摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 棉花黄萎病简介 | 第10-11页 |
1.2 乙烯研究概况 | 第11-17页 |
1.2.1 植物乙烯合成及信号传导路径 | 第11-13页 |
1.2.2 微生物中乙烯合成途径 | 第13-14页 |
1.2.3 乙烯与植物生长发育 | 第14-15页 |
1.2.4 乙烯与抗病 | 第15-17页 |
1.3 本课题研究的目的和意义 | 第17-19页 |
2 材料方法 | 第19-28页 |
2.1 试验材料 | 第19页 |
2.1.1 植物材料 | 第19页 |
2.1.2 主要菌株和载体 | 第19页 |
2.1.3 主要酶类和试剂 | 第19页 |
2.2 试验方法 | 第19-28页 |
2.2.1 病原菌的活化和培养 | 第19-20页 |
2.2.2 棉花幼苗的培育 | 第20页 |
2.2.3 棉花幼苗的VIGS处理 | 第20-21页 |
2.2.4 乙烯利的喷施处理 | 第21页 |
2.2.5 棉花黄萎病菌的接种 | 第21-22页 |
2.2.6 棉花幼苗接菌后病指及落叶率统计 | 第22页 |
2.2.7 接菌棉株茎段的恢复培养 | 第22-23页 |
2.2.8 组织化学观察 | 第23页 |
2.2.9 乙烯产生量的测定 | 第23页 |
2.2.10 棉花RNA的提取 | 第23页 |
2.2.11 反转录合成cDNA | 第23-24页 |
2.2.12 RT-PCR和qRT-PCR分析 | 第24页 |
2.2.13 VIGS载体构建 | 第24-26页 |
2.2.14 转基因表达载体构建和棉花遗传转化 | 第26页 |
2.2.15 转基因植株阳性鉴定 | 第26页 |
2.2.16 转基因植株表达量鉴定 | 第26-27页 |
2.2.17 转基因植株拷贝数鉴定 | 第27-28页 |
3 结果与分析 | 第28-42页 |
3.1 不同类型黄萎病菌接种棉株后的抗性鉴定及乙烯产生量的测定 | 第28-30页 |
3.2 外施乙烯利削弱棉花对黄萎病的抗性 | 第30页 |
3.3 接种‘V991’后乙烯的产生来源于棉株 | 第30-32页 |
3.4 GhEIN2s的序列来源 | 第32-33页 |
3.5 抑制GhEIN2s表达提高了棉花对黄萎病的抗性 | 第33-34页 |
3.6 超量表达AtCTR1转基因棉花材料的获得 | 第34-35页 |
3.7 超量表达AtCTR1降低了棉株对乙烯的敏感度 | 第35-38页 |
3.8 超量表达AtCTR1增强了棉株对黄萎病的抗性 | 第38-39页 |
3.9 超量表达AtCTR1减慢了棉株离层的形成 | 第39-40页 |
3.10 超量表达AtCTR1对棉花其他性状的影响 | 第40-42页 |
4 讨论与展望 | 第42-46页 |
4.1 乙烯是棉花黄萎病发生和落叶的重要因素 | 第42-43页 |
4.2 削弱乙烯信号路径增强了棉花对黄萎病的抗性 | 第43-44页 |
4.3 在生产上抑制乙烯的合成或信号传导抗棉花黄萎病的展望 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-55页 |
附录 | 第55-62页 |
附录1. 试验中用到的引物序列 | 第55-56页 |
附录2. GhEINs和GhACOsVIGS的目标区段和序列信息 | 第56-62页 |
致谢 | 第62页 |