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星星草(Puccinellia tenuiflora)PtMAPKK6基因的克隆及其在逆境胁迫下的表达特性分析

摘要第8-9页
ABSTRACT第9页
第1章 绪论第10-25页
    1.1 植物耐盐机制的研究概况第10-15页
        1.1.1 渗透调节剂的合成第11页
        1.1.2 离子平衡运输及区域化第11-12页
        1.1.3 活性氧清除系统第12页
        1.1.4 激素调节第12页
        1.1.5 光合途径改变第12-13页
        1.1.6 转录因子第13页
        1.1.7 盐协迫下的信号转导途径第13-14页
        1.1.8 形态结构的适应第14-15页
    1.2 植物MAPK级联途径第15-21页
        1.2.1 植物MAPK基因及其在逆境胁迫下的作用第15-18页
        1.2.2 植物MAPKK基因及其在逆境胁迫下的作用第18-20页
        1.2.3 植物MAPKKK基因及其在逆境胁迫下的作用第20-21页
    1.3 星星草耐盐机制的研究进展第21-22页
        1.3.1 星星草在形态解剖方面研究进展第21页
        1.3.2 星星草在生理生态学方面的研究进展第21-22页
        1.3.3 星星草在分子生物学方面的研究进展第22页
    1.4 荧光定量PCR技术第22-23页
    1.5 技术路线第23页
    1.6 立题的目的和意义第23-25页
第2章 星星草PtMAPKK6基因的克隆第25-36页
    2.1 试验材料第25-26页
        2.1.1 星星草的培养与处理第25页
        2.1.2 生化试剂第25页
        2.1.3 引物第25-26页
        2.1.4 主要仪器设备第26页
    2.2 试验方法第26-32页
        2.2.1 星星草根总RNA的提取第26-28页
        2.2.2 星星草根总RNA完整性、纯度及浓度检测第28页
        2.2.3 星星草根部总RNA的消化第28页
        2.2.4 星星草根部总RNA的纯化第28页
        2.2.5 纯化后的RNA完整性、纯度及浓度检测第28-29页
        2.2.6 星星草总RNA的反转录第29页
        2.2.7 PtMAPKK6开放读码框的克隆第29-30页
        2.2.8 PCR产物胶回收第30页
        2.2.9 扩增片段的连接第30-31页
        2.2.10 连接产物的转化第31页
        2.2.11 阳性重组子筛选第31-32页
    2.3 结果与分析第32-34页
        2.3.1 星星草根总RNA的提取第32页
        2.3.2 PtMAPKK6开放读码框的克隆第32-33页
        2.3.3 pT-PtMAPKK6重组质粒的菌落PCR筛选第33-34页
        2.3.4 PtMAPKK6基因序列的生物信息学分析第34页
    2.4 讨论第34-35页
    2.5 小结第35-36页
第3章 盐、干旱及低温胁迫下星星草PtMAPKK6基因的表达特性分析第36-44页
    3.1 试验材料第36-37页
        3.1.1 星星草的培养与处理第36页
        3.1.2 主要仪器设备第36页
        3.1.3 酶和生化试剂第36-37页
    3.2 试验方法第37-38页
        3.2.1 星星草总RNA的提取第37页
        3.2.2 星星草总RNA完整性、纯度及浓度检测第37页
        3.2.3 星星草根部总RNA的消化第37页
        3.2.4 星星草总RNA的纯化第37页
        3.2.5 反转录合成cDNA第一条链第37页
        3.2.6 Real-time PCR第37-38页
    3.3 结果分析与讨论第38-42页
        3.3.1 星星草总RNA质量分析第38-39页
        3.3.2 星星草根中PtMAPKK6基因在不同浓度NaCl胁迫下的特异性表达分析第39-40页
        3.3.3 星星草根中PtMAPKK6基因在干旱胁迫下的特异性表达分析第40页
        3.3.4 星星草根中PtMAPKK6基因在低温胁迫下的特异性表达分析第40-42页
    3.4 讨论第42-43页
        3.4.1 星星草根中PtMAPKK6基因在不同浓度NaCl胁迫下的特异性表达分析第42页
        3.4.2 星星草根中PtMAPKK6基因在干旱胁迫下的特异性表达分析第42-43页
        3.4.3 星星草根中PtMAPKK6基因在低温胁迫下的特异性表达分析第43页
    3.5 本章小结第43-44页
第4章 盐胁迫下星星草PtMAPKK6基因与其它盐胁迫应答基因表达模式的比较分析第44-50页
    4.1 试验材料第44页
        4.1.1 星星草的培养与处理第44页
        4.1.2 主要仪器设备第44页
        4.1.3 酶和生化试剂第44页
    4.2 试验方法第44-46页
        4.2.1 星星草总RNA的提取第44页
        4.2.2 星星草总RNA完整性、纯度及浓度检测第44页
        4.2.3 星星草根部总RNA的消化与纯化第44-45页
        4.2.4 反转录合成cDNA第一条链第45页
        4.2.5 Real-time PCR第45-46页
    4.3 结果分析与讨论第46-48页
        4.3.1 星星草总RNA质量分析第46页
        4.3.2 星星草根中PtMAPKK6基因与其它盐胁迫应答基因表达模式的相关性分析第46-48页
    4.4 本章小结第48-50页
结论第50-51页
参考文献第51-59页
攻读硕士学位期间发表学术论文第59-60页
致谢第60页

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