中文摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
前言 | 第13-16页 |
材料与方法 | 第16-37页 |
实验器材 | 第16-18页 |
实验试剂 | 第18-21页 |
主要溶液的配制 | 第21-24页 |
实验方法 | 第24-37页 |
1.公共数据库 | 第24页 |
2.人脑组织样本 | 第24-25页 |
3.细胞系来源 | 第25页 |
4.细胞培养 | 第25-26页 |
5.原代细胞的提取及培养 | 第26-27页 |
6.慢病毒构建和转染 | 第27页 |
7.组织蛋白的提取 | 第27页 |
8.细胞总蛋白的提取 | 第27-28页 |
9.细胞胞浆、胞核蛋白提取(详见于凯基生物公司核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒) | 第28-29页 |
10.蛋白定量 | 第29页 |
11.平板克隆形成实验 | 第29页 |
12.CCK-8实验 | 第29页 |
13.划痕实验 | 第29-30页 |
14.Transwell实验 | 第30页 |
15.3D细胞成球侵袭实验 | 第30页 |
16.实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第30-31页 |
17.SDS-PAGE凝胶电泳 | 第31-32页 |
18.细胞免疫荧光 | 第32-33页 |
19.免疫组化 | 第33页 |
20.双荧光素酶报告基因 | 第33页 |
21.染色质免疫共沉淀(CHIP) | 第33-36页 |
22.动物在体实验 | 第36页 |
23.统计方法 | 第36-37页 |
结果 | 第37-56页 |
1.CBX7在胶质瘤的表达降低,并且和恶性程度相关。 | 第37-39页 |
2.外源性过表达CBX7可以抑制胶质瘤细胞的恶性表型。 | 第39-41页 |
3.上调CBX7所引起的侵袭功能抑制与上皮间质转换(EMT)和细胞基质蛋白酶(MMP)有关。 | 第41-45页 |
4.上调CBX7能够抑制Wnt/β-catenin信号通路,从而抑制胶质瘤细胞侵袭功能。 | 第45-48页 |
5.CBX7通过结合DKK1的启动子,从而促进DKK1的表达。 | 第48-50页 |
6.上调CBX7的表达促进DKK1的活性,从而抑制Wnt/β-catenin信号通路。 | 第50-53页 |
7.通过颅内原位成瘤和皮下成瘤来验证CBX7的功能。 | 第53-56页 |
讨论 | 第56-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
综述 | 第66-80页 |
参考文献 | 第74-80页 |
附录1 主要缩略词说明 | 第80-81页 |
附录2 主要计量单位说明 | 第81-82页 |
攻读硕士期间发表文章情况 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |