中文摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
英文缩略词 | 第16-17页 |
第1章 绪论 | 第17-37页 |
1.1 自噬 | 第17-28页 |
1.1.1 自噬的概述 | 第17-19页 |
1.1.2 自噬形成的基本过程 | 第19-21页 |
1.1.3 自噬的信号转导与调控 | 第21-25页 |
1.1.4 自噬与肿瘤的发生、发展 | 第25-28页 |
1.2 p53 | 第28-34页 |
1.2.1 p53 基因的概述 | 第28-29页 |
1.2.2 p53 基因在肿瘤生长调节中的作用 | 第29-30页 |
1.2.3 p53 基因突变与人类肿瘤 | 第30-31页 |
1.2.4 p53 与肿瘤放疗、化疗 | 第31-32页 |
1.2.5 p53 在自噬调控中的作用 | 第32-34页 |
1.3 立题依据 | 第34-37页 |
第2章 材料和方法 | 第37-53页 |
2.1 主要试剂及仪器 | 第37-40页 |
2.1.1 主要试剂与药品 | 第37-39页 |
2.1.2 主要器材 | 第39页 |
2.1.3 主要仪器 | 第39-40页 |
2.2 主要实验材料和方法 | 第40-53页 |
2.2.1 细胞株 | 第40页 |
2.2.2 胰酶的配制 | 第40页 |
2.2.3 D-Hanks 液的配制 | 第40-41页 |
2.2.4 培养液配制 | 第41页 |
2.2.5 FBS 制备 | 第41页 |
2.2.6 细胞冻存及复苏 | 第41页 |
2.2.7 照射条件 | 第41-42页 |
2.2.8 细胞增殖检测 | 第42页 |
2.2.9 细胞凋亡检测 | 第42页 |
2.2.10 细胞周期检测 | 第42页 |
2.2.11 MDC 染色法检测细胞自噬发生率 | 第42-43页 |
2.2.12 Hoechst 33342/PI 双荧光染色法检测细胞凋亡及坏死 | 第43页 |
2.2.13 脂质体转染法构建细胞模型 | 第43-44页 |
2.2.14 蛋白质的提取及蛋白浓度测定 | 第44页 |
2.2.15 蛋白质免疫印迹法(Western blot) | 第44-49页 |
2.2.16 RNA 的提取 | 第49页 |
2.2.17 Real-time PCR 检测目的基因 mRNA 水平表达 | 第49-50页 |
2.2.18 细菌培养技术 | 第50-52页 |
2.2.19 统计学方法 | 第52-53页 |
第3章 实验结果 | 第53-73页 |
3.1 高水平自噬促进 SKVCR 细胞耐药 | 第53-55页 |
3.1.1 SKOV3、SKVCR 基础自噬水平检测 | 第53-54页 |
3.1.2 抑制自噬对 SKOV3 和 SKVCR 细胞化疗敏感性的影响 | 第54-55页 |
3.2 获得性 p53 在调控卵巢癌细胞化疗敏感性中的作用 | 第55-61页 |
3.2.1 不同 p53 基因背景对 SKVCR 细胞化疗耐药性的影响 | 第55-57页 |
3.2.2 p53 基因对 SKVCR 细胞自噬水平的影响 | 第57-58页 |
3.2.3 p53 基因对 SKVCR 细胞凋亡及坏死的影响 | 第58-61页 |
3.3 白血病细胞 CEM 和 CEM-VLB 药敏性、辐射敏感性及自噬差异表达 | 第61-63页 |
3.3.1 CEM 和 CEM-VLB 药物敏感性差异 | 第61-62页 |
3.3.2 CEM 和 CEM-VLB 自噬相关蛋白表达差异 | 第62-63页 |
3.3.3 CEM 和 CEM-VLB 辐射敏感性差异 | 第63页 |
3.4 等效药物剂量对白血病细胞自噬及细胞周期的调控 | 第63-66页 |
3.4.1 药物 VLB 对 CEM 和 CEM-VLB 细胞自噬的影响 | 第63-65页 |
3.4.2 药物 VLB 对 CEM 和 CEM-VLB 细胞周期进程的影响 | 第65-66页 |
3.5 电离辐射对白血病细胞 p53 通路及自噬的调控 | 第66-73页 |
3.5.1 6.0Gy X线照射对 CEM和CEM-VLB细胞p53 及LC3 蛋白表达影响 | 第66-67页 |
3.5.2 3-MA 可抑制电离辐射诱导的 CEM、CEM-VLB 细胞自噬 | 第67-69页 |
3.5.3 在 CEM、CEM-VLB 细胞中抑制 IR 诱导的自噬对 p53 及其下游靶蛋白表达的影响 | 第69-70页 |
3.5.4 IR 联合 3-MA 对 CEM、CEM-VLB 细胞凋亡的影响 | 第70-73页 |
第4章 讨论 | 第73-81页 |
4.1 自噬在肿瘤细胞化疗耐药中的作用 | 第74-75页 |
4.2 外源获得性 p53 可逆转 SKVCR 细胞化疗耐药 | 第75-76页 |
4.3 wt p53 和 175H 在细胞死亡中发挥不同作用 | 第76-77页 |
4.4 药物 VLB 对 CEM、CEM-VLB 细胞自噬的影响 | 第77-78页 |
4.5 电离辐射对 CEM、CEM-VLB 细胞 p53 通路及自噬的调控 | 第78-79页 |
4.6 电离辐射对 CEM、CEM-VLB 细胞自噬及凋亡的调控 | 第79-81页 |
结论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-99页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第99-103页 |
致谢 | 第103页 |