甘蔗ATP-柠檬酸裂解酶基因（SoACLA-1）的克隆与功能分析
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 ACL的研究进展 | 第11-16页 |
| 1.1.1 ACL的亚细胞定位 | 第11-12页 |
| 1.1.2 ACL的结构 | 第12-13页 |
| 1.1.3 ACL的酶学特性 | 第13页 |
| 1.1.4 ACL基因的克隆和功能研究 | 第13-15页 |
| 1.1.5 ACL的作用机制 | 第15-16页 |
| 1.2 本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 1.3 技术路线 | 第18-19页 |
| 2 SoACLA-1基因的克隆及生物信息学分析 | 第19-25页 |
| 2.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 甘蔗叶片总RNA的提取 | 第19页 |
| 2.2.2 总RNA质量的检测 | 第19页 |
| 2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第19-20页 |
| 2.2.4 引物设计和PCR扩增 | 第20页 |
| 2.2.5 SoACLA-1基因生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2.3.1 总RNA质量及cDNA的检测 | 第21页 |
| 2.3.2 SoACLA-1目的基因的扩增 | 第21-22页 |
| 2.3.3 SoACLA-1基因生物信息学分析 | 第22-24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-25页 |
| 3 农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第25-37页 |
| 3.1 材料 | 第25-26页 |
| 3.1.1 菌种及质粒 | 第25页 |
| 3.1.2 试剂 | 第25页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第25页 |
| 3.1.4 培养基及溶液的配置 | 第25-26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 3.2.1 双子叶植物表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 3.2.2 叶盘法转化烟草 | 第27页 |
| 3.2.3 阳性植株的检测 | 第27页 |
| 3.2.4 转基因烟草对干旱的耐受性检测 | 第27-29页 |
| 3.3 结果与分析 | 第29-35页 |
| 3.3.1 子叶植物表达载体的构建 | 第29-30页 |
| 3.3.2 转基因烟草植株再生 | 第30页 |
| 3.3.3 阳性植株的检测 | 第30-32页 |
| 3.3.4 转基因烟草对干旱的耐受性检测 | 第32-35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-37页 |
| 4 农杆菌介导的甘蔗遗传转化 | 第37-47页 |
| 4.1 材料 | 第37页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第37页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第37页 |
| 4.1.3 仪器设备 | 第37页 |
| 4.1.4 培养基 | 第37页 |
| 4.2 方法 | 第37-40页 |
| 4.2.1 G418抗性筛选试验 | 第37-38页 |
| 4.2.2 单子叶植物表达载体的构建 | 第38-39页 |
| 4.2.3 叶盘法转化甘蔗 | 第39页 |
| 4.2.4 阳性植株的检测 | 第39-40页 |
| 4.3 结果与分析 | 第40-45页 |
| 4.3.1 G418抗性筛选试验 | 第40-43页 |
| 4.3.2 单子叶植物表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 4.3.3 转基因甘蔗植株再生 | 第44-45页 |
| 4.3.4 阳性植株的检测 | 第45页 |
| 4.4 讨论 | 第45-47页 |
| 5 展望 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 附录 | 第56页 |
