| 致谢 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-14页 |
| Abstract | 第14-23页 |
| 中英文缩略语表 | 第24-28页 |
| 引言 | 第28-35页 |
| 实验材料与方法 | 第35-46页 |
| 1.1 实验材料及仪器设备 | 第35-38页 |
| 1.1.1 细胞系 | 第35页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第35-36页 |
| 1.1.3 药品和试剂 | 第36-38页 |
| 1.2 实验方法 | 第38-46页 |
| 1.2.1 细胞复苏 | 第38页 |
| 1.2.2 细胞培养 | 第38页 |
| 1.2.3 外周血单核细胞分离 | 第38页 |
| 1.2.4 MTT法测细胞增殖 | 第38-39页 |
| 1.2.5 中位效应法判断不同浓度Azurin与化疗药物联用对各种细胞系凋亡的影响 | 第39-40页 |
| 1.2.6 Annexin V-FITC/PI检测Annexin V 阳性细胞 | 第40页 |
| 1.2.7 Caspase酶活性检测 | 第40-41页 |
| 1.2.8 Luciferase报告基因检测 | 第41页 |
| 1.2.9 线粒体内膜心磷脂脂质氧化的检测 | 第41页 |
| 1.2.10 线粒体膜电位的检测 | 第41-42页 |
| 1.2.11 活性氧自由基(ROS)的检测 | 第42页 |
| 1.2.12 还原型谷胱甘肽(GSH)含量的检测 | 第42页 |
| 1.2.13 细胞外GSH含量检测 | 第42-43页 |
| 1.2.14 谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性的检测 | 第43页 |
| 1.2.15 免疫荧光定位检测细胞色素C、AIF、bax亚细胞器定位 | 第43页 |
| 1.2.16 蛋白兔疫印迹(Western blot)检测目的蛋白的表达 | 第43-45页 |
| 1.2.17 数据统计分析 | 第45-46页 |
| 实验结果与讨论 | 第46-128页 |
| 2.1 Azurin通过P53途径诱导肿瘤细胞凋亡 | 第46-54页 |
| 2.1.1 Azurin对不同组织来源、不同P53基因型背景的肿瘤细胞增殖的影响 | 第46-50页 |
| 2.1.2 Azurin诱导了不同组织来源的P53野生型肿瘤细胞发生凋亡 | 第50-51页 |
| 2.1.3 Azurin诱导骨肉瘤细胞凋亡的P53依赖性机制 | 第51-54页 |
| 2.2 Azurin诱导的线粒体损伤 | 第54-70页 |
| 2.2.1 Azurin诱导线粒体膜电位的下降 | 第54-58页 |
| 2.2.2 Azurin诱导线粒体内膜心磷脂过氧化 | 第58-60页 |
| 2.2.3 Azurin诱导线粒体细胞色素C释放进入细胞质 | 第60-61页 |
| 2.2.4 Azurin诱导AIF释放进入细胞质和细胞核 | 第61-62页 |
| 2.2.5 Azurin诱导Bax线粒体的移位 | 第62-65页 |
| 2.2.6 Azurin对U20S细胞的凋亡相关蛋白表达的影响 | 第65-68页 |
| 2.2.7 线粒体PT孔道的开放在Azurin诱导细胞凋亡中的作用 | 第68-70页 |
| 2.3 Azurin诱导的细胞内氧化还原状态失衡 | 第70-90页 |
| 2.3.1 Azurin引发的活性氧自由基水平的变化 | 第70-75页 |
| 2.3.2 Azuri对GSH还原系统的影响 | 第75-79页 |
| 2.3.3 抗氧化剂Catalase、NAC、MnTBAP预孵育对Azurin细胞毒性效应的影响 | 第79-85页 |
| 2.3.4 GSH耗竭在Azurin诱导细胞凋亡中的作用机制 | 第85-90页 |
| 2.4 P53信号通路、氧化应激、线粒体损伤、细胞凋亡间的相互关系 | 第90-108页 |
| 2.4.1 氧化应激以及P53信号通路对细胞色素C、AIF释放进入胞质的影响 | 第90-97页 |
| 2.4.2 氧化应激以及P53信号通路对Bax移位线粒体的影响 | 第97-101页 |
| 2.4.3 P53信号通路对Azurin诱导线粒体损伤的影响 | 第101-102页 |
| 2.4.4 P53信号通路对Azurin诱导的ROS水平增高、GSH含量降低的影响 | 第102-104页 |
| 2.4.5 氧化应激对p53基因转录活性的影响 | 第104-108页 |
| 2.5 Azurin对化疗药物细胞毒性的增敏效应及其分子机制 | 第108-128页 |
| 2.5.1 Azurin分别对顺铂、氨甲喋呤、阿霉素、异环磷酰胺化疗药物的骨肉瘤细胞毒性的增敏效应 | 第108-113页 |
| 2.5.2 抗氧化剂NAC、P53信号阻断剂PFT-α对Azurin化疗药物细胞毒性增敏效应的影响 | 第113-116页 |
| 2.5.3 Azurin分别联合顺铂、氨甲喋呤、阿霉素、异环磷酰胺给药引发骨肉瘤细胞胞内氧自由基水平的改变 | 第116-120页 |
| 2.5.4 Azuirn分别联合顺销、氣甲喋呤、阿霉素、异环雄酸胺给药对GSH还原系统的影响 | 第120-123页 |
| 2.5.5 抗氧化剂NAC、P53信号阻断剂PFT-α对Azurin联合化疗药物处理组所致细胞氧化应激的影响 | 第123-126页 |
| 2.5.6 Azurin分别与顺铂、氨甲喋呤、阿霉素、异环磷酰胺联合给药对正常人外周血单核细胞(PMBCs)活性的影响 | 第126-128页 |
| 全文总结 | 第128-132页 |
| 参考文献 | 第132-140页 |
| 综述 | 第140-174页 |
| 参考文献 | 第157-174页 |
| 个人简历 | 第174页 |
