| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 一、引言 | 第12-22页 |
| 1.1 LIM蛋白的发现及其结构特征 | 第12-13页 |
| 1.2 动物LIM蛋白分类及其功能研究 | 第13-18页 |
| 1.2.1 LIM同源结构域蛋白(LIM-HD) | 第14-15页 |
| 1.2.2 LIM-only(LMO)蛋白 | 第15-16页 |
| 1.2.3 LIM激酶蛋白(LIMK) | 第16-17页 |
| 1.2.4 其他LIM蛋白 | 第17-18页 |
| 1.3 植物LIM蛋白分类及其功能研究 | 第18页 |
| 1.4 植物中肌动蛋白成束蛋白的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.4.1 肌动蛋白成束蛋白在植物细胞中的分布情况 | 第19页 |
| 1.4.2 肌动蛋白成束蛋白在细胞中的功能研究 | 第19-20页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第20-22页 |
| 二、材料与方法 | 第22-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌种和载体质粒 | 第22页 |
| 2.1.3 所用工具酶和各种试剂盒 | 第22页 |
| 2.1.4 培养基及相关试剂 | 第22-25页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 裂殖酵母的形态观察 | 第25-26页 |
| 2.2.2 棉花愈伤细胞GFP荧光的观察 | 第26页 |
| 2.2.3 蛋白的原核表达、纯化及高速低速共沉淀 | 第26-29页 |
| 2.2.4 烟草转化 | 第29-30页 |
| 2.2.5 CTAB法小量提取棉花gDNA | 第30页 |
| 2.2.6 CTAB-PVP法提取棉花纤维RNA | 第30页 |
| 2.2.7 Trizol Reagent RNA法提取烟草RHA | 第30-31页 |
| 三、实验结果 | 第31-49页 |
| 3.1 GhPLIM1与GhPLIM2基因及其编码蛋白的结构分析 | 第31-33页 |
| 3.1.1 GhPLIM1和GhPLIM2蛋白的疏水性分析 | 第31-32页 |
| 3.1.2 GhPLIM1/2蛋白与其他棉花LIM蛋白的进化关系分析 | 第32-33页 |
| 3.2 GhPLIM1和GhPLIM2蛋白亚细胞定位 | 第33-35页 |
| 3.3 GhPLIMl和GhPLIM2的转基因裂殖酵母形态观察 | 第35-37页 |
| 3.3.1 pREP-5N-GhPLIM1/2表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.3.2 转基因裂殖酵母的表型无明显变化 | 第36-37页 |
| 3.4 GhPLIMl和GhPLIM2蛋白相关生化试验 | 第37-43页 |
| 3.4.1 GhPLIM1蛋白与GhPLIM2蛋白原核表达载体的构建 | 第37页 |
| 3.4.2 GhPLIM1蛋白的原核表达 | 第37-38页 |
| 3.4.3 GhPLIM1蛋白的大量纯化 | 第38页 |
| 3.4.4 诱导表达GhPLIM2蛋白 | 第38-40页 |
| 3.4.5 GhPLIM2蛋白的纯化浓缩 | 第40页 |
| 3.4.6 GhPLIM1与GhPLIM2蛋白均可以体外结合F-actin | 第40-41页 |
| 3.4.7 GhPLIM1和GhPLIM1蛋白能促进肌动蛋白丝成束 | 第41-42页 |
| 3.4.8 GhPLIM1能稳定F-actin的解聚 | 第42-43页 |
| 3.5 GhPLIM2转基因烟草初步分析 | 第43-45页 |
| 3.6 GhWLIM5转基因棉花初步分析 | 第45-49页 |
| 3.6.1 T0代转基因棉花的鉴定 | 第45-47页 |
| 3.6.2 pBI-pTua9-GhWLIM5 RNAi转基因棉花T0代表型初步分析 | 第47-48页 |
| 3.6.3 T1代pBI-pTua9-GhWLIM5 RNAi转基因棉花的鉴定 | 第48-49页 |
| 四、讨论 | 第49-52页 |
| 4.1 GhPLIM1/2的蛋白结构分析 | 第49-50页 |
| 4.2 GhPLIM1/2可能调控花粉管的生长发育过程 | 第50-51页 |
| 4.3 GhPLIM1/2的亚细胞定位分析 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 硕士期间参与发表论文 | 第58-59页 |
| 附录 本文缩写符号 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
