| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 L-亮氨酸的理化性质 | 第12页 |
| 1.2 L-亮氨酸的应用 | 第12-13页 |
| 1.3 L-亮氨酸的生产方法 | 第13页 |
| 1.3.1 蛋白质水解提取法 | 第13页 |
| 1.3.2 直接发酵法 | 第13页 |
| 1.4 L-亮氨酸的生物合成途径及代谢调节机制 | 第13-16页 |
| 1.4.1 L-亮氨酸的生物合成途径 | 第13-14页 |
| 1.4.2 L-亮氨酸的代谢调控机制 | 第14-16页 |
| 1.5 L-亮氨酸的代谢调控育种 | 第16-17页 |
| 1.5.1 选育营养缺陷型菌株，切断或改变平行代谢途径 | 第16页 |
| 1.5.2 选育抗结构类似物突变株，解除反馈抑制和阻遏 | 第16页 |
| 1.5.3 增加代谢前体物合成 | 第16页 |
| 1.5.4 切断进一步代谢途径 | 第16-17页 |
| 1.6 L-亮氨酸的代谢工程改造 | 第17-18页 |
| 1.6.1 加速速度限制的反应 | 第17页 |
| 1.6.2 切断旁支路代谢途径 | 第17页 |
| 1.6.3 弱化启动子强化目的代谢流 | 第17-18页 |
| 1.6.4 转运蛋白和输出蛋白的代谢工程改造 | 第18页 |
| 1.7 L-亮氨酸的发酵工艺优化 | 第18-20页 |
| 1.7.1 培养基对发酵生产L-亮氨酸的影响 | 第18-19页 |
| 1.7.2 培养条件对发酵产L-亮氨酸的影响 | 第19-20页 |
| 1.7.2.1 溶氧与发酵的关系 | 第19页 |
| 1.7.2.2 接种量与发酵的关系 | 第19页 |
| 1.7.2.3 菌体浓度与产酸的关系 | 第19-20页 |
| 1.7.2.4 基质浓度与产物浓度 | 第20页 |
| 1.7.2.5 温度和p H的影响 | 第20页 |
| 1.8 L-亮氨酸的检测 | 第20页 |
| 1.9 立题背景及主要研究内容 | 第20-21页 |
| 1.10 研究创新点 | 第21-22页 |
| 1.11 技术路线 | 第22-23页 |
| 第2章 L-亮氨酸产生菌摇瓶分批发酵条件的研究 | 第23-35页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.2.1 菌种 | 第23页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第24页 |
| 2.2.3.1 纸层析-色斑洗脱比色法主要溶液 | 第24页 |
| 2.2.4 培养基 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-26页 |
| 2.3.1 菌种活化 | 第25页 |
| 2.3.2 种子培养及生长曲线测定 | 第25页 |
| 2.3.3 发酵培养基优化 | 第25-26页 |
| 2.4 分析方法 | 第26-27页 |
| 2.4.1 细胞浓度的测定 | 第26页 |
| 2.4.2 pH的测定 | 第26页 |
| 2.4.3 葡萄糖浓度的测定 | 第26页 |
| 2.4.4 产酸测定 | 第26-27页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第27-34页 |
| 2.5.1 JL1211菌株生长曲线 | 第27-28页 |
| 2.5.2 L-亮氨酸标准曲线 | 第28-29页 |
| 2.5.3 发酵条件优化 | 第29-34页 |
| 2.6 本章小结 | 第34-35页 |
| 第3章 不同规格及添加量的三甲基甘氨酸对L-亮氨酸补料分批发酵的影响 | 第35-48页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.2.1 菌种 | 第35页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第35页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第35-36页 |
| 3.2.4 培养基 | 第36页 |
| 3.3 实验方法 | 第36页 |
| 3.3.1 菌种活化 | 第36页 |
| 3.3.2 种子培养 | 第36页 |
| 3.3.3 5L罐发酵培养 | 第36页 |
| 3.4 分析方法 | 第36页 |
| 3.5 结果与讨论 | 第36-46页 |
| 3.5.1 发酵过程葡萄糖浓度条件优化 | 第36-39页 |
| 3.5.2 发酵过程中添加不同浓度的无水三甲基甘氨酸的发酵条件优化 | 第39-41页 |
| 3.5.3 发酵过程中添加不同类型三甲基甘氨酸的发酵条件优化 | 第41-46页 |
| 3.6 本章小结 | 第46-48页 |
| 第4章 三甲基甘氨酸添加对L-亮氨酸代谢流的影响 | 第48-54页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 实验材料 | 第48页 |
| 4.2.1 菌种 | 第48页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第48页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第48页 |
| 4.2.4 培养基 | 第48页 |
| 4.3 实验方法 | 第48-50页 |
| 4.3.1 代谢流分析 | 第48-50页 |
| 4.3.2 5L发酵罐培养 | 第50页 |
| 4.3.3 目标产物测定 | 第50页 |
| 4.4 结果与分析 | 第50-52页 |
| 4.4.1 代谢流分布 | 第50-52页 |
| 4.4.2 L-亮氨酸发酵中后期代谢流节点分析 | 第52页 |
| 4.4.2.1 Pyr节点的代谢流分析 | 第52页 |
| 4.4.2.2 α-KG节点的代谢流分析 | 第52页 |
| 4.5 本章小结 | 第52-54页 |
| 第5章 三甲基甘氨酸对L-亮氨酸生产菌细胞转录水平影响 | 第54-67页 |
| 5.1 引言 | 第54页 |
| 5.2 实验材料 | 第54-55页 |
| 5.2.1 菌种 | 第54页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第54页 |
| 5.2.3 主要试剂 | 第54页 |
| 5.2.4 培养基 | 第54-55页 |
| 5.3 实验方法 | 第55-61页 |
| 5.3.1 5L发酵罐培养 | 第55页 |
| 5.3.2 样品选取 | 第55页 |
| 5.3.3 转录组分析实验流程 | 第55-61页 |
| 5.3.3.1 测序流程图 | 第55-56页 |
| 5.3.3.2 信息分析流程图 | 第56页 |
| 5.3.3.3 基因表达及注释 | 第56-57页 |
| 5.3.3.4 表达差异分析 | 第57-59页 |
| 5.3.3.5 表达差异基因GO分析 | 第59-60页 |
| 5.3.3.6 表达差异基因Pathway分析 | 第60页 |
| 5.3.3.7 表达差异基因热图 | 第60-61页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第61-66页 |
| 5.4.1 基因表达及注释 | 第61-62页 |
| 5.4.2 表达差异分析 | 第62页 |
| 5.4.3 表达差异基因GO分析 | 第62-64页 |
| 5.4.4 表达差异基因Pathway分析 | 第64-65页 |
| 5.4.5 表达差异基因热图 | 第65-66页 |
| 5.5 本章小结 | 第66-67页 |
| 第6章 结论与展望 | 第67-69页 |
| 6.1 结论 | 第67-68页 |
| 6.2 展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-80页 |
| 附录 | 第80-83页 |
| 攻读学位期间所取得的科研成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
