| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第12-19页 |
| 第一章 PPRV及miRNA的研究进展 | 第12-19页 |
| 1.1 PPRV及其受体研究概述 | 第12-15页 |
| 1.1.1 PPRV的致病机理 | 第12-13页 |
| 1.1.2 PPRV感染诱导机体免疫抑制 | 第13-14页 |
| 1.1.3 PPRV受体-SLAM的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2 miRNA在病毒致病机制中的研究概述 | 第15-18页 |
| 1.2.1 miRNA概述、作用机制及检测方法 | 第15-16页 |
| 1.2.2 宿主细胞miRNA与病毒的相互作用 | 第16-17页 |
| 1.2.3 宿主细胞miRNA影响病毒复制 | 第17-18页 |
| 1.3 本研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 试验研究 | 第19-47页 |
| 第二章 PPRV感染山羊PBMCs中miRNA表达谱分析 | 第19-30页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 病毒毒株及细胞 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 山羊PBMCs分离与培养 | 第20-21页 |
| 2.2.2 病毒增殖与滴度测定 | 第21页 |
| 2.2.3 测序样品的制备 | 第21页 |
| 2.2.4 HiSeq深度测序 | 第21-22页 |
| 2.2.5 数据处理 | 第22-23页 |
| 2.2.6 荧光定量PCR验证 | 第23页 |
| 2.3 结果 | 第23-28页 |
| 2.3.1 sRNA库的构建和序列数据分析 | 第23-24页 |
| 2.3.2 miRNA差异表达分析 | 第24-25页 |
| 2.3.3 miRNA靶基因预测 | 第25-26页 |
| 2.3.4 靶基因的GO分析与KEGG分析 | 第26-27页 |
| 2.3.5 荧光定量PCR验证 | 第27-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 2.5 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 PPRV感染山羊PBMCs中miR-218和SLAM受体表达变化研究 | 第30-37页 |
| 3.1 材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第30页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第30-31页 |
| 3.2 方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 山羊PBMCs分离与培养 | 第31页 |
| 3.2.2 病毒增殖与滴度测定 | 第31页 |
| 3.2.3 PPRV感染山羊PBMCs后病变观察 | 第31页 |
| 3.2.4 PPRV感染对山羊PBMCs中miR-218和SLAM受体表达水平的影响 | 第31-33页 |
| 3.3 结果 | 第33-35页 |
| 3.3.1 山羊PBMCs接种PPRV前后细胞病变观察 | 第33页 |
| 3.3.2 PPRV感染山羊PBMCs中不同时间点miR-218及SLAM受体的表达变化 | 第33-34页 |
| 3.3.3 不同MOIPPRV感染对山羊PBMCs中miR-218及SLAM受体表达的影响 | 第34-35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-36页 |
| 3.5 小结 | 第36-37页 |
| 第四章 miR-218对PPRV感染山羊PBMCs中SLAM受体表达的调节机制 | 第37-47页 |
| 4.1 材料 | 第37-38页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第37-38页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第38页 |
| 4.2 方法 | 第38-40页 |
| 4.2.1 山羊PBMCs分离与培养 | 第38页 |
| 4.2.2 病毒增殖与滴度测定 | 第38页 |
| 4.2.3 转染miR-218mimic/inhibitor对SLAM表达及病毒复制的影响 | 第38-39页 |
| 4.2.4 双荧光素酶报告基因检测miR-218与SLAM靶标关系 | 第39页 |
| 4.2.5 转染miR-218mimic/inhibitor对多种细胞因子表达及分泌的影响 | 第39页 |
| 4.2.6 紫外灭活PPRV(UV-PPRV)对miR-218及SLAM受体表达的影响 | 第39-40页 |
| 4.3 结果 | 第40-44页 |
| 4.3.1 miR-218在PPRV感染山羊PBMCs中对SLAM受体及病毒复制的调节 | 第40-41页 |
| 4.3.2 miR-218靶向SLAMmRNA的3’UTR | 第41-42页 |
| 4.3.3 miR-218在PPRV感染山羊PBMCs中调节SLAM介导的免疫应答 | 第42-43页 |
| 4.3.4 PPRV复制能力影响miR-218介导SLAM表达水平 | 第43-44页 |
| 4.4 讨论 | 第44-46页 |
| 4.5 小结 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 附录 | 第54-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 个人简介 | 第64页 |
