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p300通过组蛋白乙酰化修饰激活RASSF2基因表达并诱导胃癌细胞晚期凋亡

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-8页
第一部分 研究背景第8-19页
 一、组蛋白乙酰转移酶 p300/CBP 复合物的研究进展第8-14页
  (一) 组蛋白乙酰转移酶的研究进展第8-10页
  (二) p300/CBP 的结构和功能第10-12页
  (三) p300/CBP 的作用机制第12-14页
  (四) p300/CBP 与Ras 信号通路的关系第14页
 二、RASSF2 基因的研究进展第14-17页
  (一) RASSF 基因家族第14-15页
  (二) RASSF2 基因的结构第15-16页
  (三) RASSF2 基因的生物学功能第16页
  (四) RASSF2 启动子甲基化与基因沉默第16-17页
 三、本论文的研究内容和意义第17-19页
  (一) 立题依据第17页
  (二) 本文的研究内容和意义第17-19页
第二部分 实验材料与方法第19-32页
 一、实验材料第19页
  (一) 质粒第19页
  (二) 报告基因质粒的构建第19页
  (三) 蛋白质和抗体第19页
  (四) 哺乳动物细胞系第19页
  (五) 试剂第19页
 二、实验方法第19-32页
  Ⅰ、分子生物学试验方法第19-27页
   (一) 分子克隆第19页
   (二) DNA 的琼脂糖电泳第19-20页
   (三) 质粒大量制备的方法第20-21页
   (四) 哺乳动物细胞总 RNA 的提取和反转录第21-22页
   (五) 逆转录第22-23页
   (六)PCR 和荧光实时定量 realtime PCR第23-24页
   (七) 染色质免疫沉淀实验第24-26页
   (八) RNA 干涉(RNA siRNA)第26-27页
  Ⅱ、细胞生物学实验方法第27-31页
   (一) 哺乳动物细胞系的培养第27页
   (二) 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测第27-28页
   (三) 脂质体转染第28-29页
   (四) 蛋白质的Western Blotting 分析第29-31页
   (五) 集落形成实验第31页
  Ⅲ、统计分析第31-32页
第三部分 实验结果与分析第32-39页
 一 p300 通过上调 RASSF2 表达诱导细胞晚期凋亡第32-34页
 二 p300 对 RASSF2 基因转录的激活作用第34页
 三 p300 提高 RASSF2 启动子处组蛋白 H3 和 H4 的乙酰化水平第34-36页
 四 p300 与 Sp1 协同激活 RASSF2 基因表达第36-37页
 五 p300 与 Sp1 在 RASSF2 基因表达调控过程中的相互作用关系第37-39页
第四部分 讨论第39-42页
主要结论和创新点第42-43页
参考文献第43-49页
致谢第49-50页
在学期间公开发表论文及著作情况第50页

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