| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第13-37页 |
| 1.1 金属纳米簇概述 | 第13-19页 |
| 1.1.1 金属纳米簇定义 | 第13页 |
| 1.1.2 金属纳米簇特性 | 第13-14页 |
| 1.1.3 金属纳米簇制备 | 第14-19页 |
| 1.1.3.1 以巯基化合物为配体制备金属纳米簇 | 第14-15页 |
| 1.1.3.2 以聚合物或树枝状化合物为配体制备金属纳米簇 | 第15-17页 |
| 1.1.3.3 以寡核苷酸DNA为配体制备金属纳米簇 | 第17-18页 |
| 1.1.3.4 以蛋白质为配体制备金属纳米簇 | 第18-19页 |
| 1.2 金属纳米簇的应用 | 第19-29页 |
| 1.2.1 检测金属离子 | 第19-22页 |
| 1.2.2 检测小分子 | 第22-24页 |
| 1.2.3 检测DNA和miRNAs | 第24-25页 |
| 1.2.4 检测蛋白质 | 第25-27页 |
| 1.2.5 生物标记和生物成像 | 第27-29页 |
| 1.3 蛋白质磷酸化和蛋白激酶 | 第29-34页 |
| 1.3.1 蛋白质磷酸化概述 | 第29-30页 |
| 1.3.2 蛋白激酶概述 | 第30页 |
| 1.3.3 蛋白激酶分类 | 第30-31页 |
| 1.3.3.1 蛋白激酶CK2 | 第31页 |
| 1.3.3.2 蛋白激酶A | 第31页 |
| 1.3.4 检测蛋白激酶的意义 | 第31-32页 |
| 1.3.5 蛋白激酶的检测方法 | 第32-34页 |
| 1.4 本论文主要研究内容 | 第34-37页 |
| 第2章 原位制备金纳米簇免标记荧光检测蛋白激酶活性 | 第37-54页 |
| 2.1 引言 | 第37-38页 |
| 2.2 实验部分 | 第38-40页 |
| 2.2.1 化学试剂 | 第38-39页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第39页 |
| 2.2.3 多肽-金纳米簇制备 | 第39页 |
| 2.2.4 检测蛋白激酶CK2活性 | 第39-40页 |
| 2.2.5 蛋白激酶CK2抑制剂的检测及IC_(50)分析 | 第40页 |
| 2.2.6 荧光测量 | 第40页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第40-53页 |
| 2.3.1 多肽-金纳米簇表征 | 第40-43页 |
| 2.3.2 多肽-金纳米簇体系检测蛋白激酶CK2活性原理 | 第43-47页 |
| 2.3.3 实验条件的优化 | 第47-49页 |
| 2.3.4 荧光检测蛋白激酶CK2 | 第49页 |
| 2.3.5 共振光散射检测蛋白激酶CK2 | 第49-51页 |
| 2.3.6 在人体血清中检测蛋白激酶CK2的抑制剂以及其IC_(50) | 第51-53页 |
| 2.4 结论 | 第53-54页 |
| 第3章 基于磷酸根抑制羧肽酶Y水解多肽银纳米簇荧光检测多肽磷酸化 | 第54-65页 |
| 3.1 引言 | 第54-56页 |
| 3.2 实验部分 | 第56-58页 |
| 3.2.1 化学试剂 | 第56页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第56页 |
| 3.2.3 蛋白激酶CK2催化多肽磷酸化及羧肽酶Y水解多肽 | 第56-57页 |
| 3.2.4 多肽-银纳米簇制备 | 第57页 |
| 3.2.5 蛋白质磷酸化检测（荧光光谱检测） | 第57页 |
| 3.2.6 蛋白质磷酸化抑制剂检测及IC_(50)分析 | 第57-58页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第58-64页 |
| 3.3.1 基于磷酸根抑制羧肽酶Y水解多肽的荧光检测蛋白质磷酸化原理 | 第58-59页 |
| 3.3.2 多肽-银纳米簇表征 | 第59-61页 |
| 3.3.3 实验条件的优化 | 第61-63页 |
| 3.3.4 蛋白质磷酸化检测 | 第63页 |
| 3.3.5 蛋白质磷酸化抑制剂检测 | 第63-64页 |
| 3.4 结论 | 第64-65页 |
| 第4章 基于羧肽酶Y对多肽-金纳米簇的猝灭作用荧光“turn on”检测蛋白激酶 | 第65-78页 |
| 4.1 引言 | 第65-66页 |
| 4.2 实验部分 | 第66-68页 |
| 4.2.1 化学试剂 | 第66-67页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第67页 |
| 4.2.3 多肽-金纳米簇制备 | 第67页 |
| 4.2.4 检测蛋白激酶PKA活性 | 第67-68页 |
| 4.2.5 蛋白激酶PKA抑制剂检测及IC_(50)值分析 | 第68页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第68-77页 |
| 4.3.1 多肽-金纳米簇表征 | 第68-72页 |
| 4.3.2 多肽-金纳米簇荧光“turn on”检测蛋白激酶PKA原理 | 第72-75页 |
| 4.3.3 实验条件的优化 | 第75页 |
| 4.3.4 蛋白激酶PKA检测 | 第75-76页 |
| 4.3.5 在人体血清中检测蛋白激酶PKA抑制剂 | 第76-77页 |
| 4.4 结论 | 第77-78页 |
| 第5章 基于金纳米簇-量子点双波长发射比率荧光探针检测蛋白激酶 | 第78-94页 |
| 5.1 引言 | 第78-80页 |
| 5.2 实验部分 | 第80-83页 |
| 5.2.1 实验试剂 | 第80-81页 |
| 5.2.2 仪器设备 | 第81-82页 |
| 5.2.3 多肽-金纳米簇制备 | 第82页 |
| 5.2.4 制备羧基化的CdSe/ZnS QDs@SiO_2纳米粒子 | 第82页 |
| 5.2.5 制备QDs@SiO_2@Au NCs复合纳米材料 | 第82页 |
| 5.2.6 检测蛋白激酶PKA活性 | 第82-83页 |
| 5.2.7 蛋白激酶PKA抑制剂的检测及IC_(50)分析 | 第83页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第83-93页 |
| 5.3.1 peptide-AuNCs及QDs@SiO_2@Au NCs复合纳米材料表征 | 第83-87页 |
| 5.3.2 实验条件的优化 | 第87-89页 |
| 5.3.3 以QDs@SiO_2@Au NCs复合纳米材料为比率荧光探针检测蛋白激酶PKA原理 | 第89-90页 |
| 5.3.4 蛋白激酶PKA检测 | 第90-92页 |
| 5.3.5 在人体血清中检测蛋白激酶PKA抑制剂以及IC_(50)实验 | 第92-93页 |
| 5.4 结论 | 第93-94页 |
| 第6章 基于多肽模板化的两种金属纳米簇同时检测蛋白激酶PKA和CK2 | 第94-110页 |
| 6.1 引言 | 第94-96页 |
| 6.2 实验部分 | 第96-98页 |
| 6.2.1 试剂 | 第96页 |
| 6.2.2 仪器设备 | 第96-97页 |
| 6.2.3 发蓝光的多肽-铜纳米簇制备 | 第97页 |
| 6.2.4 发红光的多肽-金纳米簇制备 | 第97页 |
| 6.2.5 检测蛋白激酶PKA活性 | 第97页 |
| 6.2.6 检测蛋白激酶CK2活性 | 第97-98页 |
| 6.2.7 同时检测蛋白激酶CK2和蛋白激酶PKA活性 | 第98页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第98-108页 |
| 6.3.1 多肽-铜纳米簇与多肽-金纳米簇表征 | 第98-101页 |
| 6.3.2 同时检测蛋白激酶PKA和CK2活性原理 | 第101-103页 |
| 6.3.3 分别检测两种蛋白激酶活性 | 第103-106页 |
| 6.3.4 同时检测两种蛋白激酶活性 | 第106-108页 |
| 6.4 结论 | 第108-110页 |
| 第7章 总结与展望 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第126页 |
