| 缩略语索引表 | 第9-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-14页 |
| 第一部分 Cyfra21-1和SCC诊断食管鳞状细胞癌的临床意义 | 第15-33页 |
| 前言 | 第17-18页 |
| 材料和方法 | 第18-20页 |
| 一、材料 | 第18页 |
| 1、血清收集及准备 | 第18页 |
| 2、主要试剂 | 第18页 |
| 3、主要仪器 | 第18页 |
| 二、方法 | 第18-20页 |
| 1、ELISA检测血清Cyfra21-1和SCC浓度 | 第18-19页 |
| 2、化学发光法检测血清Cyfra21-1和SCC浓度 | 第19页 |
| 3、统计学处理 | 第19-20页 |
| 结果 | 第20-26页 |
| 1、食管鳞癌和食管不典型增生及健康对照血清Cyfra21-1表达水平比较 | 第20-21页 |
| 2、食管鳞癌和食管不典型增生及健康对照血清SCC表达水平比较 | 第21-22页 |
| 3、食管鳞癌血清Cyfra21-1水平与临床病理参数比较 | 第22-23页 |
| 4、食管鳞癌血清SCC水平与临床病理参数比较 | 第23页 |
| 5、联合检测血清Cyfra21-1和SCC水平对辅助ESCC诊断的比较 | 第23-24页 |
| 6、化学发光法定量检测血清Cyfra21-1和SCC表达水平 | 第24-26页 |
| 讨论 | 第26-32页 |
| 小结 | 第32-33页 |
| 第二部分 用基于磁珠的MALDI-TOF-MS蛋白质组技术发现食管癌血清多肽标志物 | 第33-70页 |
| 前言 | 第35-37页 |
| 材料和方法 | 第37-43页 |
| 一、材料 | 第37-39页 |
| 1、血清收集及准备 | 第37-38页 |
| 2、血清的采集、制备及存储 | 第38页 |
| 3、抗体 | 第38页 |
| 4、主要仪器 | 第38-39页 |
| 5、主要试剂 | 第39页 |
| 6、常用溶液的配制 | 第39页 |
| 二、方法 | 第39-43页 |
| 1、磁珠预处理血清 | 第39页 |
| 2、芯片上样和肽谱生成 | 第39-40页 |
| 3、训练集的构建 | 第40页 |
| 4、nano-LC/ESI-MS/MS鉴定肽段标志物 | 第40页 |
| 5、免疫组织化学染色 | 第40-41页 |
| 6、ELISA检测 | 第41页 |
| 7、化学发光法检测血清Cyfra21-1和SCC浓度 | 第41-42页 |
| 8、统计学处理 | 第42-43页 |
| 结果 | 第43-60页 |
| 1、质谱重复性和精确性检测 | 第43页 |
| 2、训练集样本检测及扫描发现差异峰 | 第43-45页 |
| 3、诊断模型的建立 | 第45-48页 |
| 4、诊断模型的验证 | 第48-49页 |
| 5、诊断模型对不同TNM分期ESCC的诊断效果 | 第49-50页 |
| 6、诊断模型与Cyfra 21-1和SCC对比 | 第50-52页 |
| 7、差异多肽的蛋白鉴定 | 第52-55页 |
| 8、ESCC组织中TSP1过表达及与生存期的关系 | 第55-58页 |
| 9、TSP1血清水平在ESCC患者中表达升高 | 第58-60页 |
| 讨论 | 第60-69页 |
| 小结 | 第69-70页 |
| 第三部分 制备抗TSP1多肽抗体及其在食管癌血清检测中的应用 | 第70-93页 |
| 前言 | 第72-74页 |
| 材料和方法 | 第74-82页 |
| 一、材料 | 第74-77页 |
| 1、实验动物 | 第74页 |
| 2、细胞系 | 第74页 |
| 3、主要仪器 | 第74页 |
| 4、主要试剂 | 第74-75页 |
| 5、常用溶液的配制 | 第75-77页 |
| 二、方法 | 第77-82页 |
| 1、多肽合成及偶联 | 第77-78页 |
| 2、多克隆抗体 | 第78-79页 |
| 3、单克隆抗体 | 第79-81页 |
| 4、统计学处理 | 第81-82页 |
| 结果 | 第82-90页 |
| 1、多肽免疫原性和偶联效率 | 第82页 |
| 2、多克隆抗体血清滴度检测 | 第82-83页 |
| 3、ESCC术前术后及健康对照样本血清评估多克隆抗体 | 第83-84页 |
| 4、筛选阳性杂交瘤细胞 | 第84-88页 |
| 5、单克隆抗体相对灵敏度测定 | 第88页 |
| 6、单克隆抗体竞争抑制测定 | 第88-89页 |
| 7、ESCC术前和健康对照样本血清评估单克隆抗体 | 第89-90页 |
| 讨论 | 第90-92页 |
| 小结 | 第92-93页 |
| 第四部分 ABCC4在食管鳞癌顺铂耐药中的作用和增强子结合转录因子的鉴定 | 第93-120页 |
| 前言 | 第95-97页 |
| 材料和方法 | 第97-108页 |
| 一、材料 | 第97-100页 |
| 1、细胞系 | 第97页 |
| 2、菌株 | 第97页 |
| 3、引物 | 第97页 |
| 4、抗体 | 第97-98页 |
| 5、主要仪器 | 第98页 |
| 6、主要试剂 | 第98-99页 |
| 7、常用溶液的配制 | 第99-100页 |
| 二、方法 | 第100-108页 |
| 1、细胞培养 | 第100页 |
| 2、细胞蛋白质的提取 | 第100页 |
| 3、蛋白定量 | 第100-101页 |
| 4、Western blot analysis | 第101-102页 |
| 5、siRNA转染 | 第102页 |
| 6、MTT法检测顺铂敏感性 | 第102页 |
| 7、质粒构建 | 第102-103页 |
| 8、质粒的小量提取 | 第103页 |
| 9、质粒鉴定 | 第103页 |
| 10、无内毒素质粒的大量提取 | 第103-104页 |
| 11、报告基因实验 | 第104页 |
| 12、ChIP实验 | 第104-107页 |
| 13、PCR扩增 | 第107页 |
| 14、统计学处理 | 第107-108页 |
| 结果 | 第108-112页 |
| 1、ABCC4表达水平与顺铂化疗敏感性的关系 | 第108页 |
| 2、敲降ABCC4对顺铂化疗敏感性的影响 | 第108-109页 |
| 3、ABCC4变异区段增强子转录调控功能检测 | 第109-110页 |
| 4、ABCC4变异区段结合转录因子检测 | 第110-112页 |
| 讨论 | 第112-119页 |
| 小结 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-138页 |
| 文献综述 MALDI-TOF-MS技术与肿瘤标志蛋白 | 第138-146页 |
| 参考文献 | 第143-146页 |
| 个人简历 | 第146-147页 |
| 致谢 | 第147-149页 |
| 附件：研究生期间发表文章和获奖证书 | 第149-172页 |
