| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩略词 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-38页 |
| 1. 基因捕获概述 | 第12-18页 |
| 1.1 基因捕获定义 | 第12-13页 |
| 1.2 捕获载体分类 | 第13-15页 |
| 1.2.1 增强子捕获载体 | 第14页 |
| 1.2.2 启动子捕获载体 | 第14-15页 |
| 1.2.3 基因捕获载体 | 第15页 |
| 1.3 新型捕获载体的设计及应用 | 第15-17页 |
| 1.4 转座子介导的基因捕获技术概述 | 第17-18页 |
| 2. 转座子的概述 | 第18-21页 |
| 2.1 转座子的定义 | 第18-19页 |
| 2.2 转座子类型 | 第19页 |
| 2.3 转座子家族 | 第19-21页 |
| 3. SB转座子研究进展 | 第21-25页 |
| 3.1 SB转座子的发现与结构 | 第21-23页 |
| 3.2 SB转座子的转座机制 | 第23-24页 |
| 3.3 SB转座子的应用 | 第24-25页 |
| 4. PB转座子研究进展 | 第25-27页 |
| 4.1 PB转座子结构及转座机制 | 第25-26页 |
| 4.2 PB转座子的应用 | 第26-27页 |
| 5. Tol2转座子研究进展 | 第27-28页 |
| 5.1 Tol2转座子结构与转座机制 | 第27-28页 |
| 5.2 Tol2的应用 | 第28页 |
| 6. 斑马鱼胚胎显微注射 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-38页 |
| 第二部分 试验研究 | 第38-72页 |
| 前言 | 第38-39页 |
| 第一章 多转座子启动子捕获载体的构建及3T3细胞表达验证 | 第39-47页 |
| 摘要 | 第39-40页 |
| 前言 | 第40页 |
| 1 材料与方法 | 第40-43页 |
| 1.1 菌株及载体质粒 | 第40-41页 |
| 1.2 载体构建所用引物的设计与合成 | 第41页 |
| 1.3 多转座子捕获载体的构建 | 第41-43页 |
| 1.3.1 人血液基因组DNA提取 | 第42页 |
| 1.3.2 人B淋巴细胞中染色体易位激活原癌基因(BCL2)剪切受体的克隆 | 第42页 |
| 1.3.3 启动子捕获载体pT3-PST-Pro-Trap的构建 | 第42-43页 |
| 1.4 pT3-PST-Pro-Trap转染3T3细胞 | 第43页 |
| 2 结果 | 第43-45页 |
| 2.1 SA克隆及序列鉴定 | 第43-44页 |
| 2.2 基因捕获载体pT3-PST-Pro-Trap的构建及鉴定 | 第44-45页 |
| 2.3 pT3-PST-Pro-Trap捕获功能验证及捕获效率的比较 | 第45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 第二章 三种转座子介导的启动子捕获载体在MEF和HELA细胞基因捕获效率比较 | 第47-57页 |
| 摘要 | 第47页 |
| 前言 | 第47-48页 |
| 1 材料与方法 | 第48-50页 |
| 1.1 菌株及试剂 | 第48页 |
| 1.2 仪器设备 | 第48-49页 |
| 1.3 pT3-NEO-Trap载体构建 | 第49页 |
| 1.4 细胞转染方案 | 第49页 |
| 1.5 G418抗性筛选 | 第49-50页 |
| 2 结果 | 第50-55页 |
| 2.1 NEO基因的克隆与鉴定 | 第50-51页 |
| 2.2 pT3-NEO-Trap载体的构建与鉴定 | 第51-52页 |
| 2.3 三种转座子在MEF基因捕获效率比较 | 第52-53页 |
| 2.4 三种转座子在HELA细胞基因捕获效率比较 | 第53-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 第三章 三种转座子介导的启动子捕获载体在斑马鱼胚胎捕获效率比较 | 第57-66页 |
| 摘要 | 第57页 |
| 前言 | 第57-58页 |
| 1 材料与方法 | 第58-59页 |
| 1.1 菌株、载体质粒和主要试剂 | 第58页 |
| 1.2 pT3-PST-Pro-Trap质粒DNA制备 | 第58页 |
| 1.3 体外转录转座酶mRNA | 第58-59页 |
| 1.4 斑马鱼胚胎注射方案 | 第59页 |
| 1.5 数据统计分析 | 第59页 |
| 2 结果 | 第59-64页 |
| 2.1 注射对斑马鱼胚胎成活率的影响 | 第59-60页 |
| 2.2 三种转座子在斑马鱼胚胎基因捕获效率比较 | 第60-64页 |
| 3 讨论 | 第64-66页 |
| 第四章 DNA转座酶和mRNA转座酶对基因捕获效率的影响 | 第66-72页 |
| 摘要 | 第66页 |
| 前言 | 第66-67页 |
| 1 材料与方法 | 第67-68页 |
| 1.1 菌株、载体质粒和主要试剂 | 第67页 |
| 1.2 pGBT-RP2-1质粒DNA制备 | 第67页 |
| 1.3 斑马鱼胚胎注射 | 第67-68页 |
| 1.4 数据统计分析 | 第68页 |
| 2 结果 | 第68-70页 |
| 2.1 pGBT-RP2-1载体注射对斑马鱼胚胎成活率的影响 | 第68页 |
| 2.2 转座酶DNA和mRNA介导的基因捕获效率比较 | 第68-70页 |
| 3 讨论 | 第70-72页 |
| 全文结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表学术论文 | 第77-78页 |
