中文摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
英文缩略词(Abbreviation) | 第14-16页 |
前言 | 第16-18页 |
第一部分 当归芍药散含药血清对HSC-T6细胞分泌ET-1 水平的影响 | 第18-30页 |
1 实验材料及仪器 | 第18-19页 |
1.1 药材 | 第18页 |
1.2 细胞株及动物 | 第18页 |
1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
1.4 主要试剂配制 | 第19页 |
1.5 主要仪器 | 第19页 |
2 实验方法 | 第19-24页 |
2.1 细胞复苏 | 第19-20页 |
2.2 细胞培养和传代 | 第20页 |
2.3 细胞冻存 | 第20页 |
2.4 细胞计数 | 第20页 |
2.5 样品制备 | 第20-21页 |
2.5.1 当归芍药散提取液的制备 | 第20页 |
2.5.2 当归芍药散含药血清的制备 | 第20-21页 |
2.6 不同浓度空白大鼠血清对HSC-T6细胞毒性实验(MTT法) | 第21页 |
2.7 指标检测 | 第21-24页 |
2.7.1 ELISA法检测各组HSC-T6细胞上清液ET-1 蛋白表达 | 第21-22页 |
2.7.1.1 实验分组 | 第21页 |
2.7.1.2 收集细胞上清液 | 第21-22页 |
2.7.1.3 检测ET-1 含量 | 第22页 |
2.7.2 qRT-PCR法检测各组HSC-T6细胞ET-1 m RNA表达 | 第22-24页 |
2.7.2.1 实验分组 | 第22-23页 |
2.7.2.2 提取细胞总RNA | 第23页 |
2.7.2.3 RNA纯度和浓度检测 | 第23-24页 |
2.8 统计方法 | 第24页 |
3 实验结果 | 第24-28页 |
3.1 不同浓度的空白大鼠血清对HSC-T6细胞毒性实验 | 第24-25页 |
3.2 当归芍药散含药血清对HSC-T6细胞上清液中ET-1 含量的影响 | 第25页 |
3.3 当归芍药散含药血清对HSC-T6细胞ET-1m RNA表达的影响 | 第25-28页 |
4 讨论 | 第28-30页 |
4.1 采用血清药理学研究方法的依据 | 第28-29页 |
4.2 当归芍药散含药血清对肝星状细胞自分泌ET-1 的抑制作用 | 第29-30页 |
第二部分 当归芍药散含药血清对ET-1 诱导的HSC-T6细胞收缩的影响 | 第30-38页 |
1 实验材料及仪器 | 第30页 |
1.1 细胞株及动物 | 第30页 |
1.2 主要试剂 | 第30页 |
1.3 主要耗材 | 第30页 |
1.4 主要仪器 | 第30页 |
2 实验方法 | 第30-33页 |
2.1 细胞培养 | 第30页 |
2.2 实验分组及给药 | 第30-31页 |
2.3 HSC-T6形态变化 | 第31-32页 |
2.4 HSC-T6细胞收缩 | 第32-33页 |
2.4.1 I型鼠尾胶原法观察HSC-T6细胞的收缩 | 第32-33页 |
2.4.1.1 原理 | 第32页 |
2.4.1.2 胶原制备方法 | 第32-33页 |
2.5 统计方法 | 第33页 |
3 实验结果 | 第33-36页 |
3.1 HSC-T6细胞形态变化 | 第33-34页 |
3.2 HSC-T6细胞收缩 | 第34-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
4.1 当归芍药散含药血清对ET-1 诱导的HSC-T6细胞形态影响 | 第36页 |
4.2 当归芍药散含药血清对ET-1 诱导的HSC-T6细胞收缩的影响 | 第36-38页 |
第三部分 当归芍药散含药血清影响ET-1 诱导的HSC-T6细胞收缩的信号途径 | 第38-50页 |
1 实验材料及仪器 | 第38-40页 |
1.1 细胞株 | 第38页 |
1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第39-40页 |
1.4 主要仪器 | 第40页 |
2 实验方法 | 第40-44页 |
2.1 细胞培养 | 第40页 |
2.2 实验分组及给药 | 第40-41页 |
2.3 Western blot法检测各组HSC-T6细胞中Rho A、ROCKⅡ、p-MLCⅡ、MLCⅡ蛋白表达 | 第41-44页 |
2.3.1 蛋白样品制备 | 第41页 |
2.3.2 蛋白定量 | 第41-42页 |
2.3.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第42-43页 |
2.3.4 转膜 | 第43页 |
2.3.5 一抗、二抗孵育 | 第43-44页 |
2.3.6 化学发光、显影、定影 | 第44页 |
2.3.7 结果分析 | 第44页 |
2.4 统计方法与处理 | 第44页 |
3 实验结果 | 第44-48页 |
3.1 当归芍药散含药血清对ET-1诱导的HSC-T6细胞内RhOA、ROCKⅡ蛋白的影响 | 第44-46页 |
3.2 当归芍药散含药血清对ET-1 诱导的HSC-T6细胞内p-MLCⅡ、MLCⅡ蛋白的影响 | 第46-47页 |
3.3 当归芍药散含药血清对ET-1 诱导的HSC-T6细胞内eNOS蛋白的影响 | 第47-48页 |
4.讨论 | 第48-50页 |
总结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
综述 肝星状细胞对门静脉高压作用的研究进展 | 第55-63页 |
参考文献 | 第60-63页 |
个人简介 | 第63页 |
硕士期间发表的科研论文 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |