摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-30页 |
1.1 哺乳动物体细胞重编程的研究进展 | 第11-13页 |
1.2 表观遗传 | 第13-14页 |
1.2.1 表观遗传修饰分类 | 第13页 |
1.2.2 表观遗传在进化中的作用 | 第13-14页 |
1.3 DNA甲基化与去甲基化 | 第14-30页 |
1.3.1 DNA甲基化在生物中分布 | 第14-15页 |
1.3.2 哺乳动物DNA甲基化功能研究 | 第15-17页 |
1.3.3 DNA去甲基化(DNA demethylation) | 第17-20页 |
1.3.4 5 mC、5hmC等修饰碱基的功能研究 | 第20-21页 |
1.3.5 5 mC、5hmC等修饰碱基的检测方法发展 | 第21-28页 |
1.3.6 RNA修饰 | 第28-30页 |
第二章 山羊早期胚胎中5hmC动态分析 | 第30-51页 |
2.1 实验材料 | 第30-32页 |
2.1.1 仪器设备 | 第30-31页 |
2.1.2 主要试剂及配制 | 第31-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-39页 |
2.2.1 所配制KRuO_4品质和氧化准确性验证 | 第32-33页 |
2.2.2 BS-Seq和oxBS-Seq | 第33-34页 |
2.2.3 合成双链DNA(dsDNA)双氧化 | 第34页 |
2.2.4 胚胎的免疫荧光染色与荧光强度分析 | 第34-35页 |
2.2.5 山羊胎儿成纤维细胞(GFFs)的分离与培养 | 第35页 |
2.2.6 SCNT | 第35-36页 |
2.2.7 卵母细胞收集和体外成熟(IVM) | 第36页 |
2.2.8 体外受精(IVF) | 第36页 |
2.2.9 RNA提取、反转录PCR和实时定量PCR(RT-qPCR) | 第36-37页 |
2.2.10 特定位点5hmC丰度分析 | 第37-39页 |
2.2.11 数据分析 | 第39页 |
2.3 结果 | 第39-49页 |
2.3.1 所配制KRuO_4品质和氧化选择性及准确性分析 | 第39-41页 |
2.3.2 山羊早期胚胎的免疫荧光染色与荧光强度分析 | 第41-43页 |
2.3.3 特定位点5mC和5hmC测定 | 第43-48页 |
2.3.4 各时期胚胎特定基因定量 | 第48-49页 |
2.4 讨论 | 第49-51页 |
第三章 全文结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |