摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 引言 | 第13-21页 |
1.1 文献综述 | 第13-19页 |
1.1.1 卵形鲳鲹简介及国内外研究 | 第13-14页 |
1.1.2 转录组在鱼类中的研究现状 | 第14-15页 |
1.1.3 盐度胁迫对鱼类的影响 | 第15-19页 |
1.1.3.1 盐度胁迫对鱼类生长发育的影响 | 第15-16页 |
1.1.3.2 盐度胁迫对鱼类消化酶的影响 | 第16页 |
1.1.3.3 盐度胁迫对鱼类免疫的影响 | 第16-17页 |
1.1.3.4 盐度胁迫对鱼类渗透调节的影响 | 第17-19页 |
1.2 本研究的目的和意义及技术路线 | 第19-21页 |
1.2.1 本研究的目的及其意义 | 第19-20页 |
1.2.2 本研究的技术路线 | 第20-21页 |
第二章 卵形鲳鲹慢性盐度胁迫下转录组结果和分析 | 第21-47页 |
2.1 实验材料 | 第21-24页 |
2.1.0 实验动物 | 第21页 |
2.1.1 实验设计 | 第21-22页 |
2.1.2 实验仪器 | 第22-23页 |
2.1.3 实验试剂与配制 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-30页 |
2.2.1 卵形鲳鲹鳃组织总RNA提取 | 第24-25页 |
2.2.2 转录组测序 | 第25-26页 |
2.2.2.1 送测RNA样品检测 | 第25页 |
2.2.2.2 文库构建和测序 | 第25-26页 |
2.2.3 数据分析 | 第26-28页 |
2.2.3.1 基因表达注释 | 第27页 |
2.2.3.2 差异表达基因鉴定 | 第27-28页 |
2.2.4 差异基因荧光定量PCR验证 | 第28-30页 |
2.2.4.1 cDNA模板合成 | 第28页 |
2.2.4.2 引物设计和荧光定量PCR验证 | 第28-30页 |
2.3 实验结果 | 第30-45页 |
2.3.1 总RNA提取质量检测 | 第30-31页 |
2.3.2 转录组测序结果 | 第31-43页 |
2.3.2.1 原始数据质量和组装 | 第31-33页 |
2.3.2.2 基因功能注释 | 第33-36页 |
2.3.2.3 差异表达基因的鉴定 | 第36-43页 |
2.3.3 荧光定量PCR验证结果 | 第43-45页 |
2.4 讨论 | 第45-47页 |
第三章 急性盐度胁迫下对卵形鲳鲹渗透生理的影响 | 第47-54页 |
3.1 实验材料 | 第47-48页 |
3.1.1 实验动物 | 第47页 |
3.1.2 实验设计 | 第47页 |
3.1.3 样品采集 | 第47-48页 |
3.2 实验方法 | 第48-49页 |
3.2.1 血清渗透压的测定 | 第48页 |
3.2.2 血清离子浓度和激素测定 | 第48页 |
3.2.3 鳃组织NKA酶活性测定 | 第48页 |
3.2.4 数据分析 | 第48-49页 |
3.3 实验结果 | 第49-52页 |
3.3.1 急性盐度胁迫对卵形鲳鲹行为和存活率的影响 | 第49页 |
3.3.2 急性盐度胁迫对血清渗透压和离子浓度的影响 | 第49-50页 |
3.3.3 急性盐度胁迫对卵形鲳鲹血清激素的影响 | 第50-51页 |
3.3.4 急性盐度胁迫对卵形鲳鲹鳃组织NKA酶活性的影响 | 第51-52页 |
3.4 讨论 | 第52-54页 |
第四章 急性盐度胁迫下对卵形鲳鲹渗透调节基因的影响 | 第54-91页 |
4.1 实验材料 | 第54页 |
4.1.1 实验动物 | 第54页 |
4.1.2 实验设计 | 第54页 |
4.2 实验方法 | 第54-57页 |
4.2.0 总RNA提取 | 第54-55页 |
4.2.1 cDNA模板合成 | 第55页 |
4.2.2 基因获取与验证 | 第55-56页 |
4.2.3 NKAα1、NKCC1a和AQP1a基因生物信息学分析 | 第56-57页 |
4.2.4 荧光定量PCR | 第57页 |
4.3 实验结果 | 第57-86页 |
4.3.1 基因序列特征分析 | 第57-75页 |
4.3.1.1 NKAα1基因序列特征分析 | 第57-64页 |
4.3.1.2 NKCC1a基因序列特征分析 | 第64-72页 |
4.3.1.3 AQP1a基因序列特征分析 | 第72-75页 |
4.3.2 系统发育分析 | 第75-79页 |
4.3.2.1 NKAα1系统发育分析 | 第75-76页 |
4.3.2.2 NKCC1a系统发育分析 | 第76-78页 |
4.3.2.3 AQP1a系统发育分析 | 第78-79页 |
4.3.3 急性盐度胁迫下三种渗透调节基因表达分析 | 第79-86页 |
4.3.3.1 急性盐度胁迫下NKAα1基因表达分析 | 第79-81页 |
4.3.3.2 急性盐度胁迫下NKCC1a基因表达分析 | 第81-83页 |
4.3.3.3 急性盐度胁迫下AQP1a基因表达分析 | 第83-86页 |
4.4 讨论 | 第86-91页 |
4.4.1 NKAα1在卵形鲳鲹渗透调节中的作用 | 第86-87页 |
4.4.2 NKCC1a在卵形鲳鲹渗透调节中的作用 | 第87-89页 |
4.4.3 AQP1a在卵形鲳鲹渗透调节中的作用 | 第89-91页 |
结论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-104页 |
附录Ⅰ | 第104-105页 |
致谢 | 第105页 |