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当归芍药散含药血清对ET-1介导的肝星状细胞收缩的抑制作用及其相关机制的研究

中文摘要第9-11页
ABSTRACT第11-13页
英文缩略词(Abbreviation)第14-16页
前言第16-18页
第一部分 当归芍药散含药血清对HSC-T6细胞分泌ET-1 水平的影响第18-30页
    1 实验材料及仪器第18-19页
        1.1 药材第18页
        1.2 细胞株及动物第18页
        1.3 主要试剂第18-19页
        1.4 主要试剂配制第19页
        1.5 主要仪器第19页
    2 实验方法第19-24页
        2.1 细胞复苏第19-20页
        2.2 细胞培养和传代第20页
        2.3 细胞冻存第20页
        2.4 细胞计数第20页
        2.5 样品制备第20-21页
            2.5.1 当归芍药散提取液的制备第20页
            2.5.2 当归芍药散含药血清的制备第20-21页
        2.6 不同浓度空白大鼠血清对HSC-T6细胞毒性实验(MTT法)第21页
        2.7 指标检测第21-24页
            2.7.1 ELISA法检测各组HSC-T6细胞上清液ET-1 蛋白表达第21-22页
                2.7.1.1 实验分组第21页
                2.7.1.2 收集细胞上清液第21-22页
                2.7.1.3 检测ET-1 含量第22页
            2.7.2 qRT-PCR法检测各组HSC-T6细胞ET-1 m RNA表达第22-24页
                2.7.2.1 实验分组第22-23页
                2.7.2.2 提取细胞总RNA第23页
                2.7.2.3 RNA纯度和浓度检测第23-24页
        2.8 统计方法第24页
    3 实验结果第24-28页
        3.1 不同浓度的空白大鼠血清对HSC-T6细胞毒性实验第24-25页
        3.2 当归芍药散含药血清对HSC-T6细胞上清液中ET-1 含量的影响第25页
        3.3 当归芍药散含药血清对HSC-T6细胞ET-1m RNA表达的影响第25-28页
    4 讨论第28-30页
        4.1 采用血清药理学研究方法的依据第28-29页
        4.2 当归芍药散含药血清对肝星状细胞自分泌ET-1 的抑制作用第29-30页
第二部分 当归芍药散含药血清对ET-1 诱导的HSC-T6细胞收缩的影响第30-38页
    1 实验材料及仪器第30页
        1.1 细胞株及动物第30页
        1.2 主要试剂第30页
        1.3 主要耗材第30页
        1.4 主要仪器第30页
    2 实验方法第30-33页
        2.1 细胞培养第30页
        2.2 实验分组及给药第30-31页
        2.3 HSC-T6形态变化第31-32页
        2.4 HSC-T6细胞收缩第32-33页
            2.4.1 I型鼠尾胶原法观察HSC-T6细胞的收缩第32-33页
                2.4.1.1 原理第32页
                2.4.1.2 胶原制备方法第32-33页
        2.5 统计方法第33页
    3 实验结果第33-36页
        3.1 HSC-T6细胞形态变化第33-34页
        3.2 HSC-T6细胞收缩第34-36页
    4 讨论第36-38页
        4.1 当归芍药散含药血清对ET-1 诱导的HSC-T6细胞形态影响第36页
        4.2 当归芍药散含药血清对ET-1 诱导的HSC-T6细胞收缩的影响第36-38页
第三部分 当归芍药散含药血清影响ET-1 诱导的HSC-T6细胞收缩的信号途径第38-50页
    1 实验材料及仪器第38-40页
        1.1 细胞株第38页
        1.2 主要试剂第38-39页
        1.3 主要试剂的配制第39-40页
        1.4 主要仪器第40页
    2 实验方法第40-44页
        2.1 细胞培养第40页
        2.2 实验分组及给药第40-41页
        2.3 Western blot法检测各组HSC-T6细胞中Rho A、ROCKⅡ、p-MLCⅡ、MLCⅡ蛋白表达第41-44页
            2.3.1 蛋白样品制备第41页
            2.3.2 蛋白定量第41-42页
            2.3.3 SDS-PAGE凝胶电泳第42-43页
            2.3.4 转膜第43页
            2.3.5 一抗、二抗孵育第43-44页
            2.3.6 化学发光、显影、定影第44页
            2.3.7 结果分析第44页
        2.4 统计方法与处理第44页
    3 实验结果第44-48页
        3.1 当归芍药散含药血清对ET-1诱导的HSC-T6细胞内RhOA、ROCKⅡ蛋白的影响第44-46页
        3.2 当归芍药散含药血清对ET-1 诱导的HSC-T6细胞内p-MLCⅡ、MLCⅡ蛋白的影响第46-47页
        3.3 当归芍药散含药血清对ET-1 诱导的HSC-T6细胞内eNOS蛋白的影响第47-48页
    4.讨论第48-50页
总结第50-51页
参考文献第51-55页
综述 肝星状细胞对门静脉高压作用的研究进展第55-63页
    参考文献第60-63页
个人简介第63页
硕士期间发表的科研论文第63-64页
致谢第64页

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