| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-14页 |
| 英文缩略词表 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-19页 |
| 第一部分人脐静脉内皮细胞microRNA 文库的构建和表达谱分析 | 第19-37页 |
| 研究背景 | 第19页 |
| 实验材料 | 第19-20页 |
| 主要试剂配制 | 第20-22页 |
| 主要仪器设备 | 第22页 |
| 实验方法 | 第22-29页 |
| 1. 细胞的培养及传代 | 第22-23页 |
| 2. 小鼠组织的获取和保存 | 第23页 |
| 3. 样品总RNA 的提取 | 第23页 |
| 4. M icroRNA 文库的构建 | 第23-28页 |
| 5. N orthern Blot 检测小鼠组织及人细胞系中的microRNA 表达谱结果 | 第28-29页 |
| 结果 | 第29-33页 |
| 1. 人脐静脉内皮细胞microRNA cDNA 文库 | 第29-31页 |
| 2. m iRNA 的组织和细胞表达谱 | 第31-33页 |
| 讨论 | 第33-36页 |
| 小结 | 第36-37页 |
| 第二部分miR-126 的成熟机制及其对VEGF/P13K/AKT 通路的调控 | 第37-62页 |
| 研究背景 | 第37页 |
| 实验材料 | 第37-38页 |
| 主要仪器设备 | 第38-39页 |
| 实验方法 | 第39-49页 |
| 1. R eal-Time PCR 检测miR-126 和EGFL7 的组织和细胞表达谱 | 第39-41页 |
| 2. m iR-126 的成熟机制 | 第41-44页 |
| 3. 细胞转染 | 第44-45页 |
| 4. W estern Blot | 第45-46页 |
| 5. 靶基因预测 | 第46页 |
| 6. 基因3’UTR-PGL3 质粒的构建和定点突变 | 第46-48页 |
| 7. 萤火虫萤光素酶检测miR-126 对靶基因的作用 | 第48页 |
| 8. 统计学分析 | 第48-49页 |
| 结果 | 第49-58页 |
| 1. m iR-126 位于哺乳动物EGFL7 基因的内含子中并且序列高度保守 | 第49-50页 |
| 2. m iR-126 和EGFL7 基因的表达谱相关性 | 第50页 |
| 3. m iR-126 及其宿主基因的形成机制和表达的相互影响 | 第50-55页 |
| 4. miR-126 的靶基因预测及其对 VEGF/PI3K/AKT 通路的调控 | 第55-57页 |
| 5. miR-126 在人乳腺癌组织中表达下降 | 第57-58页 |
| 讨论 | 第58-61页 |
| 小结 | 第61-62页 |
| 第三部分 miR-155 和 miR-221/222 在调控 AngII 诱导的内皮细胞炎症和迁移的中作用及 机制 | 第62-80页 |
| 研究背景 | 第62-63页 |
| 实验材料 | 第63-64页 |
| 主要仪器设备 | 第64页 |
| 实验方法 | 第64-69页 |
| 1. 生物信息学预测mir-155 和miR-221/222 的靶基因 | 第64页 |
| 2. 双萤光素酶报告基因验证miR-155 和miR-221/222 的靶基因 | 第64-65页 |
| 3. 实时荧光定量PCR 检测miRNA 和基因的表达 | 第65-67页 |
| 4. W estern Blot | 第67页 |
| 5. 细胞粘附实验 | 第67-68页 |
| 6. 细胞迁移实验 | 第68页 |
| 7. 统计学分析 | 第68-69页 |
| 结果 | 第69-76页 |
| 1. 生物信息学提示ETS-1 是miR-155 和miR-221/222 共同的靶基因 | 第69-70页 |
| 2. 双萤光素酶报告基因证实ETS-1 是miR-155 和miR-221 | 第70-71页 |
| 3. 干预HUVEC 中miR-155，miR-221 和miR-222 的表达 | 第71页 |
| 4. m iR-155 和miR-221/222 对HUVEC 中ETS-1 的调控 | 第71-72页 |
| 5. miR-155和 miR-221/222能够降低AngII诱导的VCAM1,MCP1,FLT1 和 ETS-1 mRNA 的表达 | 第72-73页 |
| 6. miR-155,miR-221/222 和 si-ETS1 均能减轻 AngII 诱导的内皮细胞炎 症反应 | 第73-74页 |
| 7. m iR-155 抑制AngII 诱导的HUVEC 迁移 | 第74-76页 |
| 讨论 | 第76-79页 |
| 小结 | 第79-80页 |
| 总结 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 文献综述 | 第87-94页 |
| 参考文献 | 第91-94页 |
| 发表论文及参加科研项目 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
