縮略词表 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第1章 文献综述 | 第12-23页 |
1.1 细菌对噬菌体的耐受机制 | 第12-18页 |
1.1.1 吸附抑制 | 第12-13页 |
1.1.2 DNA注入抑制 | 第13-14页 |
1.1.3 限制修饰系统 | 第14页 |
1.1.4 CRISPR耐受机制 | 第14-16页 |
1.1.5 流产感染机制 | 第16-18页 |
1.2 分枝杆菌主要协助转运蛋白超(MFS)家族研究进展 | 第18-23页 |
1.2.1 MFS的类型和结构特征 | 第18-19页 |
1.2.2 MFS家族蛋白在分枝杆菌中的功能和分布 | 第19-21页 |
1.2.3 MFS编码基因的表达调节 | 第21-22页 |
1.2.4 研究分枝杆菌MFS的意义 | 第22-23页 |
第2章 前言 | 第23-24页 |
第3章 实验材料和方法 | 第24-33页 |
3.1 实验材料 | 第24-26页 |
3.1.1 实验菌株、质粒和引物 | 第24-25页 |
3.1.2 培养基和主要试剂 | 第25-26页 |
3.1.3 主要仪器 | 第26页 |
3.2 实验方法 | 第26-33页 |
3.2.1 TM4噬菌体筛选耻垢分枝杆菌转座子突变库 | 第26-27页 |
3.2.2 M12突变株对SWU1、L5、D29敏感性表型检测 | 第27页 |
3.2.3 M12突变株对SWU1、L5、D29成斑率(EOP)检测 | 第27页 |
3.2.4 SWU1基因组电转如M12和野生型耻垢分枝杆菌 | 第27-28页 |
3.2.5 透射电镜分析噬菌体吸附 | 第28页 |
3.2.6 野生耻垢分枝杆菌和M12单菌落形态比较 | 第28页 |
3.2.7 野生耻垢分枝杆菌和M12细胞壁脂肪酸成份分析 | 第28-29页 |
3.2.8 热不对称交错PCR(TAIL-PCR)鉴定转座子插入位点 | 第29页 |
3.2.9 验证转座子插入位点 | 第29页 |
3.2.10 构建敲除菌株 | 第29-30页 |
3.2.11 敲除菌株对TM4、SWU1的敏感性检测 | 第30页 |
3.2.12 回补MSMEG_3705基因突变 | 第30页 |
3.2.13 生长曲线测定 | 第30页 |
3.2.14 抗生素及其金属离子MIC测定 | 第30页 |
3.2.15 EB外排实验分析 | 第30-31页 |
3.2.16 总RNA提取和RT-PCR | 第31页 |
3.2.17 耻垢分枝杆菌、M12突变株基因组的提取 | 第31-32页 |
3.2.18 噬菌体TM4/SWU1基因组提取 | 第32页 |
3.2.19 生物信息学分析 | 第32-33页 |
第4章 结果与分析 | 第33-45页 |
4.1 M12转座子突变株对TM4、SWU1噬菌体耐受 | 第33-34页 |
4.2 成斑率(EOP)检测结果表明M12转座子突变株对TM4、SWU1耐受对D29、L5敏感 | 第34页 |
4.3 M12突变株对SWU1的耐受发生在噬菌体吸附或者DNA注入阶段 | 第34-35页 |
4.4 M12转座子插入突变菌株影响分枝杆菌噬菌体SWU1的吸附 | 第35-36页 |
4.5 M12转座子突变株与野生型耻垢分枝杆菌单菌落表型差异较大 | 第36页 |
4.6 M12细胞壁脂肪酸成份与野生耻垢分枝杆菌相比差异明显 | 第36-37页 |
4.7 TN5转座子插入耻垢分枝杆菌基因组MSMEG 3705基因中 | 第37-38页 |
4.8 MSMEG_3705敲除菌株对SWU1噬菌体敏感 | 第38-40页 |
4.9 MSMEG_3705生物信息学分析结果 | 第40-41页 |
4.10 耻垢分枝杆菌MSMEG_3705基因参与宿主对抗生素的外排 | 第41-42页 |
4.11 耻垢分枝杆菌MSMEG_3705基因在外排EB的中发挥着重要作用 | 第42-43页 |
4.12 MSMEG_3705基因缺失影响耻垢分枝杆菌生长速率 | 第43-45页 |
第5章 结论与展望 | 第45-48页 |
5.1 实验结论 | 第45-46页 |
5.2 实验讨论 | 第46-47页 |
5.3 实验展望 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
致谢 | 第53-55页 |
在学期间完成的文章 | 第55页 |