| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 引言 | 第13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 植物成花调控机理的研究 | 第13-16页 |
| 1.1.1 光周期途径 | 第13-14页 |
| 1.1.2 春化途径 | 第14-15页 |
| 1.1.3 自主途径 | 第15页 |
| 1.1.4 赤霉素途径 | 第15-16页 |
| 1.2 植物SOC1基因及其同源基因研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.1 植物SOC1基因研究发展过程 | 第16页 |
| 1.2.2 植物SOC1基因的结构 | 第16-17页 |
| 1.2.3 植物SOC1基因的功能 | 第17-18页 |
| 1.2.3.1 植物SOC1基因的在植株中的表达位置 | 第17页 |
| 1.2.3.2 植物SOC1同源基因的表达 | 第17-18页 |
| 1.2.4 影响SOC1基因表达的因素 | 第18-20页 |
| 1.2.4.1 SOC1整合光周期途径CO与FT的调控信号 | 第18页 |
| 1.2.4.2 SOC1整合春化途径、自主途径FLC与SVP的调控信号 | 第18-19页 |
| 1.2.4.3 SOC1整合赤霉素途径的调控信号 | 第19页 |
| 1.2.4.4 SOC1基因的其他功能作用 | 第19-20页 |
| 1.3 竹子成花机理研究现状 | 第20-22页 |
| 1.4 单核苷酸多态性对基因功能的影响 | 第22页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 绿竹BoSOC1的生物信息学和表达模式分析 | 第24-37页 |
| 2.1 BoSOC1基因的生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.1.1 BoSOC1蛋白序列比对与结构域分析通过在线分析软件 | 第24页 |
| 2.1.2 BoSOC1蛋白结构预测与分析 | 第24页 |
| 2.1.3 绿竹SOC1同源基因系统进化分析 | 第24页 |
| 2.1.4 绿竹SOC1蛋白亚细胞定位分析 | 第24页 |
| 2.2 材料与方法 | 第24-25页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.2.2 试剂 | 第25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第25页 |
| 2.3.2 RNA质量检测 | 第25页 |
| 2.3.3 RNA的反转录 | 第25-26页 |
| 2.3.4 荧光定量PCR | 第26-27页 |
| 2.4 结果与分析 | 第27-35页 |
| 2.4.1 BoSOC1基因的生物信息学分析 | 第27-33页 |
| 2.4.1.1 绿竹SOC1基因的蛋白序列比对 | 第28页 |
| 2.4.1.2 绿竹SOC1蛋白二、三级结构预测与分析 | 第28-30页 |
| 2.4.1.3 绿竹SOC1同源基因序列比对 | 第30-32页 |
| 2.4.1.4 绿竹SOC1同源基因分子系统发生分析 | 第32-33页 |
| 2.4.1.5 绿竹SOC1蛋白质亚细胞定位分析 | 第33页 |
| 2.4.2 绿竹总RNA的提取 | 第33-34页 |
| 2.4.3 目的基因RT-PCR检测 | 第34页 |
| 2.4.4 BoSOC1的表达模式分析 | 第34-35页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 绿竹BoSOC1在拟南芥中的功能验证 | 第37-53页 |
| 3.1 材料与方法 | 第37-40页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.1.2 试剂 | 第37-40页 |
| 3.1.3 质粒和菌种 | 第40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-46页 |
| 3.2.1 大肠杆菌转化 | 第40-41页 |
| 3.2.1.1 大肠杆菌热激感受态的制备 | 第40页 |
| 3.2.1.2 转化感受态细胞 | 第40-41页 |
| 3.2.2 质粒的提取 | 第41页 |
| 3.2.3 农杆菌转化 | 第41-43页 |
| 3.2.3.1 农杆菌GV3101、EHA105热激转化感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
| 3.2.3.2 农杆菌菌种GV3101、EHA105的电击转化 | 第42-43页 |
| 3.2.4 拟南芥的遗传转化 | 第43-45页 |
| 3.2.4.1 拟南芥的种植 | 第43页 |
| 3.2.4.2 拟南芥的遗传转化 | 第43-44页 |
| 3.2.4.3 转基因拟南芥种子的筛选 | 第44页 |
| 3.2.4.4 转基因拟南芥DNA提取及鉴定 | 第44-45页 |
| 3.2.5 转基因拟南芥中开花相关基因的表达量分析 | 第45-46页 |
| 3.2.5.1 总RNA的提取 | 第45页 |
| 3.2.5.2 RNA质量检测 | 第45页 |
| 3.2.5.3 RNA的反转录 | 第45页 |
| 3.2.5.4 荧光定量PCR | 第45-46页 |
| 3.3 结果与分析 | 第46-51页 |
| 3.3.1 转基因拟南芥的遗传转化 | 第46页 |
| 3.3.2 转基因拟南芥的阳性植株鉴定 | 第46-47页 |
| 3.3.3 转基因拟南芥的表型分析 | 第47-49页 |
| 3.3.4 转基因拟南芥中开花相关基因的RT-qPCR分析 | 第49-51页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 绿竹BoSOC1在水稻中的功能验证 | 第53-61页 |
| 4.1 材料与方法 | 第53页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第53页 |
| 4.1.2 试剂 | 第53页 |
| 4.1.3 质粒和菌种 | 第53页 |
| 4.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 4.2.1 水稻遗传转化及其转基因植株的筛选 | 第53-55页 |
| 4.2.1.1 诱导产生水稻愈伤组织 | 第53页 |
| 4.2.1.2 农杆菌介导转化 | 第53-54页 |
| 4.2.1.3 脱菌及筛选 | 第54页 |
| 4.2.1.4 分化生根 | 第54页 |
| 4.2.1.5 转基因水稻DNA提取及鉴定 | 第54页 |
| 4.2.1.6 GUS染色鉴定实验 | 第54-55页 |
| 4.2.2 转基因水稻中开花相关基因的表达量分析 | 第55页 |
| 4.2.2.1 总RNA的提取 | 第55页 |
| 4.2.2.2 RNA质量检测 | 第55页 |
| 4.2.2.3 RNA的反转录 | 第55页 |
| 4.2.2.4 荧光定量PCR | 第55页 |
| 4.3 结果与分析 | 第55-59页 |
| 4.3.1 水稻的遗传转化 | 第55-56页 |
| 4.3.2 转基因水稻的阳性植株鉴定 | 第56-57页 |
| 4.3.3 转基因水稻的表型分析 | 第57-58页 |
| 4.3.4 35S::BoSOC1转基因水稻中开花相关基因的RT-qPCR分析 | 第58-59页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 BoSOC1启动子的克隆与分析 | 第61-77页 |
| 5.1 材料与方法 | 第61页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第61页 |
| 5.1.2 试剂和菌种 | 第61页 |
| 5.1.3 菌种和质粒 | 第61页 |
| 5.2 实验方法 | 第61-69页 |
| 5.2.1 BoSOC1的启动子克隆 | 第61-63页 |
| 5.2.1.1 BoSOC1启动子全长克隆 | 第61-62页 |
| 5.2.1.2 目的条带序列确定 | 第62-63页 |
| 5.2.2 BoSOC1启动子生物信息学分析 | 第63页 |
| 5.2.3 BoSOC1启动子分段的扩增构建表达载体 | 第63-66页 |
| 5.2.3.1 线性化质粒的制备 | 第63页 |
| 5.2.3.2 BoSOC1启动子5’-端缺失PCR扩增 | 第63-64页 |
| 5.2.3.3 目标DNA与载体的重组 | 第64页 |
| 5.2.3.4 转化农杆菌 | 第64页 |
| 5.2.3.5 种子处理 | 第64页 |
| 5.2.3.6 种子发芽 | 第64-65页 |
| 5.2.3.7 农杆菌瞬时侵染 | 第65-66页 |
| 5.2.4 GUS组织化学染色 | 第66-67页 |
| 5.2.5 荧光法测定GUS酶活性 | 第67-69页 |
| 5.2.5.1 GUS酶的提取 | 第67-68页 |
| 5.2.5.2 测定GUS酶蛋白含量 | 第68页 |
| 5.2.5.3 GUS荧光定量检测 | 第68-69页 |
| 5.2.5.4 GUS酶活力的计算 | 第69页 |
| 5.3 结果与分析 | 第69-75页 |
| 5.3.1 BoSOC1启动子克隆 | 第69页 |
| 5.3.2 BoSOC1启动子的生物信息学分析 | 第69-71页 |
| 5.3.3 BoSOC1启动子5’-端缺失启动子片段 | 第71页 |
| 5.3.4 BoSOC1启动子植物表达载体的构建 | 第71-72页 |
| 5.3.5 不同长度调控的启动子活性分析 | 第72-73页 |
| 5.3.6 不同长度启动子在拟南芥中的瞬时表达 | 第73-74页 |
| 5.3.7 不同长度启动子在拟南芥中的活性 | 第74-75页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第75-77页 |
| 第六章 结论与展望 | 第77-79页 |
| 6.1 结论与讨论 | 第77-78页 |
| 6.2 研究展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-89页 |
| 附表1 缩略词及中英文全称 | 第89-90页 |
| 附表2 本研究论文所用的引物信息 | 第90-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
