| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第9-19页 |
| 1.1 基因组印记的发现 | 第9页 |
| 1.2 印记基因的特征 | 第9-10页 |
| 1.3 印记基因的调控模式 | 第10-13页 |
| 1.3.1 DNA 甲基化 | 第10-11页 |
| 1.3.2 组蛋白修饰 | 第11页 |
| 1.3.3 X 染色体失活 | 第11-12页 |
| 1.3.4 MicroRNA | 第12-13页 |
| 1.4 基因组印记的生物学意义 | 第13-14页 |
| 1.4.1 印记异常与遗传疾病 | 第13页 |
| 1.4.2 基因组印记与动物体细胞核移植 | 第13-14页 |
| 1.4.3 印记基因与家畜遗传育种 | 第14页 |
| 1.5 印记基因的鉴定 | 第14-15页 |
| 1.6 研究基因 | 第15-19页 |
| 1.6.1 Dlk1-Dio3 印记区域研究现状 | 第15-16页 |
| 1.6.2 Dlk1-Dio3 印记区域的 microRNA 簇 | 第16-17页 |
| 1.6.3 Meg9 基因研究现状 | 第17页 |
| 1.6.4 研究内容及意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 牛组织样品 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂、试剂盒 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器和设备 | 第19-20页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第20-21页 |
| 2.1.5 生物信息学网站和分析软件 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 牛组织 RNA 的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.2 牛组织 RNA 的纯化 | 第22-23页 |
| 2.2.3 反转录合成 cDNA | 第23页 |
| 2.2.4 牛 Meg9 基因 cDNA 序列的获得 | 第23页 |
| 2.3 牛 Meg9 基因可变剪切表达及结构分析 | 第23-24页 |
| 2.3.1 GAPDH 和目的基因引物设计 | 第23-24页 |
| 2.3.2 牛 Meg9 基因可变剪切表达 | 第24页 |
| 2.4 牛 Meg9 基因 SNP 位点寻找 | 第24-27页 |
| 2.4.1 牛基因组 DNA 的提取 | 第24-25页 |
| 2.4.2 基因组 DNA 的琼脂糖检测 | 第25页 |
| 2.4.3 基因组 DNA 的纯度检测 | 第25页 |
| 2.4.4 引物设计及 PCR 扩增 | 第25-26页 |
| 2.4.5 PCR 产物纯化与回收 | 第26页 |
| 2.4.6 DNA 测序确定杂合子 | 第26-27页 |
| 2.5 牛 Meg9 基因等位基因特异性表达 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-36页 |
| 3.1 总 RNA 的提取质量 | 第28页 |
| 3.2 牛 Meg9 基因序列预测及结构分析 | 第28-29页 |
| 3.3 Meg9 基因结构及可变剪切分析 | 第29-30页 |
| 3.4 牛 Meg9 基因序列分析 | 第30-33页 |
| 3.4.1 牛 Meg9 基因和其他物种的同源性及进化树分析 | 第30页 |
| 3.4.2 牛 Meg9 基因潜在的启动子区预测及转录因子结合位点预测 | 第30-31页 |
| 3.4.3 牛 Meg9 基因开放阅读框的预测 | 第31-32页 |
| 3.4.4 牛 Meg9 基因启动子及内含子上 CpG 岛预测 | 第32-33页 |
| 3.4.5 Meg9 基因启动子及内含子上重复元件分析 | 第33页 |
| 3.5 Meg9 基因的可变剪切表达 | 第33-34页 |
| 3.6 Meg9 基因的 SNP 位点确定 | 第34-35页 |
| 3.7 牛 Meg9 基因的印记状态分析 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 4.1 牛 Meg9 基因的结构可变剪切分析 | 第36页 |
| 4.2 牛 Meg9 基因组织特异性分析 | 第36页 |
| 4.3 牛 Meg9 基因的印记状态分析 | 第36-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 在读期间发表的论文 | 第44-45页 |
| 简历 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
