| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第11-21页 |
| 1 GPV的理化性质及生物学特性 | 第11-12页 |
| 2 GPV的结构蛋白和非结构蛋白 | 第12-13页 |
| 3 GPV的流行病学 | 第13页 |
| 4 GP的临床症状及病理特征 | 第13-14页 |
| 5 GP的实验室诊断方法 | 第14-17页 |
| 5.1 琼脂扩散实验(AGP) | 第14页 |
| 5.2 病毒中和试验(VN) | 第14-15页 |
| 5.3 免疫荧光诊断法 | 第15页 |
| 5.4 反向间接血凝试验 | 第15页 |
| 5.5 透射电镜检测 | 第15页 |
| 5.6 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第15-16页 |
| 5.7 对流免疫电泳法 | 第16页 |
| 5.8 核酸探针技术 | 第16-17页 |
| 5.9 PCR诊断方法 | 第17页 |
| 6 GP的防制 | 第17-18页 |
| 7 荧光定量PCR方法的研究进展 | 第18-20页 |
| 7.1 荧光染料 | 第19页 |
| 7.2 Tag Man探针 | 第19页 |
| 7.3 荧光标记(Amplisensor) | 第19页 |
| 7.4 分子信标(Molecular Beacon) | 第19-20页 |
| 8 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 材料与方法 | 第21-29页 |
| 1 材料 | 第21-23页 |
| 1.1 毒株与菌种 | 第21页 |
| 1.2 主要试剂与载体 | 第21页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 1.4 试验所需溶液及其配制 | 第22-23页 |
| 2 试验方法 | 第23-29页 |
| 2.1 引物的设计与合成 | 第23页 |
| 2.2 VP3基因组DNA的提取 | 第23页 |
| 2.3 PCR扩增 | 第23-24页 |
| 2.4 PCR产物的纯化回收 | 第24页 |
| 2.5 VP3基因的TA克隆 | 第24-25页 |
| 2.6 转化 | 第25页 |
| 2.7 克隆质粒的提取 | 第25页 |
| 2.8 克隆质粒的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.9 标准品制备 | 第26页 |
| 2.10 Taq Man荧光定量PCR反应条件的优化 | 第26-27页 |
| 2.11 标准曲线的绘制 | 第27页 |
| 2.12 重复性试验 | 第27页 |
| 2.13 特异性试验 | 第27页 |
| 2.14 敏感性试验 | 第27-28页 |
| 2.15 临床病料的筛选 | 第28-29页 |
| 结果 | 第29-34页 |
| 1 GPV-VP3基因扩增结果 | 第29页 |
| 2 重组质粒PCR鉴定结果 | 第29-30页 |
| 3 标准曲线的绘制 | 第30-31页 |
| 4 反应条件优化 | 第31页 |
| 4.1 最优反应条件 | 第31页 |
| 4.2 最优反应体系 | 第31页 |
| 5 重复性试验 | 第31页 |
| 6 特异性试验 | 第31-32页 |
| 7 敏感性试验 | 第32-33页 |
| 8 临床检测结果 | 第33-34页 |
| 讨论 | 第34-37页 |
| 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 作者简介 | 第47-48页 |
| 附录 | 第48页 |