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扇贝裙边糖胺聚糖对6-OHDA诱导SH-SY5Y细胞氧化应激与凋亡的保护机制研究

摘要第2-3页
Abstract第3页
引言第6-8页
第1章 实验材料第8-10页
    1.1 细胞株第8页
    1.2 主要试剂耗材第8页
    1.3 主要仪器第8-10页
第2章 实验方法第10-16页
    2.1 细胞培养及分组第10页
    2.2 MDA含量的测定第10-11页
        2.2.1 细胞总蛋白的提取第10页
        2.2.2 蛋白浓度的测定第10页
        2.2.3 MDA的测定第10-11页
    2.3 LDH活性的测定第11页
    2.4 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡第11页
    2.5 实时荧光(real-time)PCR检测细胞Bcl-2、Bax mRNA相对表达水平第11-12页
        2.5.1 RNA的提取第11-12页
        2.5.2 cDNA的合成第12页
        2.5.3 real-time PCR检测第12页
    2.6 Western blotting检测细胞Cyt C的释放量第12-14页
        2.6.1 试剂的配备第12-13页
        2.6.2 胞质蛋白的提取第13页
        2.6.3 蛋白浓度测定第13页
        2.6.4 制备15%分离胶与5%浓缩胶第13页
        2.6.5 SDS-PAGE电泳第13-14页
        2.6.6 膜转移第14页
        2.6.7 封闭第14页
        2.6.8 与一抗反应第14页
        2.6.9 与二抗反应第14页
        2.6.10 显色第14页
    2.7 流式细胞技术(FCM)检测活化Caspase-9蛋白的表达第14-15页
    2.8 统计学方法第15-16页
第3章 实验结果第16-22页
    3.1 SS-GAG对6-OHDA损伤后SH-SY5Y细胞MDA和LDH的影响第16页
    3.2 SS-GAG对6-OHDA诱导SH-SY5Y细胞凋亡率的影响第16-18页
    3.3 SS-GAG对Bcl-2和Bax mRNA的相对表达水平的影响第18-19页
    3.4 SS-GAG对细胞色素C释放水平的影响第19-20页
    3.5 SS-GAG对SH-SY5Y细胞中活化Caspase-9表达的影响第20-22页
第4章 讨论第22-26页
结论第26-27页
参考文献第27-31页
综述第31-49页
    综述的参考文献第41-49页
攻读学位期间的研究成果第49-50页
致谢第50-51页

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