| 缩略语索引 | 第9-11页 |
| 摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 第一章 前言 | 第19-26页 |
| 1.1 糖蛋白药物糖修饰简介 | 第19-21页 |
| 1.1.1 糖蛋白药物简介 | 第19页 |
| 1.1.2 糖蛋白药物糖修饰的分类 | 第19-20页 |
| 1.1.3 糖修饰与糖蛋白药物工艺和质量的关系 | 第20-21页 |
| 1.2 糖蛋白药物糖修饰的研究方法 | 第21-23页 |
| 1.2.1 糖基化修饰(Glycosylation)研究方法 | 第21-22页 |
| 1.2.2 糖化修饰(Glycation)研究方法 | 第22-23页 |
| 1.3 立题意义、研究内容及创新点 | 第23-26页 |
| 1.3.1 立题意义 | 第23页 |
| 1.3.2 研究思路和内容 | 第23-25页 |
| 1.3.3 创新点 | 第25-26页 |
| 第二章 从完整蛋白层次研究糖蛋白药物的糖修饰一致性 | 第26-38页 |
| 2.1 前言 | 第26-27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27页 |
| 2.2.1 仪器与设备 | 第27页 |
| 2.2.2 材料与试剂 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-31页 |
| 2.3.1 N-糖切除 | 第27-28页 |
| 2.3.2 O-糖唾液酸切除 | 第28页 |
| 2.3.3 O-糖切除 | 第28页 |
| 2.3.4 MALDI-TOF质谱内标法和准内标法检测 | 第28-29页 |
| 2.3.5 超高分辨质谱(ExactivePlusEMR)检测 | 第29-30页 |
| 2.3.6 己糖指数计算 | 第30页 |
| 2.3.7 唾液酸指数计算 | 第30页 |
| 2.3.8 rhTPO糖含量计算公式 | 第30-31页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第31-37页 |
| 2.4.1 准内标法研究rhTPO糖含量一致性 | 第31-34页 |
| 2.4.2 己糖指数在抗体生物类似药一致性研究中的应用 | 第34-36页 |
| 2.4.3 唾液酸指数在抗体生物类似药一致性研究中的应用 | 第36-37页 |
| 2.5 本章结论 | 第37-38页 |
| 第三章 串联质谱研究复杂糖蛋白的糖基化位点及修饰率 | 第38-52页 |
| 3.1 前言 | 第38页 |
| 3.2 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.2.1 仪器与设备 | 第38-39页 |
| 3.2.2 材料与试剂 | 第39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-41页 |
| 3.3.1 蛋白酶解 | 第39页 |
| 3.3.2 N-糖切除 | 第39-40页 |
| 3.3.3 超高分辨串联质谱(QEHF)检测 | 第40页 |
| 3.3.4 N-糖位点分析数据库检索 | 第40页 |
| 3.3.5 O-糖位点分析数据库检索 | 第40-41页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第41-51页 |
| 3.4.1 rhEPO的N-糖位点、O-糖位点及N-糖修饰率 | 第41-46页 |
| 3.4.2 rhTPO的N-糖位点、O-糖位点及N-糖修饰率 | 第46-50页 |
| 3.4.3 O18标记N-糖位点研究 | 第50-51页 |
| 3.5 本章结论 | 第51-52页 |
| 第四章 寡糖及糖肽串联质谱分析N-糖和O-糖糖型 | 第52-67页 |
| 4.1 前言 | 第52页 |
| 4.2 实验材料 | 第52-53页 |
| 4.2.1 仪器与设备 | 第52-53页 |
| 4.2.2 材料与试剂 | 第53页 |
| 4.3 实验方法 | 第53-55页 |
| 4.3.1 N-糖解离、收集及衍生 | 第53页 |
| 4.3.2 蛋白酶解 | 第53-54页 |
| 4.3.3 超高分辨串联质谱(G2S)检测衍生寡糖 | 第54页 |
| 4.3.4 超高分辨串联质谱(QEHF)检测糖肽 | 第54页 |
| 4.3.5 数据库检索 | 第54-55页 |
| 4.3.6 数据筛选与统计 | 第55页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第55-65页 |
| 4.4.1 单抗N-糖糖型分析 | 第55-60页 |
| 4.4.2 糖肽水平的rhTPO糖型分析 | 第60-65页 |
| 4.5 本章结论 | 第65-67页 |
| 第五章 抗体药物的糖化修饰研究 | 第67-76页 |
| 5.1 前言 | 第67-68页 |
| 5.2 实验材料 | 第68页 |
| 5.2.1 仪器与设备 | 第68页 |
| 5.2.2 材料与试剂 | 第68页 |
| 5.3 实验方法 | 第68-70页 |
| 5.3.1 糖化样本收集 | 第68-69页 |
| 5.3.2 N-糖切除 | 第69页 |
| 5.3.3 蛋白酶解 | 第69页 |
| 5.3.4 超高分辨质谱(ExactivePlusEMR)检测糖化蛋白 | 第69页 |
| 5.3.5 超高分辨串联质谱(QEHF)检测糖化肽 | 第69页 |
| 5.3.6 数据库检索 | 第69-70页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第70-75页 |
| 5.4.1 完整蛋白水平分析糖化修饰 | 第70-72页 |
| 5.4.2 酶解肽段水平分析糖化修饰 | 第72-75页 |
| 5.5 本章结论 | 第75-76页 |
| 第六章 IgG1及IgG2抗体药物电荷异构体研究 | 第76-88页 |
| 6.1 前言 | 第76-77页 |
| 6.2 实验材料 | 第77页 |
| 6.2.1 仪器与设备 | 第77页 |
| 6.2.2 材料与试剂 | 第77页 |
| 6.3 实验方法 | 第77-79页 |
| 6.3.1 N-糖切除及蛋白酶解 | 第77-78页 |
| 6.3.2 NEM烷基化及蛋白酶解 | 第78页 |
| 6.3.3 超高分辨质谱(ExactivePlusEMR)检测 | 第78页 |
| 6.3.4 超高分辨串联质谱(QEHF)检测 | 第78页 |
| 6.3.5 数据库检索 | 第78-79页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第79-87页 |
| 6.4.1 IgG1抗体药物电荷异构体分析 | 第79-85页 |
| 6.4.2 IgG2抗体药物电荷异构体分析 | 第85-87页 |
| 6.5 本章结论 | 第87-88页 |
| 全文总结 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-95页 |
| 附录 | 第95-103页 |
| 个人简历 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 综述 | 第106-121页 |
| 参考文献 | 第115-121页 |
