| 摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第14-22页 |
| 1.1 乳腺上皮细胞乳合成和细胞增殖的基本规律 | 第14-15页 |
| 1.1.1 乳蛋白的合成 | 第14页 |
| 1.1.2 乳脂合成 | 第14页 |
| 1.1.3 乳糖合成 | 第14-15页 |
| 1.1.4 MECs的增殖 | 第15页 |
| 1.2 调控BMECs乳合成的细胞信号转导途径 | 第15-19页 |
| 1.2.1 mTOR途径对乳蛋白和乳脂合成的调控 | 第15-16页 |
| 1.2.2 SREBP-1 途径对乳脂合成的调控 | 第16-17页 |
| 1.2.3 β4GalT对乳糖合成的调控 | 第17页 |
| 1.2.4 Cyclin D1对MECs增殖的调控 | 第17页 |
| 1.2.5 外源激素、生长因子和营养素对乳合成和细胞增殖的调控 | 第17-19页 |
| 1.3 氨基酰tRNA合成酶 | 第19-20页 |
| 1.3.1 氨基酰tRNA合成酶的基本结构 | 第19页 |
| 1.3.2 aaRSs的非经典功能 | 第19-20页 |
| 1.3.3 甘氨酰tRNA合成酶的非经典功能 | 第20页 |
| 1.4 实验的目的与意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 主要实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第23页 |
| 2.1.3 实验动物与细胞 | 第23-24页 |
| 2.1.4 试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法与步骤 | 第25-35页 |
| 2.2.1 BMECs的原代培养与纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.2 BMECs的鉴定 | 第26-28页 |
| 2.2.3 添加Met、FBS的BMECs泌乳模型的建立 | 第28页 |
| 2.2.4 过表达GlyRS的BMECs泌乳模型的建立 | 第28-29页 |
| 2.2.5 抑制GlyRS的BMECs泌乳模型的建立 | 第29-32页 |
| 2.2.6 添加Met、FBS后对BMECs乳合成以及细胞增殖的影响 | 第32-33页 |
| 2.2.7 GlyRS过表达后对BMECs乳合成以及细胞增殖的影响 | 第33-34页 |
| 2.2.8 GlyRS抑制后对BMECs乳合成以及细胞增殖的影响 | 第34页 |
| 2.2.9 数据处理 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-54页 |
| 3.1 BMECs的原代培养 | 第35-36页 |
| 3.2 加Met、FBS后对BMECs乳合成以及细胞增殖的影响 | 第36-42页 |
| 3.2.1 加Met、FBS后对BMECs乳糖分泌的影响 | 第36-37页 |
| 3.2.2 加Met、FBS后对BMECs TG分泌的影响 | 第37-38页 |
| 3.2.3 加Met、FBS后对BMECs增殖的影响 | 第38-39页 |
| 3.2.4 Met、FBS调节BMECs中相关基因的表达 | 第39-40页 |
| 3.2.5 加Met、FBS后对p-GlyRS核定位的影响 | 第40-42页 |
| 3.3 GlyRS过表达后可上调BMECs的乳合成及细胞增殖 | 第42-46页 |
| 3.3.1 GlyRS过表达后增加BMECs乳糖的分泌 | 第42页 |
| 3.3.2 GlyRS过表达后增加BMECsTG的分泌 | 第42-43页 |
| 3.3.3 GlyRS过表达后促进DNA合成及加快细胞周期转换 | 第43-45页 |
| 3.3.4 GlyRS过表达后增加β4Gal-T2的mRNA表达量 | 第45页 |
| 3.3.5 GlyRS过表达后增加相关蛋白的表达 | 第45-46页 |
| 3.4 GlyRS抑制后可下调BMECs的乳合成及细胞增殖 | 第46-54页 |
| 3.4.1 GlyRS干扰片段的筛选 | 第46-48页 |
| 3.4.2 GlyRS抑制后减少BMECs乳糖的分泌 | 第48-49页 |
| 3.4.3 GlyRS抑制后减少BMECs 中TG的分泌 | 第49-50页 |
| 3.4.4 GlyRS抑制后减少DNA合成及减缓细胞周期转换 | 第50-52页 |
| 3.4.5 GlyRS抑制后降低β4Gal-T2的mRNA表达量 | 第52页 |
| 3.4.6 GlyRS抑制后降低相关蛋白水平的表达 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-59页 |
| 4.1 BMECs的原代培养、纯化及鉴定 | 第54页 |
| 4.2 Met和FBS对BMECs乳合成及细胞增殖的影响 | 第54-56页 |
| 4.2.1 Met和FBS对乳蛋白、乳脂及乳糖合成的影响 | 第54-55页 |
| 4.2.2 Met和FBS对BMECs增殖能力的影响 | 第55页 |
| 4.2.3 Met和FBS对GlyRS表达的影响 | 第55页 |
| 4.2.4 Met和FBS对p-GlyRS表达及入核的影响 | 第55-56页 |
| 4.3 GlyRS对BMECs乳合成以及细胞增殖的影响 | 第56-59页 |
| 4.3.1 GlyRS对BMECs乳蛋白合成的影响 | 第56页 |
| 4.3.2 GlyRS对BMECs乳脂合成的影响 | 第56页 |
| 4.3.3 GlyRS对BMECs乳糖合成的影响 | 第56-57页 |
| 4.3.4 GlyRS过表达与抑制对p-GlyRS表达的影响 | 第57页 |
| 4.3.5 GlyRS对细胞增殖的影响 | 第57-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文 | 第70页 |
