第23-24页
   ·ISSR分子标记用于种质资源遗传多样分析第24-26页
研究内容与技术路线第26-28页
 研究的主要内容第26-27页
 技术路线第27-28页
第二章 皱边石杉内生真菌DNA提取有效方法的比较第28-35页
 1 材料与方法第28-30页
   ·材料第28页
   ·改良CTAB法提取菌丝体DNA第28-29页
   ·氯化苄法提取菌丝体DNA第29页
   ·RNase A的消化及DNA纯化第29-30页
   ·DNA质量电泳检测分析第30页
 2 结果与分析第30-33页
   ·改良CTAB法、氯化苄法对皱边石杉内生真菌DNA提取效果比较第30-31页
   ·反复冻融对皱边石杉内生真菌DNA稳定性的影响第31-32页
   ·皱边石杉内生真菌DNA提取后RNase A消化提纯比较第32-33页
 3 讨论第33-35页
第三章 皱边石杉及其内生真菌ISSR分子标记体系的建立第35-64页
 1 材料与方法第35-40页
   ·实验材料第35-37页
   ·主要仪器与试剂第37页
     ·主要仪器第37页
     ·主要试剂第37页
   ·方法第37-40页
     ·引物筛选和最适退火温度的确定第37-38页
     ·PCR反应体系的优化第38-39页
     ·PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳检测第39页
     ·数据分析第39-40页
 2 结果与分析第40-60页
   ·ISSR引物筛选第40-41页
   ·ISSR引物最适退火温度第41-44页
   ·ISSR-PCR反应单因素优化结果第44-46页
     ·最佳DNA模板浓度第44页
     ·最佳Mg~(2+)浓度第44-45页
     ·最佳Taq酶用量第45页
     ·最佳dNTPs浓度第45-46页
   ·ISSR-PCR正交试验优化结果及最优反应体系的建立第46-47页
   ·皱边石杉内生真菌亲缘关系ISSR分析第47-60页
     ·皱边石杉内生真菌ISSR-PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测分析第47-52页
     ·皱边石杉内生真菌ISSR-PCR产物多态性聚类分析第52-57页
     ·皱边石杉与其内生真菌ISSR-PCR产物的对比分析第57-60页
 3 讨论第60-64页
   ·ISSR引物的筛选与退火温度的确定第60-61页
   ·皱边石杉内生真菌ISSR-PCR反应体系各因素的优化选择第61-62页
   ·ISSR分子标记技术在皱边石杉内生真菌亲缘关系分析中的优越性第62页
   ·皱边石杉内生真菌与皱边石杉植物的关系第62-64页
全文结论第64-66页
研究展望第66-67页
参考文献第67-72页
致谢第72-73页
个人简介第73-74页
附录第74-85页

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