| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 中英文缩略词表 | 第11-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-29页 |
| 1.1 Myostatin的研究进展 | 第13-25页 |
| 1.1.1 Myostatin基因的发现与分子特点 | 第13-14页 |
| 1.1.2 Myostatin的表达与调控 | 第14-17页 |
| 1.1.3 Myostatin的生物学功能 | 第17-23页 |
| 1.1.4 Myostatin的应用 | 第23-25页 |
| 1.2 锌指核酸酶技术简介 | 第25-28页 |
| 1.3 梅山猪的种质特性及应用 | 第28页 |
| 1.4 研究意义和目标 | 第28-29页 |
| 第二章 MSTN基因编辑梅山猪的制备 | 第29-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第29-37页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第29页 |
| 2.1.2 仪器与试剂 | 第29-31页 |
| 2.1.3 锌指核酸酶的设计与合成 | 第31页 |
| 2.1.4 胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第31页 |
| 2.1.5 细胞转染实验 | 第31-32页 |
| 2.1.6 锌指核酸酶打靶效率检测 | 第32-33页 |
| 2.1.7 单细胞克隆的培养与基因型鉴定 | 第33页 |
| 2.1.8 猪体细胞克隆 | 第33-34页 |
| 2.1.9 ZFN脱靶及载体片段整合分析 | 第34-37页 |
| 2.2 结果与分析 | 第37-50页 |
| 2.2.1 锌指核酸酶质粒的设计与合成 | 第37-38页 |
| 2.2.2 梅山猪胎儿成纤维细胞的获得 | 第38页 |
| 2.2.3 锌指核酸酶质粒转染效率及打靶效率检测 | 第38-40页 |
| 2.2.4 MSTN基因编辑单细胞克隆的筛选 | 第40-42页 |
| 2.2.5 MSTN基因编辑梅山猪的成功制备与繁育 | 第42-46页 |
| 2.2.6 ZFN脱靶及载体片段整合分析结果 | 第46-50页 |
| 第三章 MSTN基因编辑梅山猪的表型分析 | 第50-71页 |
| 3.1 材料与方法 | 第50-55页 |
| 3.1.1 试验动物 | 第50页 |
| 3.1.2 仪器与试剂 | 第50-51页 |
| 3.1.3 胴体性状检测及组织样品采集 | 第51-52页 |
| 3.1.4 RT-PCR及荧光定量PCR | 第52页 |
| 3.1.5 Western Blot检测 | 第52-53页 |
| 3.1.6 ELISA检测 | 第53页 |
| 3.1.7 血液生理生化指标检测 | 第53页 |
| 3.1.8 组织学检测分析 | 第53-54页 |
| 3.1.9 肌纤维数目与横街面积的分析 | 第54页 |
| 3.1.10 肌肉肉质的检测 | 第54-55页 |
| 3.1.11 数据分析 | 第55页 |
| 3.2 结果与分析 | 第55-71页 |
| 3.2.1 MSTN基因编辑猪靶基因mRNA及氨基酸序列变化情况 | 第55-57页 |
| 3.2.2 MSTN基因编辑猪的靶基因转录及表达情况 | 第57-59页 |
| 3.2.3 MSTN基因编辑猪的胴体性状检测结果 | 第59-61页 |
| 3.2.4 MSTN基因编辑猪的肌纤维变化情况 | 第61-64页 |
| 3.2.5 MSTN基因编辑猪脊椎组成情况 | 第64-65页 |
| 3.2.6 MSTN基因编辑猪的血液生理生化指标检测结果 | 第65-68页 |
| 3.2.7 MSTN基因编辑猪内脏组织病理学检测结果 | 第68-69页 |
| 3.2.8 MSTN基因编辑猪的肉质及营养成分检测结果 | 第69-71页 |
| 第四章 讨论 | 第71-74页 |
| 4.1 针对MSTN基因编辑猪特点及安全性的讨论 | 第71-72页 |
| 4.2 针对肌纤维表型的讨论 | 第72页 |
| 4.3 针对胸腰椎模式变化的讨论 | 第72-73页 |
| 4.4 针对肉质性状检测结果的讨论 | 第73-74页 |
| 第五章 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 附录 | 第91-95页 |
| 作者简历 | 第95页 |
