摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
1 前言 | 第11-26页 |
1.1 心脏发育调控及功能研究的理想模型----果蝇 | 第11-13页 |
1.2 果蝇Wg信号途径及Pygo基因概述 | 第13-17页 |
1.2.1 Wg信号途径 | 第13-16页 |
1.2.2 Pygo基因概述 | 第16-17页 |
1.3 CG7927基因概述 | 第17-18页 |
1.4 果蝇成体心脏基因功能研究方法 | 第18-24页 |
1.4.1 果蝇P转座子敲除/敲入品系的构建 | 第18-20页 |
1.4.2 果蝇荧光心脏标记系统 | 第20-21页 |
1.4.3 果蝇心力衰竭检测系统 | 第21-22页 |
1.4.4 基因调控途径的分析方法 | 第22-24页 |
1.5 课题的研究内容与意义 | 第24-26页 |
2 果蝇PYGO基因在成体心脏中的功能研究 | 第26-52页 |
2.1 实验材料 | 第26-28页 |
2.1.1 果蝇品系 | 第26页 |
2.1.2 引物 | 第26-28页 |
2.1.3 主要试剂及仪器 | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-37页 |
2.2.1 主要试剂配制 | 第28-29页 |
2.2.2 Pygo突变品系表型观察品系的构建及表型观察方法 | 第29-32页 |
2.2.3 果蝇成体心脏心力衰竭功能分析 | 第32-33页 |
2.2.4 心管cDNA的获取与RT-qPCR方法 | 第33-36页 |
2.2.5 基因芯片步骤 | 第36-37页 |
2.3 结果与分析 | 第37-50页 |
2.3.1 Pygo基因敲除对果蝇成体心脏形态的影响 | 第37-39页 |
2.3.2 Pygo基因敲除对果蝇心力衰竭率的影响 | 第39-41页 |
2.3.3 Pygo基因敲除对Wg信号途径其他成员表达的影响 | 第41-43页 |
2.3.4 Pygo基因敲除心脏表达基因的基因芯片分析 | 第43-50页 |
2.4 讨论 | 第50-52页 |
3 果蝇CG7927基因敲除系的构建 | 第52-68页 |
3.1 材料与方法 | 第52-58页 |
3.1.1 实验材料 | 第52-53页 |
3.1.2 引物 | 第53-54页 |
3.1.3 CG7927基因完全敲除品系的获得与检测 | 第54-58页 |
3.2 结果与分析 | 第58-66页 |
3.2.1 CG7927基因生物信息学分析 | 第58-60页 |
3.2.2 CG7927基因敲除系的构建 | 第60-63页 |
3.2.3 CG7927基因敲除系的检测 | 第63-66页 |
3.3 讨论 | 第66-68页 |
4 其他工作—LBE多克隆抗体的制备 | 第68-74页 |
4.1 实验方法 | 第68-70页 |
4.1.1 原核细胞诱导蛋白质表达及纯化 | 第68-69页 |
4.1.2 SDS-PAGE | 第69-70页 |
4.1.3 lbe纯化蛋白免疫兔子制备多克隆抗体 | 第70页 |
4.2 结果与讨论 | 第70-74页 |
4.2.1 pET28a-lbe表达载体的构建 | 第70-72页 |
4.2.2 诱导表达融合蛋白 | 第72-73页 |
4.2.3 蛋白纯化及免疫 | 第73页 |
4.2.4 讨论 | 第73-74页 |
5 结论 | 第74-76页 |
5.1 Pygo基因相关结论 | 第74页 |
5.2 CG7927基因相关结论 | 第74-75页 |
5.3 LBE抗体的制备 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-87页 |
附录1 | 第87-88页 |
附录2 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |