| 摘要 | 第1页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 详细摘要 | 第10-15页 |
| 英文缩写表 | 第15-16页 |
| 研究背景 | 第16-20页 |
| 第一部分 异种脱细胞静脉瓣支架材料的安全性评价 | 第20-49页 |
| 前言 | 第20页 |
| 一、绵羊脱细胞静脉瓣支架材料的制备及检测 | 第20-24页 |
| (一) 材料和方法 | 第20-22页 |
| 1、试剂和设备 | 第20-21页 |
| 2、绵羊脱细胞静脉瓣支架材料的制备 | 第21页 |
| 3、绵羊脱细胞静脉瓣支架材料的检测 | 第21-22页 |
| (1) 大体观察 | 第21页 |
| (2) HE染色 | 第21页 |
| (3) 支架胶原纤维染色(Van Gieson V.G染色法) | 第21-22页 |
| (4) 免疫组织化学染色 | 第22页 |
| (5) 力学检测 | 第22页 |
| (二) 结果 | 第22-24页 |
| 1、形态结构的检测 | 第22-24页 |
| (1) 大体观察 | 第22-23页 |
| (2) HE染色 | 第23页 |
| (3) 胶原纤维染色 | 第23-24页 |
| (4) 免疫组织化学染色 | 第24页 |
| 2、力学特性的检测 | 第24页 |
| 二、种子细胞的分离、培养和鉴定 | 第24-36页 |
| (一) 材料和方法 | 第24-30页 |
| 1、试剂和仪器设备 | 第24-26页 |
| 2. EPC的分离、培养和鉴定 | 第26-28页 |
| (1) 兔EPC的分离、培养和鉴定 | 第26-27页 |
| ① 骨髓细胞的分离纯化 | 第26页 |
| ② 分选细胞的培养扩增 | 第26-27页 |
| ③ EPC生长曲线绘制 | 第27页 |
| ④ EPC表面标志的免疫组化检测 | 第27页 |
| (2) BALB/C小鼠EPC的分离、培养和鉴定 | 第27-28页 |
| ① BALB/C小鼠骨髓细胞的分离纯化 | 第27-28页 |
| ② 分选细胞的培养扩增 | 第28页 |
| ③ EPC表面标志的免疫荧光检测 | 第28页 |
| 3、MAPC的分离、培养和鉴定 | 第28-30页 |
| (1) 兔MAPC的分离、培养和鉴定 | 第28-29页 |
| ① 兔骨髓细胞的分离纯化 | 第28-29页 |
| ② 分选细胞的培养扩增 | 第29页 |
| ③ 兔MAPC生长曲线绘制 | 第29页 |
| ④ 兔MAPC表面标志的免疫荧光检测 | 第29页 |
| (2) BALB/C小鼠MAPC的分离、培养和鉴定 | 第29-30页 |
| ① BALB/C小鼠骨髓细胞的分离纯化 | 第29页 |
| ② 分选细胞的培养扩增 | 第29-30页 |
| ③ BALB/C小鼠MAPC表面标志的免疫荧光检测 | 第30页 |
| (二) 结果 | 第30-36页 |
| 1、兔EPC细胞 | 第30-31页 |
| (1) 原代培养 | 第30页 |
| (2) 传代培养 | 第30-31页 |
| (3) 生长曲线 | 第31页 |
| (4) 细胞表面标志 | 第31页 |
| 2、BALB/C小鼠PEC | 第31-33页 |
| (1) 原代培养 | 第32页 |
| (2) 传代培养 | 第32页 |
| (3) 细胞表面标志 | 第32-33页 |
| 3、兔MAPCs | 第33-35页 |
| (1) 原代培养 | 第33页 |
| (2) 传代培养 | 第33-34页 |
| (3) 生长曲线 | 第34页 |
| (4) 细胞表面标志 | 第34-35页 |
| 4、BALB/C小鼠AMPC | 第35-36页 |
| (1) 原代培养 | 第35页 |
| (2) 传代培养 | 第35-36页 |
| (3) 细胞表面标志 | 第36页 |
| 三、脱细胞静脉瓣支架材料的体外毒性试验 | 第36-38页 |
| (一) 材料和方法 | 第36-37页 |
| 1、试剂和设备 | 第36-37页 |
| 2、支架材料浸提液对种子细胞的影响 | 第37页 |
| 3、支架材料与种子细胞的组织相容性 | 第37页 |
| (二) 结果 | 第37-38页 |
| 1、脱细胞静脉瓣支架材料浸提液对种子细胞增殖的影响 | 第38页 |
| 2、脱细胞静脉瓣支架材料与种子细胞的组织相容性 | 第38页 |
| 四、脱细胞静脉瓣支架材料的血液相容性试验 | 第38-41页 |
| (一) 材料和方法 | 第38-40页 |
| 1、试剂和仪器设备 | 第39页 |
| 2、体外研究 | 第39页 |
| 3、体内研究 | 第39-40页 |
| (二) 结果 | 第40-41页 |
| 1、体外研究 | 第40-41页 |
| 2、体内研究 | 第41页 |
| 五、脱细胞静脉瓣支架材料的局部植入试验 | 第41-44页 |
| (一) 材料和方法 | 第41-42页 |
| 1、试剂和仪器设备 | 第41-42页 |
| 2、局部反应 | 第42页 |
| 3、血清学检测 | 第42页 |
| (二) 结果 | 第42-44页 |
| 1、局部反应 | 第42-44页 |
| 2、血清学检测 | 第44页 |
| 六、脱细胞静脉瓣支架材料的免疫学评价 | 第44-46页 |
| (一) 材料和方法 | 第44-45页 |
| 1、试剂和仪器设备 | 第44页 |
| 2、细胞免疫反应 | 第44-45页 |
| 3、体液免疫反应 | 第45页 |
| (二) 结果 | 第45-46页 |
| 1、细胞免疫反应 | 第45页 |
| 2、体液免疫反应 | 第45-46页 |
| 七、讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-49页 |
| 第二部分 MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的安全性评价 | 第49-61页 |
| 前言 | 第49页 |
| 一、MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的构建及检测 | 第49-52页 |
| (一) 材料和方法 | 第49-50页 |
| 1、试剂和仪器设备 | 第49-50页 |
| 2、MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的体外构建 | 第50页 |
| 3、MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的检测 | 第50页 |
| (二) 结果 | 第50-52页 |
| 1、大体观察 | 第50-51页 |
| 2、H-E染色检测 | 第51页 |
| 3、力学检测 | 第51-52页 |
| 二、MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的血液相容性试验 | 第52-55页 |
| (一) 材料和方法 | 第52-53页 |
| 1、试剂和仪器设备 | 第52页 |
| 2、MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的体外实验 | 第52页 |
| 3、MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的体内实验 | 第52-53页 |
| (二) 结果 | 第53-55页 |
| 1、MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的体外实验 | 第53-54页 |
| 2、MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的体内实验 | 第54-55页 |
| 三、MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的局部植入试验 | 第55-57页 |
| (一) 材料和方法 | 第55页 |
| 1、试剂和仪器设备 | 第55页 |
| 2、局部反应 | 第55页 |
| 3、血清学检测 | 第55页 |
| (二) 结果 | 第55-57页 |
| 1、局部反应 | 第55-57页 |
| 2、血清学检测 | 第57页 |
| 四、MAPC/EPC性组织工程化静脉瓣的免疫学评价 | 第57-59页 |
| (一) 材料和方法 | 第57-58页 |
| 1、试剂和仪器设备 | 第57页 |
| 2、细胞免疫反应 | 第57-58页 |
| 3、局部免疫反应 | 第58页 |
| (二) 结果 | 第58-59页 |
| 1、细胞免疫反应 | 第58-59页 |
| 2、局部免疫反应 | 第59页 |
| 七、讨论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-61页 |
| 全文小结 | 第61-62页 |
| 本课题的创新点和意义 | 第62-63页 |
| 文献综述 | 第63-69页 |
| 在读期间发表论文、申请基金和专利申请 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
