| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 前言 | 第13-21页 |
| 1.1 MHC- I简介 | 第13-16页 |
| 1.1.1 MHC -I在免疫系统中的作用 | 第14-15页 |
| 1.1.2 神经系统中的作用 | 第15-16页 |
| 1.2 NKG2D 及其配体 | 第16-21页 |
| 1.2.1 NK 细胞的激活受体——NKG2D | 第16-17页 |
| 1.2.2 NKG2D 的配体——Rae-1，Mult1 和 H60 | 第17-21页 |
| 第2章 带有 FLAG 标签的 RAE-1 表达载体的构建 | 第21-40页 |
| 2.1 序言 | 第21-23页 |
| 2.1.1 标签的种类和应用 | 第21-22页 |
| 2.1.2 重叠 PCR的原理 | 第22-23页 |
| 2.2 材料及试剂 | 第23-25页 |
| 2.3 实验流程 | 第25-34页 |
| 2.3.1 提取 RNA | 第25-26页 |
| 2.3.2 合成鼠胚 1st-cDNA | 第26-27页 |
| 2.3.3 RT-PCR | 第27-28页 |
| 2.3.4 琼脂糖凝胶 DNA 回收 | 第28页 |
| 2.3.5 Rae-1基因与载体连接并转化 | 第28-29页 |
| 2.3.6 阳性重组子的鉴定 | 第29页 |
| 2.3.7 Overlap PCR | 第29-32页 |
| 2.3.8 双酶切和表达载体连接 | 第32-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-39页 |
| 2.5 本章结论 | 第39-40页 |
| 第3章 ICR 小鼠中 RAE-1 亚型的表达 | 第40-44页 |
| 3.1 序言 | 第40-41页 |
| 3.1.1 引物的设计原则 | 第40-41页 |
| 3.1.2 ICR 型小鼠 | 第41页 |
| 3.2 材料与试剂 | 第41页 |
| 3.3 实验方法 | 第41-43页 |
| 3.3.1 序列比对 | 第41-43页 |
| 3.3.2 测序 | 第43页 |
| 3.4 结果和讨论 | 第43页 |
| 3.5 本章结论 | 第43-44页 |
| 第4章 MHC-Ⅰ类似分子和 NKG2D 在 ICR 鼠及细胞系的表达情况 | 第44-54页 |
| 4.1 序言 | 第44页 |
| 4.2 实验材料 | 第44-46页 |
| 4.2.1 材料 | 第44-45页 |
| 4.2.2 试剂 | 第45页 |
| 4.2.3 器材 | 第45页 |
| 4.2.4 培养基配制 | 第45-46页 |
| 4.3 实验方法 | 第46-49页 |
| 4.3.1 小鼠的饲养与繁殖 | 第46-47页 |
| 4.3.2 细胞培养 | 第47-48页 |
| 4.3.4 成年鼠的灌流取脑 | 第48页 |
| 4.3.5 胚鼠脑 RNA提取及组织包埋 | 第48-49页 |
| 4.3.6 T-A克隆与测序 | 第49页 |
| 4.4 结果和讨论 | 第49-53页 |
| 4.4.1 Rae-1在胚胎鼠脑，成年鼠脑及细胞系中的表达情况 | 第50页 |
| 4.4.2 Mult1在胚胎鼠脑，成年鼠脑及细胞系中的表达情况 | 第50-51页 |
| 4.4.3 H60在胚胎鼠脑，成年鼠脑及细胞系中的表达情况 | 第51-52页 |
| 4.4.4 NKG2D | 第52-53页 |
| 4.5 本章结论 | 第53-54页 |
| 第5章 RAE-1 在胚鼠脑中的表达变化 | 第54-62页 |
| 5.1 实时荧光定量 PCR原理 | 第54-57页 |
| 5.1.1 常用的荧光定量 PCR技术 | 第54-56页 |
| 5.1.2 实时定量 PCR的相对定量方法 | 第56-57页 |
| 5.2 实验材料 | 第57页 |
| 5.3 实验方法 | 第57-59页 |
| 5.3.1 提取组织 RNA | 第57-58页 |
| 5.3.2 合成 1st-cDNA | 第58页 |
| 5.3.3 实时荧光相对定量 PCR（qPCR） | 第58-59页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第59-61页 |
| 5.4.1 qPCR引物检测 | 第59-60页 |
| 5.4.2 结果分析 | 第60-61页 |
| 5.5 本章结论 | 第61-62页 |
| 第6章 原位分子杂交方法检测 RAE-1 在胚胎中的表达位置 | 第62-70页 |
| 6.1 序言 | 第62-63页 |
| 6.1.1 原位分子杂交原理 | 第62页 |
| 6.1.2 RNA探针的原理和特点 | 第62-63页 |
| 6.2 材料与试剂 | 第63-64页 |
| 6.3 实验方法 | 第64-67页 |
| 6.3.1 制作 RNA探针 | 第64-65页 |
| 6.3.2 制作冰冻切片 | 第65-66页 |
| 6.3.3 杂交 | 第66-67页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第67-70页 |
| 第7章 RAE-1 在神经细胞中的表达位置 | 第70-74页 |
| 7.1 序言 | 第70-72页 |
| 7.1.1 免疫荧光原理 | 第70-71页 |
| 7.1.2 细胞转染 | 第71页 |
| 7.1.3 N-2a 细胞的诱导分化 | 第71-72页 |
| 7.2 实验材料 | 第72页 |
| 7.3 试验方法 | 第72页 |
| 7.3.1 细胞转染 | 第72页 |
| 7.3.2 G418筛选 | 第72页 |
| 7.4 结果与讨论 | 第72-74页 |
| 第8章 结论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-84页 |
| 作者简介 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
