摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
英文缩略词表 | 第10-11页 |
1 引言 | 第11-13页 |
2 材料、试剂与仪器设备 | 第13-19页 |
2.1 材料与试剂 | 第13页 |
2.2 抗体 | 第13-14页 |
2.3 主要仪器设备 | 第14-15页 |
2.4 主要试剂配置 | 第15-19页 |
3 实验方法 | 第19-27页 |
3.1 细胞培养 | 第19页 |
3.2 蛋白提取及蛋白浓度测定 | 第19-20页 |
3.2.1 蛋白的提取 | 第19页 |
3.2.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第19-20页 |
3.3 免疫印迹 | 第20-21页 |
3.3.1 蛋白样品的处理 | 第20页 |
3.3.2 SDS-PAGE凝胶的配制 | 第20页 |
3.3.3 SDS-PAGE电泳及转印 | 第20-21页 |
3.4 EdU细胞增殖实验 | 第21页 |
3.5 MTS实验 | 第21-22页 |
3.6 TUNEL细胞凋亡实验 | 第22页 |
3.7 活性氧检测 | 第22页 |
3.8 抗氧化酶检测 | 第22页 |
3.9 动物实验 | 第22-24页 |
3.9.1 实验动物 | 第22-23页 |
3.9.2 动物建模 | 第23页 |
3.9.3 膈肌肌条的制备与测定 | 第23页 |
3.9.4 膈肌力学指标 | 第23-24页 |
3.10 总RNA的提取与反转录 | 第24-25页 |
3.10.1 总RNA的提取 | 第24-25页 |
3.10.2 反转录 | 第25页 |
3.11 引物设计 | 第25-26页 |
3.12 统计学分析 | 第26-27页 |
4 实验结果 | 第27-39页 |
4.1 LPS刺激L6细胞后,内源性H_2S合成酶蛋白表达降低,H_2S浓度降低 | 第27-28页 |
4.2 H_2S能够提高LPS诱导后L6细胞的活力及细胞增殖能力 | 第28-29页 |
4.3 H_2S能够降低LPS诱导的L6细胞的凋亡水平 | 第29页 |
4.4 H_2S能够降低LPS诱导的L6细胞凋亡蛋白的表达水平 | 第29-30页 |
4.5 H_2S能够降低LPS诱导的L6细胞中活性氧的产生并提高抗氧化酶的活力 | 第30-31页 |
4.6 H_2S能够降低LPS诱导的L6细胞中MAPK信号通路相关蛋白的磷酸化水平 | 第31-32页 |
4.7 H_2S能够降低LPS诱导的L6细胞炎性因子的表达 | 第32-33页 |
4.8 H_2S能够降低LPS诱导的L6细胞中NF-κB信号通路相关蛋白的表达水平.. | 第33-34页 |
4.9 H_2S能够提高脓毒症大鼠的膈肌张力 | 第34-35页 |
4.10 H_2S能够降低脓毒症大鼠膈肌中肌纤维CSA的减少 | 第35-36页 |
4.11 H_2S能够减轻脓毒症大鼠的膈肌炎症并抑制其凋亡 | 第36-39页 |
5 讨论 | 第39-43页 |
结论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
综述 | 第49-64页 |
参考文献 | 第59-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
在读期间参加的学术会议及研究成果 | 第65-66页 |