摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
第一章 文献综述 | 第10-32页 |
1.1 肿瘤及肿瘤标志物 | 第11-16页 |
1.1.1 肿瘤 | 第11页 |
1.1.2 肿瘤的治疗方法 | 第11页 |
1.1.3 肿瘤标志物 | 第11-12页 |
1.1.4 常用的癌症标志物测定要求 | 第12-13页 |
1.1.5 常用的癌症标记物分类 | 第13-16页 |
1.1.5.1 癌症蛋白质生物标记物 | 第13页 |
1.1.5.2 癌症相关的酶失调 | 第13-14页 |
1.1.5.3 基于核酸的生物标记物 | 第14页 |
1.1.5.4 细胞代谢的小型化学产品 | 第14-15页 |
1.1.5.5 直接分析癌细胞 | 第15-16页 |
1.2 端粒酶 | 第16-24页 |
1.2.1 端粒酶简介 | 第16页 |
1.2.2 端粒酶检测进展 | 第16-24页 |
1.2.2.1 体外端粒酶定量检测 | 第16-21页 |
1.2.2.2 体内端粒酶成像检测 | 第21-24页 |
1.3 miRNA | 第24-27页 |
1.3.1 miRNA简介 | 第24-25页 |
1.3.2 miRNA检测方法进展 | 第25-27页 |
1.3.2.1 miRNA体外检测 | 第25-26页 |
1.3.2.2 miRNA成像检测 | 第26-27页 |
1.4 循环放大方法 | 第27-31页 |
1.4.1 杂交链式反应 | 第27-28页 |
1.4.2 等温链置换反应 | 第28-29页 |
1.4.3 滚环扩增 | 第29页 |
1.4.4 酶辅助信号放大反应 | 第29-30页 |
1.4.5 催化发夹反应 | 第30-31页 |
1.5 本工作的意义及研究内容 | 第31-32页 |
第二章 双重循环放大SERS检测miRNA | 第32-45页 |
2.1 引言 | 第32-33页 |
2.2 实验部分 | 第33-36页 |
2.2.1 试剂 | 第33-34页 |
2.2.2 仪器 | 第34页 |
2.2.3 金纳米粒子的制备 | 第34-35页 |
2.2.4 磁珠(MB)的活化 | 第35页 |
2.2.5 金纳米粒子功能化磁珠(MB-AuNPs)的合成 | 第35页 |
2.2.6 发卡DNA(H1)在MB-AuNPs上的固定 | 第35页 |
2.2.7 拉曼探针的制备 | 第35-36页 |
2.2.8 miRNA信号放大反应 | 第36页 |
2.2.9 SERS检测 | 第36页 |
2.3 结果与讨论 | 第36-43页 |
2.3.1 实验原理 | 第36-37页 |
2.3.2 金纳米粒子的表征 | 第37-38页 |
2.3.3 拉曼探针的紫外-可见光谱表征 | 第38-39页 |
2.3.4 实验可行性研究 | 第39页 |
2.3.5 聚合酶和剪切酶浓度的优化 | 第39-40页 |
2.3.6 反应温度的优化 | 第40-41页 |
2.3.7 酶辅助扩增反应时间的优化 | 第41页 |
2.3.8 miRNA的SERS检测 | 第41-42页 |
2.3.9 miRNAlet-7a检测方法特异性的探究 | 第42-43页 |
2.3.10 实际样品中miRNA的检测 | 第43页 |
2.4 小结 | 第43-45页 |
第三章 熵驱动双重循环放大SERS检测端粒酶活性 | 第45-56页 |
3.1 引言 | 第45-46页 |
3.2 实验部分 | 第46-49页 |
3.2.1 试剂 | 第46页 |
3.2.2 仪器 | 第46-47页 |
3.2.3 金纳米粒子的制备 | 第47页 |
3.2.4 细胞培养 | 第47页 |
3.2.5 细胞内端粒酶的提取 | 第47-48页 |
3.2.6 拉曼探针的制备 | 第48页 |
3.2.7 端粒延伸反应 | 第48页 |
3.2.8 循环放大反应 | 第48页 |
3.2.9 SERS检测 | 第48-49页 |
3.3 结果与讨论 | 第49-55页 |
3.3.1 实验原理 | 第49-50页 |
3.3.2 金纳米粒子的表征 | 第50页 |
3.3.3 实验可行性研究 | 第50-51页 |
3.3.4 端粒酶反应温度的优化 | 第51-52页 |
3.3.5 端粒酶反应时间的优化 | 第52页 |
3.3.6 端粒酶前体浓度的优化 | 第52-53页 |
3.3.7 端粒酶的SERS检测 | 第53-54页 |
3.3.8 细胞内端粒酶的检测 | 第54-55页 |
3.4 小结 | 第55-56页 |
第四章 基于三螺旋均相荧光检测端粒酶活性 | 第56-64页 |
4.1 引言 | 第56-57页 |
4.2 实验部分 | 第57-58页 |
4.2.1 试剂 | 第57页 |
4.2.2 仪器 | 第57页 |
4.2.3 金纳米粒子的制备 | 第57-58页 |
4.2.4 AuNPs-三螺旋探针的制备 | 第58页 |
4.2.5 循环放大反应 | 第58页 |
4.2.6 荧光检测 | 第58页 |
4.3 结果与讨论 | 第58-63页 |
4.3.1 实验原理 | 第58-59页 |
4.3.2 实验可行性探究 | 第59-60页 |
4.3.3 实验pH的优化 | 第60-61页 |
4.3.4 端粒酶反应时间的优化 | 第61-62页 |
4.3.5 金纳米粒子用量的优化 | 第62页 |
4.3.6 端粒酶的荧光检测 | 第62-63页 |
4.4 小结 | 第63-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第80-81页 |