| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-34页 |
| 1.1 侧孢短芽孢杆菌的应用研究进展 | 第13-24页 |
| 1.1.1 独木舟状的伴孢体(CSPB)和其它的伴孢体(PBs) | 第14-15页 |
| 1.1.2 对无脊椎动物的致病性 | 第15-19页 |
| 1.1.2.1 对昆虫的致病性 | 第15-18页 |
| 1.1.2.2 对线虫的致病性 | 第18-19页 |
| 1.1.2.3 对软体动物的致病性 | 第19页 |
| 1.1.3 抗菌特性 | 第19-21页 |
| 1.1.4 侧孢短芽孢杆菌的其它功能和应用 | 第21-22页 |
| 1.1.5 侧孢短芽孢杆菌的应用现状与存在的问题 | 第22-24页 |
| 1.1.6 侧孢短芽孢杆菌应用展望 | 第24页 |
| 1.2 微生物发酵的影响因素 | 第24-28页 |
| 1.2.1 培养基组成对发酵的影响 | 第25-27页 |
| 1.2.1.1 碳源对发酵的影响 | 第25页 |
| 1.2.1.2 氮源对发酵的影响 | 第25-26页 |
| 1.2.1.3 能源对发酵的影响 | 第26页 |
| 1.2.1.4 生长因子对发酵的影响 | 第26-27页 |
| 1.2.1.5 矿质元素对发酵的影响 | 第27页 |
| 1.2.2 发酵条件对发酵的影响 | 第27-28页 |
| 1.2.2.1 温度对发酵的影响 | 第27页 |
| 1.2.2.2 初始pH对发酵的影响 | 第27-28页 |
| 1.2.2.3 氧气对发酵的影响 | 第28页 |
| 1.3 微生物发酵的优化方法 | 第28-30页 |
| 1.3.1 多因素中重要因子的筛选方法-Plackett-Burman设计法 | 第29页 |
| 1.3.2 显著因素最佳水平的确定-响应面分析法(RSM) | 第29-30页 |
| 1.4 PCR检测技术的应用 | 第30-32页 |
| 1.4.1 常规PCR技术 | 第30页 |
| 1.4.2 荧光定量PCR技术 | 第30-32页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第32-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 菌种 | 第34页 |
| 2.1.2 培养基 | 第34-35页 |
| 2.2 主要仪器与设备 | 第35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-45页 |
| 2.3.1 侧孢短芽孢杆菌AMCC 100017的分离 | 第35-36页 |
| 2.3.1.1 分离方法 | 第35页 |
| 2.3.1.2 拮抗菌的筛选 | 第35-36页 |
| 2.3.2 侧孢短芽孢杆菌AMCC 100017的鉴定 | 第36页 |
| 2.3.2.1 形态学鉴定 | 第36页 |
| 2.3.2.2 生理生化鉴定 | 第36页 |
| 2.3.2.3 16SrDNA序列测定和比对分析 | 第36页 |
| 2.3.2.4 生长曲线的测定 | 第36页 |
| 2.3.3 侧孢短芽孢杆菌AMCC 100017抗菌谱的测定 | 第36-37页 |
| 2.3.4 侧孢短芽孢杆菌AMCC 100017发酵液酶活力测定 | 第37-39页 |
| 2.3.4.1 蛋白酶活力的测定-福林酚法 | 第37页 |
| 2.3.4.2 果胶酶活力测定-DNS法 | 第37-39页 |
| 2.3.4.3 纤维素酶活力测定-分光光度法 | 第39页 |
| 2.3.5 PCR技术检测侧孢短芽孢杆菌的初步研究 | 第39-40页 |
| 2.3.5.1 常规PCR方法检测 | 第39-40页 |
| 2.3.5.2 荧光定量PCR检测方法的建立 | 第40页 |
| 2.3.6 侧孢短芽孢杆菌AMCC 100017的发酵条件优化 | 第40-44页 |
| 2.3.6.1 单因素试验 | 第41-42页 |
| 2.3.6.2 Plackett-Burman(PB)试验 | 第42-43页 |
| 2.3.6.3 响应面试验(RSM) | 第43页 |
| 2.3.6.4 模型验证 | 第43-44页 |
| 2.3.7 侧孢短芽孢杆菌AMCC 100017发酵罐小试试验 | 第44-45页 |
| 2.3.7.1 5L发酵罐试验 | 第44页 |
| 2.3.7.2 20L发酵罐试验 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-68页 |
| 3.1 目的菌株的筛选 | 第45页 |
| 3.2 菌株AMCC100017的系统鉴定 | 第45-49页 |
| 3.2.1 形态学鉴定结果 | 第45-47页 |
| 3.2.2 生理生化鉴定结果 | 第47-48页 |
| 3.2.3 16SrDNA序列分析比对结果 | 第48-49页 |
| 3.2.4 生长曲线测定结果 | 第49页 |
| 3.3 抗菌谱测定 | 第49-51页 |
| 3.4 酶活力测定 | 第51-53页 |
| 3.4.1 蛋白酶活力 | 第51-52页 |
| 3.4.2 果胶酶活力 | 第52页 |
| 3.4.3 纤维素酶活力 | 第52-53页 |
| 3.5 PCR检测方法的建立 | 第53-55页 |
| 3.5.1 常规PCR方法的建立 | 第53页 |
| 3.5.2 荧光定量PCR方法的建立 | 第53-55页 |
| 3.5.2.1 标准曲线 | 第53-54页 |
| 3.5.2.2 融解曲线 | 第54-55页 |
| 3.6 AMCC100017的发酵条件优化 | 第55-66页 |
| 3.6.1 单因素试验 | 第55-59页 |
| 3.6.1.1 不同碳源和最佳碳源用量对AMCC100017发酵的影响 | 第55页 |
| 3.6.1.2 不同氮源和矿质元素对AMCC100017发酵的影响 | 第55-56页 |
| 3.6.1.3 温度和初始pH对AMCC100017发酵的影响 | 第56-57页 |
| 3.6.1.4 接种量和装液量对AMCC100017发酵的影响 | 第57-58页 |
| 3.6.1.5 发酵时间和接种菌体状态对AMCC100017发酵的影响 | 第58-59页 |
| 3.6.2 Plackett-Burman试验对显著因素的筛选 | 第59-61页 |
| 3.6.3 侧孢短芽孢杆菌AMCC100017的响应面法优化 | 第61-66页 |
| 3.6.3.1 Box-Behnken实验设计与结果 | 第61-62页 |
| 3.6.3.2 回归模型方差分析结果 | 第62-66页 |
| 3.6.4 验证实验 | 第66页 |
| 3.7 发酵罐小试试验结果 | 第66-68页 |
| 3.7.1 5L发酵罐小试实验结果 | 第66-67页 |
| 3.7.2 20L发酵罐小试实验结果 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-71页 |
| 5 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第84页 |
