| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 水稻主真菌病害 | 第12-15页 |
| 1.1.1 水稻恶苗病简介 | 第12-13页 |
| 1.1.1.1 水稻恶苗的发生和危害 | 第12页 |
| 1.1.1.2 水稻恶苗病的病原和病害循环 | 第12-13页 |
| 1.1.2 稻瘟病简介 | 第13页 |
| 1.1.2.1 稻瘟病发生和危害 | 第13页 |
| 1.1.2.2 稻瘟病病原和病害循环 | 第13页 |
| 1.1.3 稻曲病简介 | 第13-15页 |
| 1.1.3.1 稻曲病发生和危害 | 第13-14页 |
| 1.1.3.2 稻曲病病原和病害循环 | 第14-15页 |
| 1.2 水稻恶苗病的化学防治 | 第15-18页 |
| 1.2.1 水稻恶苗病防治现状 | 第15页 |
| 1.2.2 藤仓镰孢菌对多菌灵的抗性 | 第15-16页 |
| 1.2.3 藤仓镰孢菌对咪鲜胺的抗性 | 第16-17页 |
| 1.2.4 藤仓镰孢菌对氰烯菌酯的抗性 | 第17-18页 |
| 1.3 植物病原真菌检测技术 | 第18-19页 |
| 1.4 本论文的研究内容与意义 | 第19-20页 |
| 2 苗病菌的分离及对杀菌剂敏感性的测定 | 第20-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 供试药剂 | 第20页 |
| 2.1.2 供试培养基 | 第20页 |
| 2.1.3 试剂及仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-22页 |
| 2.2.1 菌株的分离培养 | 第21页 |
| 2.2.2 分离菌株的鉴定 | 第21页 |
| 2.2.3 藤仓镰孢对多菌灵敏感性测定 | 第21-22页 |
| 2.2.4 藤仓镰孢对咪鲜胺敏感性测定 | 第22页 |
| 2.2.5 藤仓镰孢对氰烯菌酯敏感性测定 | 第22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-27页 |
| 2.3.1 菌株的分离和鉴定结果 | 第22-24页 |
| 2.3.2 藤仓镰孢菌对多菌灵敏感性分布 | 第24-25页 |
| 2.3.3 藤仓镰孢对咪鲜胺敏感性分布 | 第25-26页 |
| 2.3.4 藤仓镰孢对氰烯菌酯敏感性分布 | 第26-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-29页 |
| 3 藤仓镰孢菌对多菌灵、咪鲜胺和氰烯菌酯的抗性机制 | 第29-37页 |
| 3.1 实验材料 | 第29-31页 |
| 3.1.1 供试菌株 | 第29-30页 |
| 3.1.2 试剂与仪器 | 第30-31页 |
| 3.1.3 供试培养基 | 第31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-32页 |
| 3.2.1 引物设计合成 | 第31页 |
| 3.2.2 咪鲜胺处理下的藤仓镰孢菌丝体制备 | 第31-32页 |
| 3.2.3 藤仓镰孢菌的DNA、RNA的提取和CDNA的合成 | 第32页 |
| 3.2.4 PCR扩增、产物克隆及测序 | 第32页 |
| 3.3 结果与分析 | 第32-35页 |
| 3.3.1 藤仓镰孢Β2-微管蛋白基因序列分析 | 第32-33页 |
| 3.3.2 藤仓镰孢菌肌球蛋白-1基因序列分析 | 第33页 |
| 3.3.3 藤仓镰孢菌CYP51A基因序列分析 | 第33-34页 |
| 3.3.4 藤仓镰孢菌CYP51B基因序列分析 | 第34页 |
| 3.3.5 藤仓镰孢菌CYP51A基因启动子区域序列分析 | 第34页 |
| 3.3.6 咪鲜胺处理下藤仓镰孢菌CYP51A基因表达水平分析 | 第34-35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-37页 |
| 4 水稻恶苗病环介导等温扩增检测体系 | 第37-53页 |
| 4.1 实验材料 | 第37-39页 |
| 4.1.1 供试菌株与稻种 | 第37-38页 |
| 4.1.2 供试培养基 | 第38-39页 |
| 4.1.3 供试试剂与仪器 | 第39页 |
| 4.2 实验方法 | 第39-42页 |
| 4.2.1 带菌种子的制备与恶苗病菌的接种 | 第39页 |
| 4.2.2 种子和幼苗上藤仓镰孢菌的分离 | 第39-40页 |
| 4.2.3 基因组DNA提取 | 第40页 |
| 4.2.4 引物设计和筛选 | 第40页 |
| 4.2.5 LAMP反应体系优化与建立 | 第40-42页 |
| 4.2.6 LAMP检测体系特异性和敏感性验证 | 第42页 |
| 4.2.7 LAMP法检测带菌种子和感病幼苗 | 第42页 |
| 4.2.8 LAMP法检测田间感病植株 | 第42页 |
| 4.3 实验结果 | 第42-51页 |
| 4.3.1 LAMP反应体系优化与确立 | 第42-47页 |
| 4.3.2 LAMP检测体系特异性和敏感性验证结果 | 第47-49页 |
| 4.3.3 种子带菌率LAMP检测结果 | 第49页 |
| 4.3.4 感病幼苗LAMP检测结果 | 第49-50页 |
| 4.3.5 田间感病植株LAMP检测结果 | 第50-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51-53页 |
| 5 稻曲病菌实时定量环介导等温扩增检测体系 | 第53-62页 |
| 5.1 实验材料 | 第53页 |
| 5.1.1 供试菌株与培养基 | 第53页 |
| 5.1.2 供试试剂与仪器 | 第53页 |
| 5.2 实验方法 | 第53-56页 |
| 5.2.1 稻曲病菌孢子基因组DNA提取 | 第53-54页 |
| 5.2.2 引物设计和筛选 | 第54页 |
| 5.2.3 Q-LAM最佳反应温度筛选 | 第54-55页 |
| 5.2.4 Q-LAMP和Q-PCR检测体系特异性验证 | 第55页 |
| 5.2.5 Q-LAMP和Q-PCR检测体系灵敏度验证 | 第55页 |
| 5.2.6 建立Q-LAMP和Q-PCR检测体系的标准曲线 | 第55页 |
| 5.2.7 Q-LAMP和Q-PCR检测添加的孢子样品 | 第55页 |
| 5.2.8 Q-LAMP和Q-PCR检测田间孢子的样品 | 第55-56页 |
| 5.3 结果 | 第56-60页 |
| 5.3.1 最佳反应温度筛选结果 | 第56页 |
| 5.3.2 检测体系的特异性验证结果 | 第56-57页 |
| 5.3.3 检测体系的灵敏度验证结果 | 第57-58页 |
| 5.3.4 Q-LAMP检测稻曲病菌孢子的标准曲线 | 第58-59页 |
| 5.3.5 添加孢子样品Q-LAMP检测结果 | 第59-60页 |
| 5.3.6 田间孢子的样品定量检测检测结果 | 第60页 |
| 5.4 讨论 | 第60-62页 |
| 6 稻瘟病菌实时定量环介导等温扩增检测体系 | 第62-69页 |
| 6.1 实验材料 | 第62页 |
| 6.1.1 供试菌株与培养基 | 第62页 |
| 6.1.2 供试试剂与仪器 | 第62页 |
| 6.2 实验方法 | 第62-64页 |
| 6.2.1 稻瘟病菌孢子基因组DNA提取 | 第62页 |
| 6.2.2 引物设计和筛选 | 第62-63页 |
| 6.2.3 Q-LAMP最佳反应温度筛选 | 第63页 |
| 6.2.4 Q-LAMP检测体系特异性验证 | 第63页 |
| 6.2.5 Q-LAM检测体系灵敏度验证 | 第63页 |
| 6.2.6 Q-LAMP检测体系标准曲线的建立 | 第63页 |
| 6.2.7 Q-LAMP检测植株中的稻瘟病病菌 | 第63-64页 |
| 6.3 实验结果 | 第64-68页 |
| 6.3.1 检测体系最佳反应温度筛选结果 | 第64页 |
| 6.3.2 检测体系特异性验证结果 | 第64-65页 |
| 6.3.3 检测体系灵敏度检测结果 | 第65页 |
| 6.3.4 Q-LAMP检测稻瘟病菌孢子的标准曲线 | 第65-66页 |
| 6.3.5 不同致病性的稻瘟病病菌检测结果 | 第66-68页 |
| 6.4 讨论 | 第68-69页 |
| 全文总结 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 附录 | 第79-94页 |
| 个人简介 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
