| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 研究背景 | 第11页 |
| 1.2 玫瑰的开发价值 | 第11-12页 |
| 1.2.1 观赏价值 | 第11页 |
| 1.2.2 经济价值 | 第11-12页 |
| 1.2.3 食用价值 | 第12页 |
| 1.2.4 药用价值 | 第12页 |
| 1.3 植物花香研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3.1 植物花香物质合成途径 | 第12-14页 |
| 1.3.1.1 萜类化合物 | 第13页 |
| 1.3.1.2 苯丙素类和苯类化合物 | 第13页 |
| 1.3.1.3 脂肪酸衍生物 | 第13-14页 |
| 1.3.2 玫瑰花香研究现状 | 第14页 |
| 1.4 2-苯乙醇研究进展 | 第14-17页 |
| 1.4.1 2-苯乙醇概述 | 第14-15页 |
| 1.4.2 2-苯乙醇的合成方法 | 第15-16页 |
| 1.4.2.1 化学合成法 | 第15页 |
| 1.4.2.2 物理提取法 | 第15页 |
| 1.4.2.3 微生物转化法 | 第15-16页 |
| 1.4.3 玫瑰中2-苯乙醇的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 玫瑰2-苯乙醇合成相关基因RrAAAT和RrPPDCs的克隆与序列分析 | 第18-33页 |
| 2.1 材料与方法 | 第18-23页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.1.2 生化试剂 | 第18页 |
| 2.1.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.1.4 常用试剂的配制 | 第19页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第19-23页 |
| 2.1.2.1 玫瑰总RNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.1.2.2 引物设计 | 第20页 |
| 2.1.2.3 基因3'端片段的克隆 | 第20-22页 |
| 2.1.2.4 基因5'端片段的克隆 | 第22-23页 |
| 2.1.2.5 PCR扩增产物的连接转化与鉴定 | 第23页 |
| 2.1.2.6 基因的序列分析 | 第23页 |
| 2.2 结果与分析 | 第23-31页 |
| 2.2.1 基因cDNA序列的克隆 | 第23-25页 |
| 2.2.2 基因全长cDNA序列的分析 | 第25-31页 |
| 2.2.2.1 RrAAAT基因全长cDNA序列分析 | 第25-27页 |
| 2.2.2.2 RrPPDC1基因全长及cDNA序列分析 | 第27-29页 |
| 2.2.2.3 RrPPDC2基因全长及cDNA序列分析 | 第29-31页 |
| 2.3 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 玫瑰RrAAAT和RrPPDCs基因的时空表达分析 | 第33-40页 |
| 3.1 材料与方法 | 第33-37页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第33-34页 |
| 3.1.1.1 植物材料 | 第33-34页 |
| 3.1.1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 3.1.1.3 主要仪器 | 第34页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第34-37页 |
| 3.1.2.1 玫瑰总RNA的提取 | 第34页 |
| 3.1.2.2 引物设计 | 第34-35页 |
| 3.1.2.3 反转录反应 | 第35页 |
| 3.1.2.4 RT-PCR反应 | 第35-36页 |
| 3.1.2.5 Real-Time PCR反应 | 第36-37页 |
| 3.1.2.6 Real Time PCR数据分析的方法 | 第37页 |
| 3.2 结果与分析 | 第37-39页 |
| 3.2.1 玫瑰花不同发育时期RrAAAT和RrPPDCs基因的表达分析 | 第37-38页 |
| 3.2.2 玫瑰花器官不同部位中RrAAAT和RrPPDCs基因的表达分析 | 第38-39页 |
| 3.3 讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 玫瑰2-苯乙醇合成相关基因转化矮牵牛与功能验证 | 第40-71页 |
| 4.1 试验材料 | 第40-41页 |
| 4.1.1 生物材料 | 第40页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第40页 |
| 4.1.3 主要试验药品及试剂 | 第40-41页 |
| 4.2 试验方法 | 第41-48页 |
| 4.2.1 2-苯乙醇合成相关基因过表达载体构建 | 第41-46页 |
| 4.2.1.1 目的基因的初步获取 | 第41-43页 |
| 4.2.1.2 目的基因导入载体 | 第43-45页 |
| 4.2.1.3 重组质粒的鉴定及检测 | 第45页 |
| 4.2.1.4 重组质粒导入农杆菌EHA105 | 第45-46页 |
| 4.2.2 矮牵牛的遗传转化 | 第46-47页 |
| 4.2.2.1 叶片预处理 | 第46页 |
| 4.2.2.2 侵染液的准备 | 第46页 |
| 4.2.2.3 叶片共培养 | 第46页 |
| 4.2.2.4 分化筛选培养 | 第46-47页 |
| 4.2.2.5 生根筛选培养 | 第47页 |
| 4.2.3 转基因矮牵牛的鉴定 | 第47-48页 |
| 4.2.3.1 矮牵牛GUS染色 | 第47页 |
| 4.2.3.2 PCR检测 | 第47-48页 |
| 4.2.4 转基因阳性植株的生物学特性观测 | 第48页 |
| 4.2.4.1 矮牵牛转基因植株表型观察 | 第48页 |
| 4.2.4.2 转基因植株花朵挥发性香气成分检测 | 第48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-70页 |
| 4.3.1 基因过表达载体构建 | 第48-56页 |
| 4.3.1.1 目的基因的初步获取 | 第48-51页 |
| 4.3.1.2 重组质粒的酶切验证及测序分析 | 第51-53页 |
| 4.3.1.3 重组质粒转化农杆菌 | 第53-56页 |
| 4.3.2 矮牵牛的遗传转化 | 第56页 |
| 4.3.3 转基因矮牵牛的鉴定与观测 | 第56-70页 |
| 4.3.3.1 转基因矮牵牛GUS染色 | 第56-57页 |
| 4.3.3.2 转RrAADC基因植株观测 | 第57-61页 |
| 4.3.3.2.1 转基因植株PCR检测 | 第57-58页 |
| 4.3.3.2.2 RrAADC基因表达情况检测 | 第58页 |
| 4.3.3.2.3 野生型与转RrAADC基因植株表型观测 | 第58-59页 |
| 4.3.3.2.4 野生型与转RrAADC基因矮牵牛花香成分比较 | 第59-61页 |
| 4.3.3.3 转RrAAAT基因植株观测 | 第61-64页 |
| 4.3.3.3.1 转基因植株PCR检测 | 第61页 |
| 4.3.3.3.2 RrAAAT基因表达情况检测 | 第61页 |
| 4.3.3.3.3 野生型与RrAAAT转基因植株表型观测 | 第61-62页 |
| 4.3.3.3.4 野生型与RrAAAT转基因植株花香成分比较 | 第62-64页 |
| 4.3.3.4 转RrPPDC1基因植株观测 | 第64-69页 |
| 4.3.3.4.1 转基因植株PCR检测 | 第65页 |
| 4.3.3.4.2 RrPPDC1基因表达情况检测 | 第65-66页 |
| 4.3.3.4.3 野生型与RrPPDC1转基因植株表型观测 | 第66-67页 |
| 4.3.3.4.4 野生型与RrPPDC1转基因植株花香成分比较 | 第67-69页 |
| 4.3.3.5 转RrPAR基因植株观测 | 第69-70页 |
| 4.4 讨论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
