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JMJD5相互作用蛋白的鉴定和N端功能的研究

致谢第4-5页
中文摘要第5-7页
Abstract第7-8页
缩略语第9-12页
1 引言第12-16页
2 实验材料与方法第16-30页
    2.1 实验材料第16-20页
        2.1.1 细胞系第16页
        2.1.2 细胞培养试剂第16页
        2.1.3 细胞转染试剂第16页
        2.1.4 细胞处理化学物第16页
        2.1.5 细胞蛋白提取相关试剂第16-17页
        2.1.6 Western blot相关试剂第17页
        2.1.7 抗体第17-18页
        2.1.8 融合蛋白纯化试剂第18页
        2.1.9 分子克隆及荧光定量PCR试剂第18页
        2.1.10 SiRNA及PCR引物第18-20页
        2.1.11 软件和数据库第20页
    2.2 实验方法第20-30页
        2.2.1 细胞培养、细胞转染、SiRNA干扰、Adr、LBM、MN-NG处理细胞第20-21页
        2.2.2 酸抽提法提取组蛋白第21页
        2.2.3 提取细胞核小体第21页
        2.2.4 ANTI-FLAG M2 Magnetic Beads免疫共沉淀、抗体免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation)第21-22页
        2.2.5 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第22-24页
        2.2.6 原核蛋白表达纯化第24-26页
        2.2.7 体外去甲基反应第26页
        2.2.8 免疫荧光第26-27页
        2.2.9 定点突变第27-28页
        2.2.10 PCR第28-29页
        2.2.11 染色质免疫共沉淀(CHIP)第29页
        2.2.12 染色质结合与分离组份蛋白的提取第29-30页
3 结果第30-53页
    3.1 JMJD5相互作用蛋白的质谱鉴定第30-33页
    3.2 JMJD5细胞内核定位机制的研究第33-43页
        3.2.1 JMJD5核定位的过程依赖于Importin α/β和Transportin-1通路第33-35页
        3.2.2 Importin α和Transportin-1作用于JMJD5的不同区域第35-36页
        3.2.3 免疫荧光实验进一步明确核定位序列(NLS)的位置及功能第36-38页
        3.2.4 JMJD5核定位信号(NLS)上关键氨基酸位点的鉴定第38-40页
        3.2.5 JMJD5的N端存在出核信号(NES)第40-41页
        3.2.6 核定位功能是JMJD5调控cyclinA1表达所必需的第41-43页
    3.3 JMJD5与p53的相互作用及在DNA损伤反应中的功能研究第43-53页
        3.3.1 JMJD5与p53相互作用及关键结合区域的鉴定第43-46页
        3.3.2 JMJD5与p53相互作用在DNA损伤后减弱第46-48页
        3.3.3 siRNA干扰JMJD5表达使得p53的靶基因表达上调第48-50页
        3.3.4 JMJD5可抑制p53对靶基因CDKN1A的转录激活第50-53页
4 讨论第53-57页
5 结论和展望第57-59页
    5.1 主要结论第57页
    5.2 展望第57-59页
参考文献第59-63页
综述第63-84页
    参考文献第73-84页
作者简历及在学期间取得的科研成果第84页

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