中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1.1 谷胱甘肽简介 | 第11-18页 |
1.1.1 谷胱甘肽的理化性质 | 第11-12页 |
1.1.2 GSH 的功能及应用 | 第12-14页 |
1.1.3 谷胱甘肽的合成 | 第14-16页 |
1.1.4 谷胱甘肽的研究进展 | 第16-18页 |
1.2 氧化胁迫 | 第18-20页 |
1.2.1 氧化胁迫的产生 | 第18-19页 |
1.2.2 微生物对氧化胁迫的抵抗机制 | 第19-20页 |
1.3 本项研究的意义及主要内容 | 第20-22页 |
第二章 酿酒酵母突变株 Y518 的生理特性研究 | 第22-31页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 材料 | 第22-23页 |
2.2.1 菌株与培养基 | 第22-23页 |
2.2.2 主要试剂及溶液 | 第23页 |
2.2.3 主要仪器设备 | 第23页 |
2.3 分析方法 | 第23-25页 |
2.3.1 菌种培养 | 第23-24页 |
2.3.2 菌落形态比较 | 第24页 |
2.3.3 细胞浓度测定 | 第24页 |
2.3.4 葡萄糖含量测定 | 第24页 |
2.3.5 发酵液 pH 测定 | 第24页 |
2.3.6 GSH 含量测定 | 第24页 |
2.3.7 菌体蛋白含量测定 | 第24页 |
2.3.8 乙醇和甘油产量测定 | 第24页 |
2.3.9 呼吸缺陷检测 | 第24-25页 |
2.4 结果 | 第25-29页 |
2.4.1 菌落形态的比较 | 第25页 |
2.4.2 生长情况和 GSH 含量比较 | 第25-26页 |
2.4.3 葡萄糖消耗及发酵液 pH 的变化 | 第26-27页 |
2.4.4 菌体蛋白含量比较 | 第27-28页 |
2.4.5 乙醇和甘油产量分析 | 第28页 |
2.4.6 呼吸缺陷型检测 | 第28-29页 |
2.5 小结与讨论 | 第29-31页 |
第三章 高产 GSH 的酿酒酵母突变株 Y518 的能量代谢研究 | 第31-42页 |
3.1 前言 | 第31页 |
3.2 材料 | 第31-32页 |
3.2.1 菌株和培养基 | 第31页 |
3.2.2 主要试剂 | 第31页 |
3.2.3 主要仪器设备 | 第31-32页 |
3.3 分析方法 | 第32-33页 |
3.3.1 培养 | 第32页 |
3.3.2 酸化速率测定 | 第32页 |
3.3.3 ATP 含量测定 | 第32-33页 |
3.3.4 H~+-ATPase 活力测定 | 第33页 |
3.3.5 丙酮酸激酶(PK)、己糖激酶(HK)和 6-磷酸果糖激酶(FPK)活性测定 | 第33页 |
3.3.6 胞内 NADPH 和 NADP~+含量测定 | 第33页 |
3.3.7 胞内有机酸含量测定 | 第33页 |
3.4 实验结果 | 第33-39页 |
3.4.1 酸化速率的测定结果 | 第33-34页 |
3.4.2 胞内 ATP 水平和 H~+-ATPase 活力的比较结果 | 第34-35页 |
3.4.3 糖酵解途径检测结果 | 第35-37页 |
3.4.4 TCA(三羧酸)循环的测定结果 | 第37页 |
3.4.5 有机酸产物的含量分析 | 第37-38页 |
3.4.6 NADPH 含量的测定结果 | 第38-39页 |
3.5 小结与讨论 | 第39-42页 |
第四章 酿酒酵母突变株 Y518 抗氧化基因表达分析 | 第42-52页 |
4.1 引言 | 第42-43页 |
4.2 材料 | 第43页 |
4.2.1 菌株 | 第43页 |
4.2.2 试剂 | 第43页 |
4.2.3 主要仪器设备 | 第43页 |
4.2.4 培养基 | 第43页 |
4.3 实验方法 | 第43-46页 |
4.3.1 培养方法 | 第43页 |
4.3.2 酵母细胞的裂解 | 第43-44页 |
4.3.3 总 RNA 的提取 | 第44页 |
4.3.4 RNA 质量检测 | 第44页 |
4.3.5 cDNA 的反转录 | 第44-45页 |
4.3.6 qPCR 测定 | 第45-46页 |
4.4 实验结果 | 第46-50页 |
4.4.1 酵母提取总 RNA 及 cDNA 的浓度和纯度检测 | 第46页 |
4.4.2 GSH 防御体系基因表达情况 | 第46-47页 |
4.4.3 Trx 和 TPx 的表达 | 第47-48页 |
4.4.4 CTT1 的表达 | 第48-49页 |
4.4.5 蛋白氧化修复基因的表达分析 | 第49页 |
4.4.6 调节因子 Yap1p 和 Skn7p 的表达 | 第49-50页 |
4.5 小结与讨论 | 第50-52页 |
总结与展望 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |