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p53调控肿瘤细胞自噬以及化疗耐药的实验研究

中文摘要第4-8页
Abstract第8-12页
英文缩略词第16-17页
第1章 绪论第17-37页
    1.1 自噬第17-28页
        1.1.1 自噬的概述第17-19页
        1.1.2 自噬形成的基本过程第19-21页
        1.1.3 自噬的信号转导与调控第21-25页
        1.1.4 自噬与肿瘤的发生、发展第25-28页
    1.2 p53第28-34页
        1.2.1 p53 基因的概述第28-29页
        1.2.2 p53 基因在肿瘤生长调节中的作用第29-30页
        1.2.3 p53 基因突变与人类肿瘤第30-31页
        1.2.4 p53 与肿瘤放疗、化疗第31-32页
        1.2.5 p53 在自噬调控中的作用第32-34页
    1.3 立题依据第34-37页
第2章 材料和方法第37-53页
    2.1 主要试剂及仪器第37-40页
        2.1.1 主要试剂与药品第37-39页
        2.1.2 主要器材第39页
        2.1.3 主要仪器第39-40页
    2.2 主要实验材料和方法第40-53页
        2.2.1 细胞株第40页
        2.2.2 胰酶的配制第40页
        2.2.3 D-Hanks 液的配制第40-41页
        2.2.4 培养液配制第41页
        2.2.5 FBS 制备第41页
        2.2.6 细胞冻存及复苏第41页
        2.2.7 照射条件第41-42页
        2.2.8 细胞增殖检测第42页
        2.2.9 细胞凋亡检测第42页
        2.2.10 细胞周期检测第42页
        2.2.11 MDC 染色法检测细胞自噬发生率第42-43页
        2.2.12 Hoechst 33342/PI 双荧光染色法检测细胞凋亡及坏死第43页
        2.2.13 脂质体转染法构建细胞模型第43-44页
        2.2.14 蛋白质的提取及蛋白浓度测定第44页
        2.2.15 蛋白质免疫印迹法(Western blot)第44-49页
        2.2.16 RNA 的提取第49页
        2.2.17 Real-time PCR 检测目的基因 mRNA 水平表达第49-50页
        2.2.18 细菌培养技术第50-52页
        2.2.19 统计学方法第52-53页
第3章 实验结果第53-73页
    3.1 高水平自噬促进 SKVCR 细胞耐药第53-55页
        3.1.1 SKOV3、SKVCR 基础自噬水平检测第53-54页
        3.1.2 抑制自噬对 SKOV3 和 SKVCR 细胞化疗敏感性的影响第54-55页
    3.2 获得性 p53 在调控卵巢癌细胞化疗敏感性中的作用第55-61页
        3.2.1 不同 p53 基因背景对 SKVCR 细胞化疗耐药性的影响第55-57页
        3.2.2 p53 基因对 SKVCR 细胞自噬水平的影响第57-58页
        3.2.3 p53 基因对 SKVCR 细胞凋亡及坏死的影响第58-61页
    3.3 白血病细胞 CEM 和 CEM-VLB 药敏性、辐射敏感性及自噬差异表达第61-63页
        3.3.1 CEM 和 CEM-VLB 药物敏感性差异第61-62页
        3.3.2 CEM 和 CEM-VLB 自噬相关蛋白表达差异第62-63页
        3.3.3 CEM 和 CEM-VLB 辐射敏感性差异第63页
    3.4 等效药物剂量对白血病细胞自噬及细胞周期的调控第63-66页
        3.4.1 药物 VLB 对 CEM 和 CEM-VLB 细胞自噬的影响第63-65页
        3.4.2 药物 VLB 对 CEM 和 CEM-VLB 细胞周期进程的影响第65-66页
    3.5 电离辐射对白血病细胞 p53 通路及自噬的调控第66-73页
        3.5.1 6.0Gy X线照射对 CEM和CEM-VLB细胞p53 及LC3 蛋白表达影响第66-67页
        3.5.2 3-MA 可抑制电离辐射诱导的 CEM、CEM-VLB 细胞自噬第67-69页
        3.5.3 在 CEM、CEM-VLB 细胞中抑制 IR 诱导的自噬对 p53 及其下游靶蛋白表达的影响第69-70页
        3.5.4 IR 联合 3-MA 对 CEM、CEM-VLB 细胞凋亡的影响第70-73页
第4章 讨论第73-81页
    4.1 自噬在肿瘤细胞化疗耐药中的作用第74-75页
    4.2 外源获得性 p53 可逆转 SKVCR 细胞化疗耐药第75-76页
    4.3 wt p53 和 175H 在细胞死亡中发挥不同作用第76-77页
    4.4 药物 VLB 对 CEM、CEM-VLB 细胞自噬的影响第77-78页
    4.5 电离辐射对 CEM、CEM-VLB 细胞 p53 通路及自噬的调控第78-79页
    4.6 电离辐射对 CEM、CEM-VLB 细胞自噬及凋亡的调控第79-81页
结论第81-83页
参考文献第83-99页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第99-103页
致谢第103页

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