| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第10-17页 |
| 1.1 益生菌概述 | 第10-12页 |
| 1.1.1 益生菌定义和作用 | 第10页 |
| 1.1.2 益生菌的分类 | 第10-11页 |
| 1.1.3 益生菌所具有的特性 | 第11-12页 |
| 1.2 益生菌抗病毒效果在肠道内的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3 肠道益生菌抗病毒作用机制研究进展 | 第14页 |
| 1.4 PEDV的概述 | 第14-16页 |
| 1.4.1 病原学 | 第15页 |
| 1.4.2 流行特点 | 第15页 |
| 1.4.3 致病机制 | 第15页 |
| 1.4.4 PEDV的防治 | 第15-16页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 2 材料和方法 | 第17-26页 |
| 2.1 毒株及粪样的来源 | 第17页 |
| 2.2 主要试剂 | 第17页 |
| 2.3 培养基及用液 | 第17-18页 |
| 2.3.1 细胞培养用液 | 第17-18页 |
| 2.3.2 培养基和溶液 | 第18页 |
| 2.4 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.5 乳酸菌的分离纯化 | 第19页 |
| 2.6 PEDV的增殖与检测 | 第19-21页 |
| 2.6.1 Vero细胞的复苏 | 第19页 |
| 2.6.2 PEDV的增殖传代 | 第19页 |
| 2.6.3 细胞毒的冻存与收集 | 第19页 |
| 2.6.4 病毒RNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.6.5 病毒cDNA的合成 | 第20页 |
| 2.6.6 病毒基因的扩增 | 第20-21页 |
| 2.7 PEDV毒力的测定 | 第21页 |
| 2.8 抗PEDV乳酸菌的初步筛选 | 第21页 |
| 2.9 乳酸菌的耐酸耐胆盐试验 | 第21页 |
| 2.9.1 耐酸试验 | 第21页 |
| 2.9.2 耐胆盐试验 | 第21页 |
| 2.10 乳酸菌株的初步鉴定 | 第21-23页 |
| 2.10.1 初筛乳酸菌株的生化鉴定 | 第21-22页 |
| 2.10.2 初筛乳酸菌株16SrDNA鉴定 | 第22-23页 |
| 2.11 乳酸菌体外抗PEDV作用 | 第23-26页 |
| 2.11.1 乳酸菌株生长曲线的测定 | 第23页 |
| 2.11.2 乳酸菌菌液及代谢产物的制备 | 第23页 |
| 2.11.3 乳酸菌的细胞毒性测定 | 第23-24页 |
| 2.11.4 PEDV多克隆抗体的制备 | 第24页 |
| 2.11.5 MTT法间接检测益生菌对病毒的抑制率 | 第24页 |
| 2.11.6 PEDV毒力受乳酸菌的影响 | 第24-25页 |
| 2.11.7 间接免疫荧光检测PEDV在Vero细胞上受到乳酸菌的影响 | 第25-26页 |
| 3 结果 | 第26-40页 |
| 3.1 乳酸菌的分离纯化 | 第26-29页 |
| 3.1.1 菌落形态 | 第26页 |
| 3.1.2 PEDV的增殖与检测结果 | 第26-27页 |
| 3.1.3 PEDVRT-PCR鉴定 | 第27页 |
| 3.1.4 PEDV的TCID_(50)测定 | 第27-28页 |
| 3.1.5 抗PEDV乳酸菌株筛选结果 | 第28-29页 |
| 3.2 初筛菌株的鉴定 | 第29-32页 |
| 3.2.1 生化鉴定结果 | 第29-31页 |
| 3.2.2 16SrDNA鉴定结果 | 第31页 |
| 3.2.3 16SrDNA同源性分析及进化树建立 | 第31-32页 |
| 3.3 乳酸菌体外抗PEDV作用结果 | 第32-40页 |
| 3.3.1 生长曲线的测定 | 第32-33页 |
| 3.3.2 乳酸菌对细胞毒性的测定结果 | 第33页 |
| 3.3.3 MTT法测定结果 | 第33-38页 |
| 3.3.4 乳酸菌对PEDV毒力的影响 | 第38页 |
| 3.3.5 间接免疫荧光结果分析 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-45页 |
| 4.1 抗PEDV乳酸菌的分离鉴定及初筛过程 | 第40页 |
| 4.2 乳酸菌体外抗PEDV作用分析 | 第40-45页 |
| 4.2.1 MTT法检测抗PEDV作用的分析 | 第41-43页 |
| 4.2.2 TCID_(50)检测乳酸菌对PEDV毒力影响的分析 | 第43页 |
| 4.2.3 间接免疫荧光法检测乳酸菌抗PEDV作用的分析 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 作者简介 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 详细摘要 | 第54-55页 |
