摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略表 | 第16-17页 |
第一章 绪论 | 第17-34页 |
1.1 肺癌的研究现状 | 第17-20页 |
1.1.1 肺癌的流行病学 | 第17页 |
1.1.2 肺癌的致病因素 | 第17-18页 |
1.1.3 肺癌的治疗现状 | 第18-20页 |
1.2 细胞死亡方式 | 第20-21页 |
1.2.1 细胞凋亡 | 第20页 |
1.2.2 自噬和自噬性细胞死亡 | 第20-21页 |
1.2.3 细胞坏死 | 第21页 |
1.3 细胞凋亡途径 | 第21-24页 |
1.3.1 死亡受体信号通路 | 第21-22页 |
1.3.2 线粒体信号通路 | 第22-23页 |
1.3.3 内质网信号通路 | 第23-24页 |
1.4 细胞凋亡相关蛋白 | 第24-27页 |
1.4.1 Caspase蛋白家族 | 第24-25页 |
1.4.2 Bcl-2家族蛋白 | 第25-26页 |
1.4.3 凋亡诱导因子 | 第26-27页 |
1.5 细胞周期相关蛋白 | 第27-30页 |
1.5.1 CDK | 第28页 |
1.5.2 Cyclins | 第28-29页 |
1.5.3 CDKI | 第29-30页 |
1.6 化学遗传学 | 第30-32页 |
1.6.1 化学遗传学的兴起 | 第30页 |
1.6.2 化学遗传学在抗癌方面的应用 | 第30-31页 |
1.6.3 小分子化合物的获得方法 | 第31-32页 |
1.7 研究目的、内容与意义 | 第32-34页 |
第二章 抑制肺癌生长的小分子化合物的筛选 | 第34-40页 |
2.1 材料与仪器 | 第34-35页 |
2.1.1 实验材料 | 第34页 |
2.1.2 主要试剂 | 第34页 |
2.1.3 实验仪器 | 第34-35页 |
2.2 实验方法 | 第35-38页 |
2.2.1 细胞培养 | 第35页 |
2.2.2 抗癌活性筛选 | 第35-37页 |
2.2.3 活性化合物浓度依赖效应检测 | 第37-38页 |
2.3 实验结果 | 第38-39页 |
2.4 小结 | 第39-40页 |
第三章 22-H7抑制A549细胞生长的分子机制研究 | 第40-58页 |
3.1 材料与仪器 | 第40-41页 |
3.1.1 主要试剂及耗材 | 第40页 |
3.1.2 实验仪器 | 第40-41页 |
3.2 实验方法 | 第41-47页 |
3.2.1 Hoechst 33342染色检测凋亡 | 第41页 |
3.2.2 流式细胞仪检测细胞周期 | 第41-42页 |
3.2.3 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第42-43页 |
3.2.4 线粒体膜电位检测 | 第43页 |
3.2.5 Caspase-3/7活性检测 | 第43-44页 |
3.2.6 Caspase-8活性检测 | 第44-45页 |
3.2.7 活性氧检测 | 第45-47页 |
3.3 实验结果 | 第47-55页 |
3.3.1 22-H7构效关系分析 | 第47-50页 |
3.3.2 化合物22-H7对A549细胞周期的影响 | 第50页 |
3.3.3 化合物22-H7诱导A549细胞凋亡 | 第50-55页 |
3.4 讨论 | 第55-57页 |
3.5 小结 | 第57-58页 |
第四章 30-G5抑制A549细胞生长的分子机制研究 | 第58-86页 |
4.1 材料与仪器 | 第58-62页 |
4.1.1 细胞系 | 第58页 |
4.1.2 主要试剂及耗材 | 第58-59页 |
4.1.3 细胞培养条件 | 第59页 |
4.1.4 试剂配制 | 第59-61页 |
4.1.5 抗体 | 第61页 |
4.1.6 实验仪器 | 第61-62页 |
4.2 实验方法 | 第62-75页 |
4.2.1 细胞生长抑制曲线检测 | 第62页 |
4.2.2 Hoechst 33342染色检测凋亡 | 第62页 |
4.2.3 流式细胞仪检测细胞周期 | 第62-63页 |
4.2.4 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第63页 |
4.2.5 线粒体膜电位检测 | 第63-64页 |
4.2.6 Caspase-8、9活性检测 | 第64-65页 |
4.2.7 Caspase-3/7活性检测 | 第65-66页 |
4.2.8 Caspase-3抑制剂对30-G5抑制细胞生长作用的影响 | 第66页 |
4.2.9 活性氧检测 | 第66-67页 |
4.2.10 钙离子检测 | 第67页 |
4.2.11 实时定量PCR检测 | 第67-71页 |
4.2.12 蛋白电泳 | 第71-74页 |
4.2.13 小干扰RNA的转染 | 第74-75页 |
4.3 实验结果 | 第75-84页 |
4.3.1 化合物30-G5的细胞生长抑制作用 | 第75-76页 |
4.3.2 30-G5对细胞周期的阻滞作用 | 第76页 |
4.3.3 30-G5诱导细胞发生凋亡 | 第76-81页 |
4.3.4 AIF在30-G5诱导凋亡过程中的作用 | 第81页 |
4.3.5 30-G5对胞内钙离子与活性氧水平的影响 | 第81-84页 |
4.4 讨论 | 第84-85页 |
4.5 小结 | 第85-86页 |
第五章 总结与展望 | 第86-87页 |
致谢 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-99页 |
附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第99页 |