| 中文摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-22页 |
| 1.1 苹果抗病研究进展 | 第14-15页 |
| 1.1.1 植物的免疫系统 | 第14页 |
| 1.1.2 植物的免疫反应 | 第14-15页 |
| 1.2 植物中的受体样蛋白激酶 | 第15-16页 |
| 1.2.1 受体样蛋白激酶的结构和功能 | 第15-16页 |
| 1.3 LRR型受体样蛋白激酶FLS | 第16-19页 |
| 1.3.1 FLS2基因的基本结构功能 | 第16-17页 |
| 1.3.2 FLS2参与抗病信号转导 | 第17-18页 |
| 1.3.3 FLS2表达的空间和空间上的差异性 | 第18-19页 |
| 1.3.4 FLS2的胞吞作用 | 第19页 |
| 1.4 BAK1与FLS2在植物免疫反应中的作用 | 第19-20页 |
| 1.4.1 (BRI1相关蛋白激酶1)BAK | 第19-20页 |
| 1.4.2 FLS2和BAK1的相互作用 | 第20页 |
| 1.5 研究的目的及意义 | 第20页 |
| 1.6 研究的主要内容 | 第20-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第22页 |
| 2.1.3 酶及生化试剂 | 第22页 |
| 2.1.4 培养基配方 | 第22-23页 |
| 2.1.5 溶液配制 | 第23-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-36页 |
| 2.2.1 植物总RNA提取 | 第24-25页 |
| 2.2.2 总RNA含量与纯度检测 | 第25-26页 |
| 2.2.3 反转录cDNA第一链的合成 | 第26页 |
| 2.2.4 菌落PCR反应 | 第26页 |
| 2.2.5 基因克隆PCR反应 | 第26-27页 |
| 2.2.6 PCR产物及质粒DNA切胶回收 | 第27-28页 |
| 2.2.7 转化PLB质粒 | 第28页 |
| 2.2.8 大肠杆菌感受态的转化 | 第28-29页 |
| 2.2.9 质粒DNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.10 PCR产物及质粒DNA酶切 | 第29-30页 |
| 2.2.11 连接反应体系 | 第30页 |
| 2.2.12 测序 | 第30-31页 |
| 2.2.13 农杆菌感受态的转化 | 第31页 |
| 2.2.14 种植拟南芥 | 第31-32页 |
| 2.2.15 转化拟南芥 | 第32页 |
| 2.2.16 WesternBlot | 第32-34页 |
| 2.2.17 His蛋白表达与纯化 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-49页 |
| 3.1 MdFLS2的基因的生物信息学分析 | 第36-39页 |
| 3.1.1 MdFLS2的蛋白质性质和进化树分析 | 第36-37页 |
| 3.1.2 MdFLS2的蛋白序列分析 | 第37-38页 |
| 3.1.3 MdFLS2启动子上游顺式作用元件分析 | 第38-39页 |
| 3.2 MdFLS2同源基因的克隆与载体构建 | 第39-43页 |
| 3.2.1 MdFLS2同源基因及基因片段的克隆 | 第39页 |
| 3.2.2 PCB302-FLS2-2HA表达载体的构建 | 第39-42页 |
| 3.2.3 MdFLS2激酶区域和MdBAK1激酶区域的载体构建 | 第42-43页 |
| 3.3 MdFLS2转基因拟南芥 | 第43-47页 |
| 3.3.1 获得稳定表达的MdFLS2转基因拟南芥 | 第43-45页 |
| 3.3.2 转基因MdFLS2抑制拟南芥生长 | 第45-46页 |
| 3.3.3 flg22处理抑制拟南芥根系生长 | 第46-47页 |
| 3.4 MdFLS2和MdBAK1激酶区域的原核表达 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 4.1 植物中重要的受体样蛋白激酶FLS | 第49页 |
| 4.2 苹果MdFLS2与MdBAK1互作蛋白预测 | 第49-50页 |
| 4.3 MdFLS2超表达影响植物的生长和发芽 | 第50-51页 |
| 4.4 MdFLS2蛋白功能预测 | 第51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
