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抑制肺癌细胞生长的小分子化合物筛选及其机理研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略表第16-17页
第一章 绪论第17-34页
    1.1 肺癌的研究现状第17-20页
        1.1.1 肺癌的流行病学第17页
        1.1.2 肺癌的致病因素第17-18页
        1.1.3 肺癌的治疗现状第18-20页
    1.2 细胞死亡方式第20-21页
        1.2.1 细胞凋亡第20页
        1.2.2 自噬和自噬性细胞死亡第20-21页
        1.2.3 细胞坏死第21页
    1.3 细胞凋亡途径第21-24页
        1.3.1 死亡受体信号通路第21-22页
        1.3.2 线粒体信号通路第22-23页
        1.3.3 内质网信号通路第23-24页
    1.4 细胞凋亡相关蛋白第24-27页
        1.4.1 Caspase蛋白家族第24-25页
        1.4.2 Bcl-2家族蛋白第25-26页
        1.4.3 凋亡诱导因子第26-27页
    1.5 细胞周期相关蛋白第27-30页
        1.5.1 CDK第28页
        1.5.2 Cyclins第28-29页
        1.5.3 CDKI第29-30页
    1.6 化学遗传学第30-32页
        1.6.1 化学遗传学的兴起第30页
        1.6.2 化学遗传学在抗癌方面的应用第30-31页
        1.6.3 小分子化合物的获得方法第31-32页
    1.7 研究目的、内容与意义第32-34页
第二章 抑制肺癌生长的小分子化合物的筛选第34-40页
    2.1 材料与仪器第34-35页
        2.1.1 实验材料第34页
        2.1.2 主要试剂第34页
        2.1.3 实验仪器第34-35页
    2.2 实验方法第35-38页
        2.2.1 细胞培养第35页
        2.2.2 抗癌活性筛选第35-37页
        2.2.3 活性化合物浓度依赖效应检测第37-38页
    2.3 实验结果第38-39页
    2.4 小结第39-40页
第三章 22-H7抑制A549细胞生长的分子机制研究第40-58页
    3.1 材料与仪器第40-41页
        3.1.1 主要试剂及耗材第40页
        3.1.2 实验仪器第40-41页
    3.2 实验方法第41-47页
        3.2.1 Hoechst 33342染色检测凋亡第41页
        3.2.2 流式细胞仪检测细胞周期第41-42页
        3.2.3 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡第42-43页
        3.2.4 线粒体膜电位检测第43页
        3.2.5 Caspase-3/7活性检测第43-44页
        3.2.6 Caspase-8活性检测第44-45页
        3.2.7 活性氧检测第45-47页
    3.3 实验结果第47-55页
        3.3.1 22-H7构效关系分析第47-50页
        3.3.2 化合物22-H7对A549细胞周期的影响第50页
        3.3.3 化合物22-H7诱导A549细胞凋亡第50-55页
    3.4 讨论第55-57页
    3.5 小结第57-58页
第四章 30-G5抑制A549细胞生长的分子机制研究第58-86页
    4.1 材料与仪器第58-62页
        4.1.1 细胞系第58页
        4.1.2 主要试剂及耗材第58-59页
        4.1.3 细胞培养条件第59页
        4.1.4 试剂配制第59-61页
        4.1.5 抗体第61页
        4.1.6 实验仪器第61-62页
    4.2 实验方法第62-75页
        4.2.1 细胞生长抑制曲线检测第62页
        4.2.2 Hoechst 33342染色检测凋亡第62页
        4.2.3 流式细胞仪检测细胞周期第62-63页
        4.2.4 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡第63页
        4.2.5 线粒体膜电位检测第63-64页
        4.2.6 Caspase-8、9活性检测第64-65页
        4.2.7 Caspase-3/7活性检测第65-66页
        4.2.8 Caspase-3抑制剂对30-G5抑制细胞生长作用的影响第66页
        4.2.9 活性氧检测第66-67页
        4.2.10 钙离子检测第67页
        4.2.11 实时定量PCR检测第67-71页
        4.2.12 蛋白电泳第71-74页
        4.2.13 小干扰RNA的转染第74-75页
    4.3 实验结果第75-84页
        4.3.1 化合物30-G5的细胞生长抑制作用第75-76页
        4.3.2 30-G5对细胞周期的阻滞作用第76页
        4.3.3 30-G5诱导细胞发生凋亡第76-81页
        4.3.4 AIF在30-G5诱导凋亡过程中的作用第81页
        4.3.5 30-G5对胞内钙离子与活性氧水平的影响第81-84页
    4.4 讨论第84-85页
    4.5 小结第85-86页
第五章 总结与展望第86-87页
致谢第87-89页
参考文献第89-99页
附录A 攻读硕士期间发表论文目录第99页

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