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结核分枝杆菌DXS和DXR抑制剂高通量筛选模型的建立与应用

缩略语表第6-8页
中文摘要第8-9页
英文摘要第9页
前言第10-14页
实验材料与仪器第14-20页
    1 菌株及细胞第14页
    2 质粒第14页
    3 培养基第14-15页
    4 主要试剂第15-16页
    5 溶液第16-18页
    6 试剂盒第18页
    7 工具酶第18页
    8 主要仪器第18-20页
实验方法第20-44页
    1 重组MtDXS及MtDXR的生化特性预测第20页
    2 重组MtDXS及MtDXR的表达质粒的构建及测序分析第20-29页
    3 重组MtDXS及MtDXR的表达菌株构建第29页
    4 MtDXS和MtDXR蛋白的诱导表达第29-30页
    5 MtDXS和MtDXR蛋白样品的预处理第30-31页
    6 MtDXS和MtDXR蛋白纯化及蛋白质含量测定第31-33页
    7 纯化蛋白的SDS-PAGE电泳检测第33-34页
    8 MtDXS及MtDXR活性测定原理及方法第34-35页
    9 MtDXS和MtDXR酶稳定性研究第35-36页
    10 MtDXS和MtDXR酶活测定条件优化第36-38页
    11 MtDXS和MtDXR抑制剂高通量筛选模型的确立及应用第38-41页
    12 阳性化合物半数抑制浓度(IC_(50))测定第41页
    13 阳性化合物最低抑菌浓度(MIC)的测定第41-42页
    14 阳性化合物IMB-DXS-B1对MtDXS的酶动力学研究第42页
    15 阳性化合物IMB-DXR-B1对MtDXR的酶动力学研究第42页
    16 抗结核活性化合物对巨噬细胞毒性的初步评价第42-44页
实验结果第44-70页
    1 重组蛋白的生化特性第44-45页
    2 重组表达质粒pET28a-dxs及pET28a-dxr的构建与验证第45-52页
    3 MtDXS和MtDXR蛋白的制备第52-54页
    4 蛋白定量第54-55页
    5 酶活测定结果第55-56页
    6 重组蛋白稳定性第56-57页
    7 酶活测定条件的优化第57-64页
    8 MtDXS和MtDXR抑制剂高通量筛选模型的评价第64页
    9 抑制剂筛选结果第64-65页
    10 阳性化合物最低抑菌浓度(MIC)第65-67页
    11 阳性化合物IMB-DXS-B1对MtDXS的动力学研究第67-68页
    12 阳性化合物IMB-DXR-B1对MtDXR的动力学研究第68页
    13 抗结核活性化合物对巨噬细胞毒性的初步评价第68-70页
讨论第70-73页
结论第73-74页
参考文献第74-76页
文献综述第76-89页
    参考文献第85-89页
附录第89-99页
致谢第99页

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