中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12-14页 |
研究现状、成果 | 第12-13页 |
研究目的、方法 | 第13-14页 |
第一部分 UVB对人角质形成细胞基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响 | 第14-34页 |
1. 实验材料 | 第14-16页 |
1.1 主要试剂 | 第14页 |
1.2 主要仪器 | 第14-15页 |
1.3 主要液体配置 | 第15-16页 |
2. 实验方法 | 第16-22页 |
2.1 HaCaT细胞的培养与传代 | 第16-17页 |
2.1.1 细胞来源 | 第16页 |
2.1.2 HaCaT细胞的传代培养 | 第16-17页 |
2.2 细胞的冻存与复苏 | 第17页 |
2.2.1 细胞的冻存 | 第17页 |
2.2.2 细胞的复苏 | 第17页 |
2.3 HaCaT细胞生长曲线的绘制 | 第17-18页 |
2.4 MTT方法检测UVB照射后HaCaT细胞的增殖活性 | 第18页 |
2.5 RT-PCR方法检测UVB照射对HaCaT细胞MMP-1、MMP-9、TIMP-1mRNA的影响 | 第18-22页 |
2.5.1 实验分组 | 第18-19页 |
2.5.2 UVB照射 | 第19页 |
2.5.3 HaCaT细胞总RNA的提取 | 第19-20页 |
2.5.4 RNA的纯度鉴定及定量 | 第20页 |
2.5.5 RNA完整性的鉴定 | 第20页 |
2.5.6 逆转录 | 第20页 |
2.5.7 RT-PCR 检测 UVB 照射后 HaCaT 细胞中 MMP-1、MMP-9、TIMP-lmRNA的表达 | 第20-22页 |
3. 实验结果 | 第22-29页 |
3.1 细胞形态 | 第22-24页 |
3.1.1 正常HaCaT细胞形态 | 第22-23页 |
3.1.2 经不同剂量UVB照射后细胞形态 | 第23-24页 |
3.2 HaCaT细胞的细胞生长曲线结果 | 第24-25页 |
3.3 MTT法检测UVB对HaCaT细胞增殖活性的影响 | 第25页 |
3.4 总RNA纯度和完整性的鉴定 | 第25-26页 |
3.5 UVB照射对HaCaT细胞MMP-1、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达的影响 | 第26-29页 |
3.5.1 RT-PCR电泳结果 | 第26-28页 |
3.5.2 UVB照射后HaCaT细胞中MMP-1、MMP-9及TIMP-1mRNA的相对含量 | 第28-29页 |
4. 讨论 | 第29-34页 |
第二部分 白藜芦醇对UVB照射后致人角质形成细胞MMPs、TIMPs表达的影响的干预研究 | 第34-44页 |
1、实验材料 | 第34-35页 |
1.1 主要试剂 | 第34页 |
1.2 主要仪器 | 第34-35页 |
1.3 主要液体配置 | 第35页 |
2. 实验方法 | 第35-37页 |
2.1 HaCaT细胞的传代与培养 | 第35页 |
2.2 MTT方法检测白藜芦醇对角质形成细胞增殖活性的影响 | 第35-36页 |
2.3 RT-PCR方法检测不同浓度Res干预对UVB照射后HaCaT细胞中MMP-1、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达的影响 | 第36-37页 |
2.3.1 引物序列、反应条件、引物大小 | 第36页 |
2.3.2 UVB照射剂量的选择 | 第36页 |
2.3.3 实验分组 | 第36-37页 |
2.3.4 UVB照射及加入Res干预 | 第37页 |
2.3.5 HaCaT细胞总RNA的提取 | 第37页 |
2.3.6 PCR产物鉴定 | 第37页 |
2.3.7 统计分析 | 第37页 |
3. 实验结果 | 第37-40页 |
3.1 不同浓度Res干预24h后HaCaT细胞增殖活性结果 | 第37-38页 |
3.2 Res干预对UVB照射所致HaCaT细胞MMP-9及TIMP-1mRNA表达的影响 | 第38-40页 |
3.3 Res干预对UVB照射所致HaCaT细胞MMP-1mRNA表达的影响 | 第40页 |
4. 讨论 | 第40-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第49-50页 |
综述一 | 第50-57页 |
综述参考文献 | 第54-57页 |
综述二 | 第57-64页 |
综述参考文献 | 第62-64页 |
致谢 | 第64页 |