缩略语表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9页 |
前言 | 第10-14页 |
实验材料与仪器 | 第14-20页 |
1 菌株及细胞 | 第14页 |
2 质粒 | 第14页 |
3 培养基 | 第14-15页 |
4 主要试剂 | 第15-16页 |
5 溶液 | 第16-18页 |
6 试剂盒 | 第18页 |
7 工具酶 | 第18页 |
8 主要仪器 | 第18-20页 |
实验方法 | 第20-44页 |
1 重组MtDXS及MtDXR的生化特性预测 | 第20页 |
2 重组MtDXS及MtDXR的表达质粒的构建及测序分析 | 第20-29页 |
3 重组MtDXS及MtDXR的表达菌株构建 | 第29页 |
4 MtDXS和MtDXR蛋白的诱导表达 | 第29-30页 |
5 MtDXS和MtDXR蛋白样品的预处理 | 第30-31页 |
6 MtDXS和MtDXR蛋白纯化及蛋白质含量测定 | 第31-33页 |
7 纯化蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第33-34页 |
8 MtDXS及MtDXR活性测定原理及方法 | 第34-35页 |
9 MtDXS和MtDXR酶稳定性研究 | 第35-36页 |
10 MtDXS和MtDXR酶活测定条件优化 | 第36-38页 |
11 MtDXS和MtDXR抑制剂高通量筛选模型的确立及应用 | 第38-41页 |
12 阳性化合物半数抑制浓度(IC_(50))测定 | 第41页 |
13 阳性化合物最低抑菌浓度(MIC)的测定 | 第41-42页 |
14 阳性化合物IMB-DXS-B1对MtDXS的酶动力学研究 | 第42页 |
15 阳性化合物IMB-DXR-B1对MtDXR的酶动力学研究 | 第42页 |
16 抗结核活性化合物对巨噬细胞毒性的初步评价 | 第42-44页 |
实验结果 | 第44-70页 |
1 重组蛋白的生化特性 | 第44-45页 |
2 重组表达质粒pET28a-dxs及pET28a-dxr的构建与验证 | 第45-52页 |
3 MtDXS和MtDXR蛋白的制备 | 第52-54页 |
4 蛋白定量 | 第54-55页 |
5 酶活测定结果 | 第55-56页 |
6 重组蛋白稳定性 | 第56-57页 |
7 酶活测定条件的优化 | 第57-64页 |
8 MtDXS和MtDXR抑制剂高通量筛选模型的评价 | 第64页 |
9 抑制剂筛选结果 | 第64-65页 |
10 阳性化合物最低抑菌浓度(MIC) | 第65-67页 |
11 阳性化合物IMB-DXS-B1对MtDXS的动力学研究 | 第67-68页 |
12 阳性化合物IMB-DXR-B1对MtDXR的动力学研究 | 第68页 |
13 抗结核活性化合物对巨噬细胞毒性的初步评价 | 第68-70页 |
讨论 | 第70-73页 |
结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-76页 |
文献综述 | 第76-89页 |
参考文献 | 第85-89页 |
附录 | 第89-99页 |
致谢 | 第99页 |