| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 前言 | 第12-19页 |
| 材料和方法 | 第19-43页 |
| 1 实验材料 | 第19-26页 |
| 1.1 主要试剂 | 第19-21页 |
| 1.2 细胞株、质粒、干扰片段 | 第21-22页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第22-25页 |
| 1.4 主要仪器 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-43页 |
| 2.1 SN4741细胞的培养 | 第26-27页 |
| 2.2 细胞转染 | 第27-28页 |
| 2.3 CCK8实验检测SN4741细胞活力 | 第28页 |
| 2.4 质粒转化、扩增及提取 | 第28-31页 |
| 2.5 细胞免疫荧光染色 | 第31-32页 |
| 2.6 溶酶体荧光染色 | 第32页 |
| 2.7 Western Blot(免疫印迹) | 第32-38页 |
| 2.8 免疫共沉淀(Co-IP) | 第38页 |
| 2.9 目的基因转录水平的测定 | 第38-41页 |
| 2.10 大鼠中脑多巴胺能神经元原代培养 | 第41-42页 |
| 2.11 统计学处理 | 第42-43页 |
| 结果 | 第43-68页 |
| 1 MPP~+导致SN4741细胞活力下降,并抑制自噬溶酶体途径的功能 | 第43-48页 |
| 1.1 MPP~+诱导SN4741细胞活力下降 | 第43页 |
| 1.2 MPP~+抑制SN4741细胞的自噬水平和溶酶体生成 | 第43-46页 |
| 1.3 MPP~+导致核内TFEB减少进而从转录水平抑制自噬和溶酶体生成 | 第46-48页 |
| 2 MPP~+处理SN4741细胞导致c-Abl激活 | 第48页 |
| 3 抑制c-Abl可恢复MPP~+导致的自噬和溶酶体生成的抑制 | 第48-52页 |
| 4 抑制c-Abl可恢复MPP~+导致的核内TFEB的减少 | 第52-53页 |
| 5 MPP~+处理下c-Abl可磷酸化GSK3β-Tyr216位点使其活性增强 | 第53-58页 |
| 5.1 MPP~+处理SN4741细胞导致GSK3 β的活性增强 | 第53-55页 |
| 5.2 抑制c-Abl可减少MPP+导致的GSK3β-Tyr216磷酸化 | 第55-56页 |
| 5.3 c-Abl激动剂DPH可诱导GSK3β-Tyr216磷酸化 | 第56-57页 |
| 5.4 c-Abl可与GSk3β相互结合,MPP~+处理使二者相互结合增加 | 第57-58页 |
| 6 MPP~+诱导的GSK3β-Y216磷酸化并非由HSP90介导的自磷酸化所引起 | 第58-59页 |
| 7 MPP~+处理下抑制GSK3β可恢复TFEB介导的自噬和溶酶体生成 | 第59-65页 |
| 7.1 MPP~+处理下抑制GSK3β可恢复核内TFEB的水平 | 第60-62页 |
| 7.2 MPP~+处理下抑制GSK3β可恢复自噬和溶酶体生成 | 第62-65页 |
| 8 MPP~+处理下抑制c-Abl/GSK3β后所恢复的自噬和溶酶体生成对SN4741细胞有保护作用 | 第65-68页 |
| 讨论 | 第68-72页 |
| 结论 | 第72-75页 |
| 一、本文主要研究结果 | 第72-74页 |
| 二、待深入探讨的问题 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 硕士阶段发表论文 | 第82-83页 |
