| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第1章 引言 | 第7-10页 |
| 第2章 材料 | 第10-14页 |
| 2.1 细胞株 | 第10页 |
| 2.2 主要试剂 | 第10页 |
| 2.3 自配试剂 | 第10-13页 |
| 2.4 主要仪器设备 | 第13-14页 |
| 第3章 方法 | 第14-24页 |
| 3.1 细胞培养 | 第14-15页 |
| 3.1.1 细胞传代 | 第14页 |
| 3.1.2 细胞冻存 | 第14页 |
| 3.1.3 细胞复苏 | 第14-15页 |
| 3.2 siRNA 转染后 FAT10 mRNA 的检测 | 第15-19页 |
| 3.2.1 针对 FAT10 基因设计 4 条 siRNA 序列 | 第15页 |
| 3.2.2 半定量 RT-PCR 分析 FAT10 mRNA 的变化 | 第15-19页 |
| 3.3 Western blot 检测 FAT10 基因表达变化 | 第19-21页 |
| 3.3.1 细胞蛋白提取 | 第19页 |
| 3.3.2 SDS－PAGE 电泳 | 第19-20页 |
| 3.3.3 转膜 | 第20-21页 |
| 3.3.4 免疫反应 | 第21页 |
| 3.3.5 化学发光，显影，定影 | 第21页 |
| 3.3.6 凝胶图象分析 | 第21页 |
| 3.4 细胞侵袭试验 | 第21-22页 |
| 3.4.1 Transwell 侵袭小室测定细胞侵袭能力 | 第21-22页 |
| 3.4.2 Transwell 侵袭小室测定细胞迁移能力 | 第22页 |
| 3.5 细胞迁移试验(划痕试验) | 第22-23页 |
| 3.6 统计学分析 | 第23-24页 |
| 第4章 结果 | 第24-32页 |
| 4.1 半定量 PT-PCR 检测 FAT10-siRNA 能明显抑制肝癌细胞 FAT10mRNA 表达 | 第24页 |
| 4.2 荧光定量 PCR 检测 FAT10-siRNA 能明显抑制肝癌细胞 FAT10mRNA 表达 | 第24-25页 |
| 4.3 Western bolt 检测 FAT10-siRNA 能明显抑制肝癌细胞 FAT1O 蛋白表达 | 第25-26页 |
| 4.4 Transwell 体外侵袭实验检测 FAT10-siRNA 降低 FAT10 的表达的肝癌细胞，其侵袭能力明显降低 | 第26-28页 |
| 4.5 Transwell 体外迁移实验检测 FAT10-siRNA 降低 FAT10 的表达的肝癌细胞，其侵迁移力明显降低 | 第28-29页 |
| 4.6 划痕试验实验检测 FAT10-siRNA 降低 FAT10 的表达的肝癌细胞，其侵迁移力明显降低 | 第29-32页 |
| 第5章 讨论 | 第32-35页 |
| 第6章 结论 | 第35-36页 |
| 致谢 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第39-40页 |
| 综述 | 第40-46页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
