| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第8-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-43页 |
| 1.1 DNA双链断裂损伤 | 第11页 |
| 1.2 DNA双链断裂修复途径 | 第11-20页 |
| 1.2.1 同源重组 | 第12-17页 |
| 1.2.2 微同源末端连接 | 第17-19页 |
| 1.2.3 非同源末端连接 | 第19-20页 |
| 1.3 DNA末端剪切 | 第20-26页 |
| 1.3.1 DNA末端剪切调控的时序性 | 第21页 |
| 1.3.2 起始剪切和长距离剪切协同作用 | 第21-23页 |
| 1.3.3 MRX-Sae2介导起始末端剪切 | 第23页 |
| 1.3.4 Sgs1-Dna2与Exo1介导长距离末端剪切 | 第23-26页 |
| 1.4 S期内检查点 | 第26-38页 |
| 1.4.1 酿酒酵母损伤检查点简介 | 第26-27页 |
| 1.4.2 S期内的检查点 | 第27-38页 |
| 1.5 Mrc1研究进展 | 第38-42页 |
| 1.5.1 Mrc1结构 | 第38页 |
| 1.5.2 Mrc1功能及其互作蛋白 | 第38-42页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第42-43页 |
| 第2章 材料与方法 | 第43-69页 |
| 2.1 实验材料 | 第43-46页 |
| 2.1.1 实验用菌株和引物 | 第43-44页 |
| 2.1.2 培养基与溶液 | 第44-46页 |
| 2.1.3 实验用仪器与试剂 | 第46页 |
| 2.2 实验方法 | 第46-69页 |
| 2.2.1 基因敲除与融合蛋白的构建 | 第46-48页 |
| 2.2.2 酵母转化 | 第48-50页 |
| 2.2.3 酵母基因组提取 | 第50-51页 |
| 2.2.4 菌落PCR | 第51-52页 |
| 2.2.5 Western Blot | 第52-55页 |
| 2.2.6 DSB末端剪切速度检测(Southern blot) | 第55-60页 |
| 2.2.7 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第60-69页 |
| 第3章 结果与分析 | 第69-92页 |
| 3.1 复制压力抑制DNA双链断裂末端剪切 | 第69-75页 |
| 3.1.1 DNA末端剪切研究系统 | 第69-70页 |
| 3.1.2 复制压力抑制DNA双链断裂末端剪切的起始与延伸 | 第70-71页 |
| 3.1.3 复制压力抑制Sgs1-Dna2和Exo1两条冗余剪切途径 | 第71-74页 |
| 3.1.4 复制压力抑制了DSB末端剪切相关酶的招募 | 第74-75页 |
| 3.2 复制压力引起的DNA双链断裂末端剪切抑制由Mrc1介导 | 第75-79页 |
| 3.2.1 敲除MRC1部分回复复制压力下DSB末端剪切缺陷 | 第76-77页 |
| 3.2.2 敲除MRC1部分回复复制压力下剪切酶的招募 | 第77-79页 |
| 3.3 敲除RAD9和DOT1不影响复制压力下DSB末端剪切 | 第79-81页 |
| 3.4 S期检查点对DSB末端剪切具有双重调节作用 | 第81-87页 |
| 3.4.1 HU介导的DRC的维持对于抑制末端剪切是必须的 | 第81-83页 |
| 3.4.2 激酶Mec1和Rad53促进DSB末端剪切速度维持 | 第83-85页 |
| 3.4.3 检查点通路效应蛋白Chk1抑制复制压力下DSB末端剪切 | 第85-87页 |
| 3.5 复制压力下Mrc1对同源重组是必须的却抑制同源重组蛋白募集 | 第87-92页 |
| 3.5.1 复制压力下Mrc1对于同源重组是必须的 | 第87-90页 |
| 3.5.2 缺失MRC1不影响RFA1与Rad51的表达量 | 第90页 |
| 3.5.3 Mrc1介导复制压力抑制同源重组因子的招募 | 第90-92页 |
| 第4章 总结与讨论 | 第92-99页 |
| 4.1 复制压力抑制DNA双链断裂末端剪切 | 第92-93页 |
| 4.2 复制压力引起的DNA双链断裂末端剪切抑制由Mrc1介导 | 第93-94页 |
| 4.3 敲除RAD9和DOT1不影响复制压力下DSB末端剪切 | 第94-95页 |
| 4.4 S期检查点对DSB末端剪切具有双重调节作用 | 第95-96页 |
| 4.5 复制压力下Mrc1对同源重组是必须的却抑制同源重组蛋白募集 | 第96-97页 |
| 4.6 Mrc1抑制复制压力下同源重组修复机制探讨 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-111页 |
| 附录一 | 第111-112页 |
| 附录二 | 第112-114页 |
| 附录三 | 第114-116页 |
| 附录四 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
