摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 引言 | 第9-12页 |
第二章 材料和方法 | 第12-27页 |
1.材料 | 第12-17页 |
1.1 细胞株和药品 | 第12页 |
1.2 质粒和引物 | 第12-13页 |
1.3 试剂 | 第13-14页 |
1.4 临床结直肠癌标本 | 第14页 |
1.5 主要仪器 | 第14-15页 |
1.6 试剂的配置 | 第15-17页 |
2.实验方法 | 第17-27页 |
2.1 细胞培养 | 第17-18页 |
2.2 质粒构建 | 第18-19页 |
2.3 荧光素酶报告基因实验 | 第19页 |
2.4 细胞划痕实验 | 第19-20页 |
2.5 细胞迁移和细胞侵袭实验 | 第20页 |
2.6 提取组织和细胞RNA | 第20-21页 |
2.7 逆转录PCR | 第21页 |
2.8 实时荧光定量PCR | 第21-22页 |
2.9 细胞裂解和Western Blot实验 | 第22-23页 |
2.10 裸鼠肺转移模型 | 第23页 |
2.11 组织蜡块的制作 | 第23页 |
2.12 HE染色 | 第23-24页 |
2.13 免疫组化染色及评分 | 第24-25页 |
2.14 石蜡切片荧光原位杂交 | 第25-26页 |
2.15 统计分析 | 第26-27页 |
第三章 实验结果 | 第27-51页 |
第一节 SIRT1在结直肠癌晚期患者的体内表达减少并且抑制结直肠癌细胞的转移和侵袭 | 第27-30页 |
第二节 SIRT1能够抑制MIR-15B-5P的转录 | 第30-35页 |
第三节 SIRT1通过减弱AP-1 与MIR-15B-5P启动子的结合抑制其转录 | 第35-39页 |
第四节 SIRT1通过阻断MIR-15B-5P的转录来抑制结直肠癌的转移 | 第39-43页 |
第五节 ACOX1是MIR-15B-5P的靶基因 | 第43-46页 |
第六节 SIRT1通过SIRT1/MIR-15B-5P/ACOX1轴抑制结直肠癌的转移 | 第46-51页 |
第四章 讨论 | 第51-53页 |
全文小结 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
综述 | 第59-67页 |
参考文献 | 第63-67页 |
附录:英文缩略词表 | 第67-68页 |
硕士期间科研成果 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |