| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第1章 miR-1-3p对肝癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响 | 第15-36页 |
| 1.1 实验材料和仪器 | 第15-16页 |
| 1.1.1 实验细胞系 | 第15页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第15-16页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第16页 |
| 1.2 实验方法 | 第16-24页 |
| 1.2.1 细胞的复苏、传代以及冻存 | 第16-17页 |
| 1.2.2 qRT-PCR检测miRNA的mRNA表达水平 | 第17-19页 |
| 1.2.3 统计分析miR-1-3p表达和临床数据 | 第19页 |
| 1.2.4 CCK-8实验检测肝癌细胞的增殖能力 | 第19-21页 |
| 1.2.5 细胞集落形成实验检测肝癌细胞的集落形成能力 | 第21页 |
| 1.2.6 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第21-22页 |
| 1.2.7 Westernblot检测miR-1-3p对肝癌细胞中cleavedcaspase3蛋白表达水平的影响 | 第22-23页 |
| 1.2.8 划痕实验检测肝癌细胞的迁移能力 | 第23页 |
| 1.2.9 Transwell实验检测肝癌细胞的迁移和侵袭能力 | 第23-24页 |
| 1.2.10 统计分析 | 第24页 |
| 1.3 结果 | 第24-33页 |
| 1.3.1 五种miRNA在不同肝癌细胞中的表达 | 第24-25页 |
| 1.3.2 不同miRNA对肝癌细胞HepG2增殖能力的影响 | 第25页 |
| 1.3.3 不同肝细胞系的迁移能力 | 第25-26页 |
| 1.3.4 在肝癌患者中miR-1-3p表达降低并与患者的预后相关 | 第26-28页 |
| 1.3.5 过表达或沉默细胞中内源性miR-1-3p后HepG2和SMMC-7721细胞中miR-1-3p的表达 | 第28页 |
| 1.3.6 miR-1-3p对HepG2和SMMC-7721细胞增殖的影响 | 第28-30页 |
| 1.3.7 miR-1-3p对HepG2和SMMC-7721细胞集落形成能力的影响 | 第30页 |
| 1.3.8 miR-1-3p对HepG2和SMMC-7721细胞凋亡的影响 | 第30-32页 |
| 1.3.9 miR-1-3p对HepG2和SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力的影响 | 第32-33页 |
| 1.4 讨论 | 第33-35页 |
| 1.5 小结 | 第35-36页 |
| 第2章 miR-1-3p在肝细胞癌中的靶基因 | 第36-51页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第36-37页 |
| 2.1.1 实验细胞系和质粒 | 第36页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-43页 |
| 2.2.1 miR-1-3p靶基因的筛选 | 第37-38页 |
| 2.2.2 荧光报告载体的构建 | 第38-40页 |
| 2.2.3 双荧光报告载体实验验证CAAP1是miR-1-3p的直接靶基因 | 第40页 |
| 2.2.4 qRT-PCR检测miR-1-3p对肝癌细胞中CAAP1mRNA表达水平的影响 | 第40-41页 |
| 2.2.5 Westernblot检测miR-1-3p对肝癌细胞中CAAP1蛋白表达水平的影响 | 第41-43页 |
| 2.2.6 统计分析CAAP1表达和临床数据 | 第43页 |
| 2.3 结果 | 第43-48页 |
| 2.3.1 miR-1-3p靶基因的筛选 | 第43-44页 |
| 2.3.2 EGFP荧光报告载体的构建 | 第44页 |
| 2.3.3 EGFP荧光报告载体实验验证CAAP1是miR-1-3p的直接靶基因 | 第44-45页 |
| 2.3.4 miR-1-3p对肝癌细胞中CAAP1mRNA表达水平的影响 | 第45-46页 |
| 2.3.5 miR-1-3p对肝癌细胞中CAAP1蛋白表达水平的影响 | 第46-47页 |
| 2.3.6 CAAP1在肝癌组织中表达与miR-1-3p表达成负相关,并与患者的预后相关 | 第47-48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-50页 |
| 2.5 小结 | 第50-51页 |
| 第3章 CAAP1在肝癌细胞中的作用 | 第51-62页 |
| 3.1 实验材料和仪器 | 第51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 3.2.1 CAAP1过表达和敲降质粒的构建 | 第51-52页 |
| 3.2.2 qRT-PCR验证靶基因过表达和敲降质粒的有效性 | 第52页 |
| 3.2.3 CCK-8实验检测CAAP1对肝癌细胞增殖的影响 | 第52页 |
| 3.2.4 细胞集落形成实验检测CAAP1对细胞集落形成的影响 | 第52-53页 |
| 3.2.5 流式细胞术检测CAAP1对肝癌细胞凋亡情况的影响 | 第53页 |
| 3.2.6 Westernblot检测CAAP1对肝癌细胞中cleavedcaspase3蛋白表达水平的影响 | 第53页 |
| 3.2.7 划痕实验检测CAAP1对肝癌细胞迁移能力的影响 | 第53页 |
| 3.2.8 Transwell实验检测CAAP1对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响 | 第53页 |
| 3.2.9 统计分析 | 第53页 |
| 3.3 结果 | 第53-59页 |
| 3.3.1 CAAP1过表达和敲降质粒的构建 | 第53-54页 |
| 3.3.2 CAAP1过表达和敲降质粒有效性验证 | 第54-55页 |
| 3.3.3 CCK-8实验检测CAAP1对肝癌细胞增殖的影响 | 第55-56页 |
| 3.3.4 细胞集落形成实验检测CAAP1对细胞集落形成的影响 | 第56页 |
| 3.3.5 CAAP1对肝癌细胞凋亡情况的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.6 CAAP1对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响 | 第57-59页 |
| 3.4 讨论 | 第59-60页 |
| 3.5 小结 | 第60-62页 |
| 第4章 CAAP1对miR-1-3p行为的挽救作用 | 第62-68页 |
| 4.1 实验材料和仪器 | 第62页 |
| 4.2 实验方法 | 第62-63页 |
| 4.2.1 细胞转染和分组 | 第62页 |
| 4.2.2 CCK-8测定CAAP1对肝癌细胞增殖的影响 | 第62页 |
| 4.2.3 细胞集落形成实验检测CAAP1对细胞集落形成的影响 | 第62页 |
| 4.2.4 流式细胞术检测CAAP1对肝癌细胞凋亡情况的影响 | 第62页 |
| 4.2.5 划痕实验检测CAAP1对肝癌细胞迁移能力的影响 | 第62-63页 |
| 4.2.6 Transwell实验检测CAAP1对肝癌细胞迁移侵袭能力的影响 | 第63页 |
| 4.3 结果 | 第63-66页 |
| 4.3.1 过表达CAAP1能够挽救miR-1-3p诱导的肝癌细胞增殖变化 | 第63页 |
| 4.3.2 过表达CAAP1能够挽救miR-1-3p诱导的细胞集落形成变化 | 第63-64页 |
| 4.3.3 过表达CAAP1能够挽救miR-1-3p诱导的肝癌细胞凋亡 | 第64-65页 |
| 4.3.4 过表达CAAP1能够挽救miR-1-3p诱导的肝癌细胞迁移侵袭能力变化 | 第65-66页 |
| 4.4 讨论 | 第66-67页 |
| 4.5 小结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 第5章 综述 miR-1与肿瘤关系的研究进展 | 第72-87页 |
| 5.1 肝细胞癌的现状 | 第72页 |
| 5.2 miRNA的简介 | 第72-73页 |
| 5.3 miRNA与肿瘤的关系 | 第73-74页 |
| 5.4 miR-1与肿瘤的关系 | 第74-80页 |
| 5.4.1 miR-1与人结肠癌 | 第74-75页 |
| 5.4.2 miR-1与膀胱癌 | 第75页 |
| 5.4.3 miR-1与前列腺癌 | 第75-76页 |
| 5.4.4 miR-1与肺癌 | 第76-77页 |
| 5.4.5 miR-1与胃癌 | 第77页 |
| 5.4.6 miR-1与宫颈癌 | 第77页 |
| 5.4.7 miR-1与甲状腺癌 | 第77-78页 |
| 5.4.8 miR-1与肝细胞癌 | 第78-80页 |
| 5.5 小结 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 导师简介 | 第89-90页 |
| 作者简介 | 第90-91页 |
| 学位论文数据集 | 第91页 |
