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高产GSH酿酒酵母突变株Y518的生理代谢研究

中文摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 文献综述第11-22页
    1.1 谷胱甘肽简介第11-18页
        1.1.1 谷胱甘肽的理化性质第11-12页
        1.1.2 GSH 的功能及应用第12-14页
        1.1.3 谷胱甘肽的合成第14-16页
        1.1.4 谷胱甘肽的研究进展第16-18页
    1.2 氧化胁迫第18-20页
        1.2.1 氧化胁迫的产生第18-19页
        1.2.2 微生物对氧化胁迫的抵抗机制第19-20页
    1.3 本项研究的意义及主要内容第20-22页
第二章 酿酒酵母突变株 Y518 的生理特性研究第22-31页
    2.1 引言第22页
    2.2 材料第22-23页
        2.2.1 菌株与培养基第22-23页
        2.2.2 主要试剂及溶液第23页
        2.2.3 主要仪器设备第23页
    2.3 分析方法第23-25页
        2.3.1 菌种培养第23-24页
        2.3.2 菌落形态比较第24页
        2.3.3 细胞浓度测定第24页
        2.3.4 葡萄糖含量测定第24页
        2.3.5 发酵液 pH 测定第24页
        2.3.6 GSH 含量测定第24页
        2.3.7 菌体蛋白含量测定第24页
        2.3.8 乙醇和甘油产量测定第24页
        2.3.9 呼吸缺陷检测第24-25页
    2.4 结果第25-29页
        2.4.1 菌落形态的比较第25页
        2.4.2 生长情况和 GSH 含量比较第25-26页
        2.4.3 葡萄糖消耗及发酵液 pH 的变化第26-27页
        2.4.4 菌体蛋白含量比较第27-28页
        2.4.5 乙醇和甘油产量分析第28页
        2.4.6 呼吸缺陷型检测第28-29页
    2.5 小结与讨论第29-31页
第三章 高产 GSH 的酿酒酵母突变株 Y518 的能量代谢研究第31-42页
    3.1 前言第31页
    3.2 材料第31-32页
        3.2.1 菌株和培养基第31页
        3.2.2 主要试剂第31页
        3.2.3 主要仪器设备第31-32页
    3.3 分析方法第32-33页
        3.3.1 培养第32页
        3.3.2 酸化速率测定第32页
        3.3.3 ATP 含量测定第32-33页
        3.3.4 H~+-ATPase 活力测定第33页
        3.3.5 丙酮酸激酶(PK)、己糖激酶(HK)和 6-磷酸果糖激酶(FPK)活性测定第33页
        3.3.6 胞内 NADPH 和 NADP~+含量测定第33页
        3.3.7 胞内有机酸含量测定第33页
    3.4 实验结果第33-39页
        3.4.1 酸化速率的测定结果第33-34页
        3.4.2 胞内 ATP 水平和 H~+-ATPase 活力的比较结果第34-35页
        3.4.3 糖酵解途径检测结果第35-37页
        3.4.4 TCA(三羧酸)循环的测定结果第37页
        3.4.5 有机酸产物的含量分析第37-38页
        3.4.6 NADPH 含量的测定结果第38-39页
    3.5 小结与讨论第39-42页
第四章 酿酒酵母突变株 Y518 抗氧化基因表达分析第42-52页
    4.1 引言第42-43页
    4.2 材料第43页
        4.2.1 菌株第43页
        4.2.2 试剂第43页
        4.2.3 主要仪器设备第43页
        4.2.4 培养基第43页
    4.3 实验方法第43-46页
        4.3.1 培养方法第43页
        4.3.2 酵母细胞的裂解第43-44页
        4.3.3 总 RNA 的提取第44页
        4.3.4 RNA 质量检测第44页
        4.3.5 cDNA 的反转录第44-45页
        4.3.6 qPCR 测定第45-46页
    4.4 实验结果第46-50页
        4.4.1 酵母提取总 RNA 及 cDNA 的浓度和纯度检测第46页
        4.4.2 GSH 防御体系基因表达情况第46-47页
        4.4.3 Trx 和 TPx 的表达第47-48页
        4.4.4 CTT1 的表达第48-49页
        4.4.5 蛋白氧化修复基因的表达分析第49页
        4.4.6 调节因子 Yap1p 和 Skn7p 的表达第49-50页
    4.5 小结与讨论第50-52页
总结与展望第52-54页
参考文献第54-62页
攻读硕士学位期间取得的学术成果第62-63页
致谢第63-64页

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