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中国春小麦几丁质酶基因克隆、染色体定位、原核表达及表达量分析

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第11-19页
    1.1 几丁质酶功能概述第11-12页
    1.2 几丁质酶的分布第12页
    1.3 几丁质酶的分类第12-14页
        1.3.1 系统分类法第12页
        1.3.2 基于几丁质酶水解位点分类第12-13页
        1.3.3 根据几丁质酶催化区氨基酸序列进行分类第13页
        1.3.4 根据几丁质酶的等电点分类第13页
        1.3.5 根据几丁质酶的蛋白质结构分类第13-14页
    1.4 几丁质酶在抗病基因工程中的研究进展第14-15页
    1.5 植物几丁质酶基因的研究现状第15-18页
        1.5.1 植物几丁质酶基因的结构和相应的功能第15-16页
        1.5.2 植物几丁质酶基因的研究进展第16-17页
        1.5.3 小麦几丁质酶的研究现状第17-18页
    1.6 本实验的目的及意义第18-19页
第二章 材料与方法第19-26页
    2.1 材料与仪器第19页
        2.1.1 材料第19页
        2.1.2 仪器第19页
        2.1.3 引物设计与合成第19页
    2.2 实验方法第19-26页
        2.2.1 基因组 DNA 的提取第19-20页
        2.2.2 目的基因的扩增与目的片段的回收第20-21页
        2.2.3 目的片段的克隆第21-22页
        2.2.4 目的基因序列分析第22页
        2.2.5 不同亚基的染色体定位第22页
        2.2.6 表达载体的构建第22-23页
        2.2.7 重组质粒的诱导表达第23页
        2.2.8 重组蛋白的 SDS-PAGE 电泳、Western blot 分析及质谱鉴定第23-24页
        2.2.9 重组蛋白的纯化第24-25页
        2.2.10 几丁质酶不同亚基的表达分析第25-26页
第三章 结果与分析第26-36页
    3.1 中国春 Chi 基因的 PCR 扩增第26页
    3.2 核酸序列分析第26-27页
    3.3 推导的氨基酸序列分析第27-29页
    3.4 Chi 基因的各亚基的染色体定位第29-30页
    3.5 Chi 基因的原核表达体系的建立第30页
    3.6 融合基因的诱导表达和蛋白纯化第30-31页
    3.7 质谱鉴定第31-32页
    3.8 几丁质酶不同亚基的表达情况第32-34页
    3.9 进化树分析第34-36页
第四章 讨论第36-38页
第五章 结论第38-39页
参考文献第39-43页
附录第43-46页
致谢第46-47页
作者简介第47页

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